Utvärdering av ett nytt mikrobiologiskt diagnostiskt test för latent Mycobacterium Tuberculosis-infektion (MICRO-LTBI)

Mål:

i) För att avgöra om M. tuberculosis (Mtb) DNA kan detekteras i CD34+ mononukleära blodceller (PBMC) isolerade från

• asymtomatiska vuxna som screenas för LTBI (LTBI-screenade)
• vuxna med nydiagnostiserad aktiv tuberkulos (aktiva fall) ii) Att avgöra om stammar av Mtb isolerade från CD34+ PBMC från de senaste hushålls-TB-kontakter är genetiskt identiska med de som isolerats från sputum från indexfall med lung-TB som de har exponerats för iii ) Att karakterisera immunologiska, kliniska och epidemiologiska korrelat av förmåga att detektera Mtb i CD34+ PBMC i en heterogen population av IGRA-positiva och -negativa LTBI-screenade.

iv) För att fastställa om närvaron av Mtb-DNA i CD34+ PBMC hos IGRA-positiva LTBI-screenade associerar med närvaron av en transkriptionssignatur av perifert blod som nyligen rapporterats för att förutsäga risken för progression till aktiv TB v) För att bedöma longitudinell förändring i CD34+ PCR-analysen resulterar i

- LTBI screenees som fullföljer kemoprofylax för LTBI

• LTBI-screenade som inte får kemoprofylax
• Patienter som avslutar behandling för aktiv TB

4.1. Bakgrund

Tuberkulos (TB) är en infektionssjukdom som orsakas av organismer av M. tuberculosis-komplexet (MTBC). Den primära patogenen hos människor är M.tuberculosis (Mtb). TB påverkar vanligtvis lungorna och överförs genom inandning av infektiösa droppar upphostade av en patient med aktiv lung-TB. Tuberkulos har varit en viktig orsak till sjuklighet och dödlighet genom mänsklighetens historia. I Europa och Nordamerika följdes en ökning av antalet tuberkulosfall under 1600- och 1700-talet av en snabb nedgång främst tillskrivet förbättrade socioekonomiska förhållanden, tillämpning av folkhälsoåtgärder och isolering av tuberkulospatienter.1 Mot slutet av 1800-talet, efter den nedåtgående trenden av TB-fall och dödsfall i Europa och Nordamerika, blev två stora händelser, upptäckten av Mtb och röntgen, nyckeln i diagnosen och hantering av tuberkulos.1 Därefter ledde vaccination med M. bovis bacille Calmette-Guérin (BCG) och antibiotikabehandling under första hälften av 1900-talet till global optimism om att kontroll och eliminering av tuberkulos var inom räckhåll. Emellertid är TB fortfarande ett allvarligt hot mot folkhälsan och det är den näst ledande smittsamma dödsorsaken globalt. 2, 3 Enligt WHO-rapporten från 2015 inträffade uppskattningsvis 9,6 miljoner nya TB-fall (varav 12 % var HIV-infekterade) och 1,5 miljoner dödsfall (varav 0,4 miljoner var bland HIV-saminfekterade personer) globalt 2014.4 Dessutom beräknas en tredjedel av världens befolkning ha latent Mtb-infektion (LTBI), av vilka cirka 10 % kommer att utveckla aktiv TB under sin livstid.5

Även om endast 22 låg- eller medelinkomstländer (LMIC) står för 80 % av den globala bördan, är tuberkulos fortfarande en viktig sjukdom bland invandrarbefolkningar i höginkomstländer. I Storbritannien (Storbritannien) har minskningen av TB-incidensen på 1900-talet vänt med en ökning på 50 % av TB-anmälningarna mellan 1998 och 2009.6 Under 2013 rapporterades totalt 7 892 TB-fall motsvarande en incidens på 12,3 per 100 000 invånare per år, den högsta bland höginkomstländer.7 En hög andel (37,8 %) av TB-fallen i Storbritannien finns i London, där TB-incidensen är 35,5 per 100 000 invånare per år; invandrare från Indien (30 %), Pakistan (20 %) och Somalia (5 %) stod för majoriteten av dessa fall.7

För närvarande är nyckelstrategierna för kontroll av tuberkulos korrekt och snabb diagnos av aktiv sjukdom tillsammans med effektiv behandling för att avbryta överföringen. Men försenad diagnos är en stor utmaning som underlättar överföring i samhällen.8 I allmänhet tar det flera månader från det att symtomen börjar tills en TB-patient påbörjar behandlingen. Till exempel, i Storbritannien börjar nästan en tredjedel av lung-TB-patienterna behandling fyra månader efter symtomdebut.7 Sådana långa förseningar, tillsammans med den stora poolen av LTBI, tyder på behovet av interventioner för att identifiera och behandla individer med LTBI för att uppnå TB-kontroll. Antimikrobiell behandling av LTBI (kemoprofylax) är effektiv för att minska risken för reaktivering och implementeras rutinmässigt i miljöer med hög inkomst och låg incidens. Implementeringen av denna policy, särskilt i miljöer med hög börda, hindras dock av avsaknaden av ett diagnostiskt test för att identifiera den delmängd av Mtb-sensibiliserade individer som löper risk att utveckla aktiv TB, som kemoprofylax bör riktas mot.

För närvarande ställs diagnosen LTBI genom att detektera ett adaptivt immunsvar mot Mtb-infektion, antingen in vivo (med tuberkulinhudtestet) eller ex vivo (med hjälp av Interferon-Gamma Release Assays [IGRAs]). Detta tillvägagångssätt, som inte detekterar Mtb direkt, är begränsat genom att det inte kan skilja de 10 % av sensibiliserade individer som löper risk för reaktivering (där kemoprofylax kan vara till nytta) från de 90 % som är immunologiskt sensibiliserade men som inte gör det. utvecklas till aktiv sjukdom (i vilken kemoprofylax inte ger någon fördel). Denna senare grupp är potentiellt heterogen: vissa kan ha eliminerat infektionen, medan andra kan ha LTBI men kan hålla kvar den på obestämd tid.9 Verktyg för att dissekera ut dessa möjliga fenotyper skulle kunna möjliggöra mer exakt inriktning av kemoprofylax, men de saknas för närvarande. I denna studie kommer utredarna att undersöka om Mtb kan detekteras i CD34+-celler isolerade från perifert blod från a) vuxna som screenas för LTBI (LTBI-screenade) och b) vuxna med nydiagnostiserad aktiv TB (aktiva fall).

4.2. Motiv för studien

Denna studie bygger på en nyligen observation av en av medutredarna (Stephen Reece) som ingick i en grupp vid Max Planck Institute for Infection Biology, Berlin, som har upptäckt Mtb-DNA i CD34+ långtidsåterpopulerande pluripotenta hematopoetiska stamceller (LTpHSCs) isolerad från 100 ml perifert blod från sju friska vuxna med LTBI (positivt IGRA, aktiv TB exkluderad); Mtb-DNA detekterades inte i LTpHSC från sju IGRA-negativa friska vuxna. 10 Om detta anmärkningsvärda fynd kan replikeras i en annan miljö kan det leda till utvecklingen av ett nytt mikrobiologiskt test ('CD34+ PCR-analysen') med flera potentiella tillämpningar:

a) att identifiera individer som är latent infekterade med antibiotikaresistent Mtb (som möjliggör val av en lämplig kemoprofylaxregim), b) att övervaka effektiviteten av kemoprofylax och interventioner utformade för att förhindra förvärv av LTBI, såsom vacciner och program för mikronäringstillskott, c. ) att spåra spridning av särskilda stammar genom en befolkning (tillhandahålla ett verktyg för folkhälsointervention), d) till skilja mellan Mtb-sensibiliserade individer som löper risk att utvecklas till aktiv sjukdom kontra de som inte gör det, vilket gör att kemoprofylax kan riktas mot populationer som kan dra nytta av det, och e) för att ge nya insikter i immunbiologin för LTBI och patogenesen av mänsklig tuberkulos.

4.3. Hypoteser

i) Mtb-DNA kan detekteras i CD34+ PBMC hos asymtomatiska IGRA-positiva vuxna och aktiva fall av TB vid diagnos, men inte hos IGRA-negativa vuxna.

ii) Stammar av Mtb isolerade från CD34+ PBMC av asymtomatiska IGRA-positiva TB-kontakter kommer att vara genetiskt identiska med de som isolerats från sputum från indexfall av pulmonell TB som de nyligen har exponerats för.

iii) Förmåga att detektera Mtb-DNA i CD34+ PBMC från LTBI-screenade associerade med IGRA-resultat samt erkända kliniska och epidemiologiska riskfaktorer för LTBI iv) Förmåga att detektera Mtb-DNA i CD34+ PBMC från IGRA-positiva LTBI-screenade associerade med perifera signaturblodtransskriptioner tidigare definierat att vara associerad med progression till aktiv TB v) Antimikrobiell terapi är effektiv för att eliminera Mtb från CD34+ PBMC isolerade från individer med LTBI eller aktiv TB hos vilka det var detekterbart vid baslinjen; och att resultaten av CD34+ PCR-analysen är reproducerbara vid upprepning hos LTBI-screenade som inte har fått kemoprofylax

5. Mål

5.1. Primärt mål

För att avgöra om M. tuberculosis (Mtb) DNA kan detekteras i CD34+ mononukleära celler från perifert blod (PBMC) isolerade från

• asymtomatiska vuxna som genomgår rutinscreening för LTBI (LTBI-screenade)
• vuxna med nydiagnostiserad aktiv tuberkulos (aktiva fall)

5.2. Sekundära mål

• För att avgöra om stammar av Mtb isolerade från CD34+ PBMC av TB-kontakter är genetiskt identiska med de som isolerats från sputum från indexfall med lung-TB som de har exponerats för
• Att karakterisera immunologiska, kliniska och epidemiologiska korrelat av förmåga att detektera Mtb i CD34+ PBMC i en heterogen population av IGRA-positiva och -negativa LTBI-screenade.
• För att avgöra om närvaron av Mtb-DNA i CD34+ PBMC hos IGRA-positiva screenees associerar med närvaron av en transkriptionssignatur av perifert blod som nyligen rapporterats för att förutsäga risken för progression till aktiv TB11
• För att bedöma longitudinell förändring i CD34+ PCR-analys resulterar i
• LTBI screenees som slutför kemoprofylax för LTBI
• LTBI-screenade som inte får kemoprofylax
• patienter som avslutar behandling för aktiv TB

Studiedesign och studiebesök

Utredarna kommer att genomföra en longitudinell studie. Två grupper av deltagare kommer att rekryteras: vuxna som screenas för LTBI (LTBI-screenade) och patienter som ska påbörja behandling för aktiv TB (aktiva fall). LTBI-screenade är de som screenas för LTBI som en del av standardvården: de inkluderar nyligen kontaktade TB-fall med infektionsindex, nya deltagare från länder med hög TB-börda, hälsoarbetare som genomgår företagshälsoscreening och patienter som är på väg att genomgå immunsuppressiv terapi . Patienter med aktiv TB är de som har diagnostiserats med aktiv TB som är på väg att börja ta anti-TB-terapi.

Vid baslinjen (besök 1) kommer deltagare som uppfyller inklusionskriterierna och ger skriftligt informerat samtycke till att delta i studien att uppmanas att tillhandahålla sociodemografisk information inklusive uppgifter om ålder, kön och etniskt ursprung samt detaljer om TB-exponeringshistorik (inklusive specifik exponering till deltagare med aktiv TB inskrivna i studien) och andra kliniskt relevanta data, som alla kommer att registreras på ett fallrapportformulär (CRF). Ett HIV-serologiskt test kommer att utföras om detta inte redan görs som en del av rutinvården. Ett 120 ml (117 ml om HIV-test redan är gjort som en del av rutinvård) blodprov kommer att samlas in för IGRA (QFT-Plus), blododling för Mtb, risksignaturanalys av perifert blodtranskriptom och CD34+ PCR-analysen för Mtb DNA vid baslinjen. IGRA-positiva deltagare hos vilka aktiv TB har exkluderats med hjälp av klinisk utvärdering och lungröntgen (en del av standardvården) kommer att erbjudas en 3-månaderskur med rifampicin och isoniazid kemoprofylax om de uppfyller kriterierna för denna terapi (också en del av standarden). vård).12

Kommunikation av positiva HIV-testresultat kommer att hanteras i enlighet med rekommendationerna i Storbritanniens nationella riktlinjer för HIV-testning 2008. Positiva HIV-testresultat kommer att meddelas i en intervju ansikte mot ansikte med en studieläkare, i närvaro av en sjuksköterska från Barts Health NHS Trust Genito-Urinary Medicine (GUM) kliniken (den lokala HIV-servicen). Deltagare som testar HIV-positiva kommer att hänvisas till sin närmaste GUM-klinik för bekräftelse av sina resultat och vidare hantering vid behov.

Vid 3 månader (besök 2) kommer detaljer om ordination av och efterlevnad av kemoprofylax att registreras, och ett andra blodprov (117 ml) kommer att tas för upprepad IGRA (QFT-Plus), blododling och CD34+ PCR-analys. För deltagare som tagit kemoprofylax kommer även en Tempus-slang att tas vid besök 2.

Vid baslinjen (besök 1) kommer deltagare som uppfyller inklusionskriterier och ger skriftligt informerat samtycke till att delta i studien att uppmanas att tillhandahålla grundläggande sociodemografisk information inklusive uppgifter om ålder, kön och etniskt ursprung samt varaktighet av deras symtom, kontakt med eventuella inskriven LTBI-screenee och andra kliniskt relevanta data, som alla kommer att registreras på en CRF. HIV-serologi, fullständigt blodvärde och sputumsmearmikroskopi och cutlure för M.tuberculosis utförs som en del av rutinvården i denna patientgrupp. Ett 114 ml blodprov kommer att samlas in för IGRA (QFT-Plus), blododling för Mtb och CD34+ PCR-analysen för Mtb DNA vid baslinjen. TB-patienter kommer att behandlas för aktiv sjukdom enligt brittiska riktlinjer. 12

Efter avslutad kemoterapi (besök 2, vanligtvis vid 6 månader), kommer detaljer om ordination av och efterlevnad av anti-TB-behandling att registreras och ett andra blodprov (114 ml) kommer att samlas in för IGRA (QFT-Plus), blododling för Mtb och CD34+ PCR-analysen.

Studieprocedurer

Procedurer för inbjudan och informerat samtycke

Inbjudan

I London utförs vanligen screening för LTBI med IGRA i fyra grupper: nyligen kontakter med aktiva TB-patienter; nya deltagare från länder med hög TB-börda; patienter som är på väg att påbörja immunsuppressiva terapier; och hälsoarbetare som genomgår företagshälsoscreening. Grupper med risk för LTBI kan initialt identifieras i olika miljöer (tbc-mottagning, primärvård, reumatologiska mottagningar, företagshälsovård), men de hänvisas alla antingen till en tuberkulosmottagning (kontakter, nyanlända, patienter som ska påbörja immunsuppressiv behandling ) eller till Occupational Health Clinic (hälsovårdare som genomgår företagshälsoscreening) för att LTBI-screening ska utföras. Potentiellt kvalificerade LTBI screenees kommer därför att identifieras och rekryteras till studien på TB-kliniker eller Occupational Health Clinic. Patienter med aktiv TB kommer att identifieras och rekryteras vid Barts Health NHS Trust TB Clinics.

Potentiellt kvalificerade individer kommer att informeras om studien av sjuksköterskor eller läkare som arbetar på TB-kliniker eller företagshälsovårdskliniker, som utför TB-screening som en del av vanlig klinisk vård. De som uttrycker sitt intresse för studien kommer att få ett deltagarinformationsblad av en medlem av det kliniska vårdteamet. Detta kommer att förklara studiens syften, metoder, förväntade fördelar och potentiella faror och kommer att presenteras på ett icke-tekniskt språk antingen på engelska eller andra språk där så är nödvändigt. De som tar ett deltagarinformationsblad kommer att bli ombedda att fylla i ett "kontaktformulär" som ger sina kontaktuppgifter och bemyndigar forskargruppen att ta kontakt med dem när de har haft möjlighet att läsa informationen; denna "Kontaktsedel" kommer att vidarebefordras till forskargruppen av deltagarens vanliga vårdteam.

Procedurer för informerat samtycke

Informerat samtycke kommer att genomföras i enlighet med JRMOs standardförfaranden. Informerat samtycke kommer att tas i ett privat rum av personal som har fått specifik utbildning i god klinisk praxis och medgivande av informerat samtycke, vilka kan vara läkare, sjuksköterskor eller forskningsassistenter. Under samtyckesprocessen kommer deltagarna att informeras om att deltagandet är frivilligt och att de kan vägra att delta i studien eller dra sig ur när som helst under uppföljningen, oavsett anledning.

Deltagarna kommer att uppmanas att ange sitt samtycke till att delta genom att skriva under och skriva ut sitt namn. Ett opartiskt vittne kommer att behöva kontrasignera samtycke för dem som behöver tolk under samtyckesprocessen. Deltagarna kommer att få ekonomisk kompensation för resekostnader i samband med varje besök.

Inskrivnings- och uppföljningsrutiner

Rekrytering vid baslinjen

Potentiella deltagare kommer att bedömas för behörighet baserat på inkluderings- och uteslutningskriterierna som anges ovan. Efter samtyckesprocessen och efter att en deltagare har gett skriftligt informerat samtycke att delta kommer ett unikt ID-nummer att tilldelas. Bedömning av behörighet att delta kommer att utföras av lämpligt utbildad personal som kan vara läkare, sjuksköterskor eller forskningsassistenter.

Datainsamlingsförfarande

Med hjälp av en CRF, vid besök 1 (V1), kommer alla deltagare att uppmanas att ge sociodemografisk information och medicinsk historia inklusive medicinhistorik. LTBI-screenade kommer att uppmanas att tillhandahålla detaljer om nyligen och tidigare exponering för TB-patienter, historia av TB och andra potentiella bestämningsfaktorer för LTBI, såsom fysisk närhet till aktiva TB-patienter, genomsnittlig daglig exponeringstid samt total varaktighet av exponering för indexfall . CRF:er kommer också att inkludera följande data: checklista över behörighetskriterier, resultat av kliniska undersökningar och laboratorietester och information som samlats in under uppföljningen, inklusive information om tillbakadragande, om tillämpligt. Medlemmarna i projektgruppen som ansvarar för att genomföra CRF, som kan vara forskare eller fältarbetare, kommer att listas i en delegationslogg.

Baslinjeprovtagning och laboratoriebedömningar

Prover kommer att samlas in enligt beskrivningen i figur 1 och tabellerna 1 och 2, och laboratorieanalyser kommer att utföras enligt beskrivningen i tabellerna 3 och 4. Där tester utförs som en del av rutinvård (t.ex. fullständigt blodvärde för patienter med aktiv TB, HIV-serologi för patienter med aktiv TB och IGRA-positiva LTBI-screenade), kommer resultaten att nås via CRS och dokumenteras på CRF. IGRA-negativa LTBI-screenade och oexponerade deltagare kommer att erbjudas ett HIV-test vid besök 1.

För att undersöka om Mtb-stammar isolerade från CD34+ PBMC av TB-kontakter matchar de isolerade från sputum från indexfall som de har exponerats för, kommer sputumprover att samlas in från 10 indexaktiva TB-patienter som har CD34+ PCR-positiva kontakter inskrivna i studien, och helgenomsekvensanalys kommer att utföras på isolat odlade från dessa prover. Baserat på denna analys kommer primrar för att skapa Mtb-amplikonbibliotek att utformas med hjälp av bioinformatiska metoder för att fånga stamdiversitet. Dessa primrar kommer sedan att användas för att generera Mtb-amplikonbibliotek från CD34+-celler som innehåller Mtb-genomiskt DNA isolerat från TB-kontakter. Dessa bibliotek kommer sedan att sekvenseras och jämföras med Mtb-genomet för indexfallet för att bestämma om stammar isolerade från indexfall och kontakter matchar.

Deltagare med positiva HIV-tester / IGRA kommer att hänvisas till respektive HIV / TB-kliniker för vidare bedömning. Där HIV-tester och IGRA har utförts för forskningsändamål (dvs. där de inte ingår i rutinvården), kommer forskarpersonal att kommunicera dessa resultat till deltagarna när de blir tillgängliga.

Uppföljningsrutiner

• LTBI screenees: Besök och uppföljningsbedömningar beskrivs i figur 1, tabell 1 och tabell 3. Deltagarna kommer att närvara vid besök 2 vid 3 månader (besök 2, V2). Deltagare som har avslutat kemoprofylax kommer att ha en rutinmässig klinisk utvärdering efter avslutad behandling. De som inte tar kemoprofylax kommer också att följas upp 3 månader efter V1. Förutom att fylla i en CRF som beskriver symtom på aktiv TB (alla deltagare) och följsamhet till kemoprofylax (de som får kemoprofylax), kommer ett 117 ml blodprov att samlas in för immunologisk och molekylär analys enligt beskrivning i avsnitt 13.3 nedan. Efter det andra besöket avslutas deltagandet i studien.
• Patienter med aktiv TB: Besök och uppföljning beskrivs i figur 1, tabell 2 och tabell 4. Deltagare som tar anti-TB-behandling kommer att ha en rutinmässig klinisk utvärdering efter avslutad behandling och ett andra 114 ml blodprov kommer att samlas in under detta besök för immunologisk och molekylär analys som beskrivs i avsnitt 13.3 nedan. Efter det andra besöket avslutas deltagandet i studien.

Resultaten från CD34+ PCR-testet kommer inte att användas som vägledning för klinisk hantering, eftersom detta test är ett forskningsverktyg i de tidiga utvecklingsfaserna och dess resultat inte har korrelerats med något kliniskt resultat.

Uttag av deltagare

Deltagare kommer att dras tillbaka om de återkallar sitt samtycke att delta eller om det dras slutsatsen att utträde ligger i deltagarens bästa. Deltagarna anses också ha dragit sig ur om de trots skriftliga och telefoniska påminnelser misslyckas med att närvara vid sitt andra schemalagda studiebesök. Om en deltagare drar sig ur studien kommer orsaken till utträdet att registreras i CRF.

Data som samlats in fram till tidpunkten för tillbakadragandet kommer att inkluderas i studieanalyser, om inte annat begärs av en deltagare. Alla kliniska prover som tas innan en deltagare drar sig tillbaka kommer att användas för studieanalyser.

Slutet av studien Definition

Studien kommer att avslutas när alla kliniska och laboratoriebedömningar är klara för alla deltagare som deltar i uppföljningen.

9. Statistiska överväganden

9.1 Provstorlek

Huvudsyftet med denna studie är att validera och utöka fynden från en annan miljö där genomiskt DNA från Mtb detekterades i CD34+-celler isolerade från det perifera blodet från sju IGRA-positiva asymtomatiska vuxna.10 För att uppnå detta mål kommer totalt 100 LTBI-screenear att rekryteras till tvärsnittsstudien (20 deltagare per oberoende variabel som ska testas i regressionsanalysen). Det förväntas att cirka femtio av dessa deltagare kommer att vara IGRA-positiva, av vilka cirka fyrtio kommer att ordineras kemoprofylax: uppföljning av 25 av dessa deltagare kommer att ge >80 % kraft vid 5 % signifikansnivå för att visa en minskning av andelen CD34+ PCR-positiva individer från 80 % vid baslinjen till 30 % vid uppföljning.

10. Etiska överväganden

Innan studien startar kommer godkännande att sökas från NHS REC för studieprotokollet, formulär för informerat samtycke och andra relevanta dokument. Studien kommer inte att påbörjas förrän nödvändiga godkännanden har erhållits från den etiska kommittén och ett "grönt ljus" ges för att aktivera webbplatser av sponsorn. CI kommer att säkerställa att denna studie genomförs i enlighet med Helsingforsdeklarationen (2013) och de etiska principerna i Research Governance Framework for Health and Social Care, andra upplagan, 2005 och dess efterföljande ändringar. Beslut om huruvida en ändring utgör en mindre eller väsentlig ändring kommer att ligga hos sponsorn. Väsentliga ändringar som kräver granskning av REC kommer inte att implementeras förrän de har godkänts av det relevanta organet. All korrespondens med sponsorn och REC kommer att sparas i studiens masterfil. CI kommer att meddela REC och sponsorn i slutet av studien.

Skriftligt informerat samtycke kommer att erhållas från deltagarna av en lämpligt utbildad person (som kan vara en läkare, en sjuksköterska eller en forskningsassistent) innan deltagande i denna studie. Informationsblad kommer att göras tillgängliga på engelska och andra språk vid behov. Potentiella deltagare kommer att förses med informationsbladet och studiens syften, metoder, förväntade fördelar och potentiella faror kommer att förklaras. Under samtyckesprocessen kommer deltagarna att förklaras att deltagandet är frivilligt och att de kan vägra att delta i studien eller dra sig ur när som helst under uppföljningen, oavsett anledning.

Intressekonflikt

Inga ekonomiska eller andra konkurrerande intressen har identifierats för CI eller någon medutredare.

11. Säkerhetsaspekter

Eftersom studien är observationell är risken för studierelaterade biverkningar försumbar. Alla biverkningar som anses vara relaterade till studien kommer dock att rapporteras till sponsorn inom 24 timmar. Blodvolymen som ska samlas in (upp till 120 ml) kan uppfattas som stor av vissa deltagare, men vuxna som donerar blod ger vanligtvis 500 ml åt gången utan att drabbas av anemi. Utredarna förutser därför inte någon negativ händelse relaterad till att ta denna volym blod. Information om mängden blodprov och om detta kommer att få några oönskade hälsokonsekvenser kommer att förklaras för deltagarna i informationsbladet. Alla TB-patienter kommer att screenas för anemi som en del av sin vanliga kliniska vård och de med hemoglobinnivåer under 10 g/dl vid inträde kommer att exkluderas. Dessutom kommer följande åtgärder att vidtas för att minimera potentiella olägenheter, obehag och risker som deltagarna kan uppleva under studiens gång:

- användning av lämpligt utbildad personal för att utföra flebotomi

12. Datahantering och registerföring

12.1. Sekretess

Protected Health Information (PHI) som är nödvändig för genomförandet och analysen av studien kommer att samlas in för alla deltagare som screenats för studien; denna information kommer att inkludera varje deltagares namn, födelsedatum, kön, adress, telefonnummer, journalnummer om tillämpligt, e-postadress om tillämpligt och etniskt ursprung. Studiepersonal som behöver tillgång till PHI för att genomföra eller analysera studien kommer att listas i en delegationslogg. PHI kommer att förbli konfidentiell och kommer att hanteras, bearbetas, lagras och förstöras enligt Data Protection Act 1998. Deltagarna kommer att behålla rätten att återkalla sitt tillstånd för användning av sin PHI när som helst under studien. Alla deltagare kommer att anonymiseras i publikationer som härrör från denna studie. Data kommer att pseudo-anonymiseras enligt följande. PHI kommer att hållas i en säker databas kopplad till en unik identifieringskod. Klinisk information kommer att lagras i en separat säker databas, länkad till samma unika identifieringskod. CI och medutredarna kommer att ha tillgång till det pseudo-anonymiserade slutliga studiedataset.

Under forskningens gång kommer alla register att vara CI:s ansvar och kommer att förvaras under säkra förhållanden. När studien är klar är det sponsorns krav att register och data bevaras i ytterligare 20 år. CI kommer att agera som "Custodian" av forskningsdata. Tillgång till PHI kommer att begränsas till det minsta antal individer som krävs för genomförande av studien, kvalitetskontroll, revision och analys. Följande kommer att omfatta källdokument: screeningloggar, informerat samtycke och pappers-CRF. Alla källdokument kommer att förvaras säkert i låsta arkivskåp. Dataöverföring och transport kommer att utföras i enlighet med UK Data Protection Act 1998. Personidentifierbar information kommer inte att lagras, transporteras eller skickas till eller från någon bärbar enhet om inte den enheten är krypterad.

12.2. Datainsamling, registrering och hantering

Undertecknade samtyckesformulär och pappersdokument som innehåller källdata kommer att förvaras säkert. Studiedata kommer att matas in i en databas i programvaran EpiData Entry. Personalen kommer att få lämplig utbildning för att använda databasen för datainmatning. Laboratoriedata kommer att läggas in i databasen.

CI och medutredarna kommer att ha tillgång till studiedata under studien. Studiepersonal som behöver sådan tillgång för att genomföra studien kommer också att ges sådan tillgång som behövs. Tillgång till studiedata under studien kommer även att ges till auktoriserade representanter från sponsorn, värdinstitutionen och tillsynsmyndigheterna vid behov.

12.3. Kvalitetskontroll och kvalitetssäkring

Studiedokumentation kommer att göras tillgänglig för representanter för sponsorn och REC för kvalitetskontroll och kvalitetssäkring på begäran.

13. Laboratorier

13.1. Provinsamling, märkning och bearbetning

Blodprover kommer att samlas in av studiepersonalen, märkta med deltagar-ID och daterade. Tempus-rören skakas kraftigt omedelbart efter insamling enligt tillverkarens rekommendationer. Prover för blododling och HIV-serologi kommer att transporteras till centrala laboratorier för bearbetning. Återstående blodprover kommer att transporteras till The Blizard Institute, där provets mottagningsdatum och tid samt provets skick (t.ex. icke-koagulerad) kommer att registreras i en laboratorielogg. Prover för QFT-Plus-testet kommer att inkuberas vid 37 °C kort efter mottagandet av prover i 18 timmar, före centrifugering och aspiration av supernatanter som kommer att lagras vid -80 °C i väntan på analys för IFN-gammakoncentration. Blodprover i Tempus-rör kommer att förvaras vid -80 °C i ett märkt ställ i väntan på transport till Division of Infection and Immunity, University College London för RNA-extraktion och genuttrycksprofilering. PBMC kommer att separeras från det återstående provet (100 ml), med efterföljande isolering av CD34+-celler med hjälp av magnetisk pärlsortering. Renheten hos isolerade CD34+-celler kommer att kontrolleras med flödescytometri.