Longitudinelle biomarkører med utvalgte utfallsmål i CMT (CMT-BIO-Extend)

Til nå har bare fysiske og elektrofysiologiske undersøkelser blitt brukt for å bestemme alvorlighetsgraden av sykdommer hos pasienter med CMT. CMT nevropati-score (CMTNs) er en gyldig og pålitelig ni-punkts sammensatt skala som anser som sensoriske og motoriske symptomer (Shy et al. 2005). Imidlertid er dens funksjon som en alvorlighetsgrad eller progresjonsmarkør kontroversiell på grunn av den langsomme forverringen gjennom år (Wang et al. 2017). Surrogatbiomarkører for alvorlighetsgrad og progresjon av sykdommer vil tjene som kraftige verktøy for å overvåke terapeutiske effekter i kliniske studier. Foreløpig er ingen praktiske biomarkører for CMT1A tilgjengelig. En ikke-invasiv MR-studie viste endringer i muskel- og intramuskulært fettakkumulering i underekstremitetene som korrelerte med klinisk svekkelse (Gaeta et al. 2012). Denne metoden viser lovende resultater som et surrogatresultatmål for kliniske studier, men det er teknisk krevende og har så langt bare blitt testet i en liten gruppe CMT -pasienter og de med forskjellige andre nevromuskulære lidelser.

Molekylær analyse av kroppsvæsker eller vevsprøver er en lovende strategi for å utvikle klinisk praktiske surrogatbiomarkører for sykdommens alvorlighetsgrad i CMT1A. I foreløpig arbeid av vår forskningsgruppe ble genuttrykksanalyser av CMT -rotter korrelert med hudbiopsier hos CMT1A -pasienter. Denne analysen identifiserte flere individuelle gener (STT2, CTSA, PPARG, CDA, ENPP1 og NRG1) som korrelerte med sykdommens alvorlighetsgrad (Fledrich et al. 2017). Ytterligere eksperimenter ved bruk av genuttrykksanalyser av hud og isjiasnerven (N. Ischiadicus) muliggjorde et skille mellom mildt og sterkt berørte CMT -rotter (Fledrich et al. 2012).

På grunn av den høye variasjonen i sykdomsuttrykk, postulerte vi at en stor del av sykdoms manifestasjon skjer på det epigenetiske nivået. Med utgangspunkt i dette avdekket vår første tilnærming betydelig overlapping mellom differensielt metylert DNA -regioner og transkripsjonelle endringer i CMT -rotter. Dette funnet antydet at endringer i DNA -metylering kunne bidra til endret genuttrykk og dermed til patogenesen av CMT1A. Spesielt inneholdt to klynger sterkt oppregulerte transkripsjoner beriket med gener assosiert med cellesyklusregulering. Regulering av cellesyklus er koblet til PMP22/GAS315, genet som forårsaker CMT1A. Analyse av transkripsjonsfaktorer indikerte signifikant involvering av den viktige cellesyklusregulatoren fra E2F -familien, sammen med den kjente nedstrøms effektor EZH2, en metylase som er essensiell for transkripsjonell undertrykkelse i Schwann -celler gjennom metylering av histon H3.

Basert på dette fant en rekruttering av totalt 150 pasienter sted fra 2016 til 2019, som ble vurdert over tre besøk for fenotypisk variabilitet, alvorlighetsgrad og kliniske score (NCT03386266). I denne translasjonsstudien ble rotter som overuttrykker PMP22 -genet og pasientmateriale brukt. Fra 150 dyr, 4 eller 5 med henholdsvis milde og alvorlige sykdomsuttrykk, ble valgt. Pasientene ble rekruttert gjennom CMT-Net-nettverket, hvor CMTNSV2 ble brukt som en sykdomsscore. RNASEQ -analyser identifiserte flere kandidatgener som overlappet i både CMT1A -pasienter og rotte -modellene, noe som indikerer potensielle markører for alvorlighetsgraden av sykdommer.

Disse foreløpige dataene gir bevis på at epigenetiske og andre OMICS -data fra både CMT1A -dyremodeller og humane pasienter kan brukes til toveis, informativ oversettelse i både fremover og bakover retning. Basert på disse toveisdataene ble RNA-sekvensering utført fra blodet til pasienter i CMT-NET, hvor innledende potensielle biomarkører, sykdomsmodifiserere og surrogatmarkører ble identifisert (Linhoff et al., Publisering i forberedelse). RT-PCR-dataene gir innsikt i prediktive utsagn om pasientenes kliniske utvikling over tid.

Basert på disse funnene planlegger vi å undersøke de identifiserte biomarkørene i et fjerde besøk, etter vår nyeste etiske applikasjon til CMT-Net, og bekrefte deres tilstedeværelse i hudbiopsier. Fokuset er spesielt på markører assosiert med nylig observerte symptomer, for eksempel autonom dysfunksjon og skjelvinger. Denne utvidede tilnærmingen tar sikte på å forbedre diagnosen og overvåkningen av sykdommen, noe som muliggjør mer presise og individualiserte terapeutiske tilnærminger.

Målet med dette prosjektet er å bedre forstå den naturlige progresjonen av CMT1A -sykdom og å identifisere potensielle risikofaktorer som kan påvirke sykdomsforløpet. CMT1a, en undertype av CMT, er den vanligste arvelige perifer neuropati. Det langsomme, progressive sykdomsforløpet viser en høy variasjon av individuelle fenotyper til tross for genetisk homogenitet. Det primære målet med prosjektet er å analysere potensielle determinanter for fenotypisk uttrykk, inkludert alvorlighetsnivåer, og å dokumentere symptomvariabilitet over en total periode på fem år som en indikator på sykdomsdynamikk.

CMT er en sjelden, uhelbredelig sykdom, selv om nye farmakoterapier for tiden utvikles. Å demonstrere effekt i kliniske studier er utfordrende på grunn av den langsomme progresjonen og mangelen på sensitive resultatmål. Hovedmålet med dette delprosjektet er å validere identifiserte biomarkører (DNA/epigenetikk og RNA/RT-PCR) og utvalgte sensitive utfallsmål i blodet og huden til CMT-pasienter over en observasjonsperiode på minst 5 år for å forbedre vurderingen av effektiviteten I fremtidige kliniske terapiforsøk, inkludert diagnostisk overvåking av sykdomsprogresjon hos CMT -pasienter. Omtrent 25 sunne frivillige vil også bli inkludert som kontroller. For de frivillige vil en kort medisinsk historie bli registrert, og blod- og hudprøver vil bli samlet for å validere biomarkørene.

Målet med dette delprosjektet er å samle vevsprøver (hud, blod og dyrkede fibroblaster) fra CMT-pasienter med forskjellige undertyper for ubegrensede vitenskapelige og medisinske forskningsformål, for eksempel for forskningsprosjekter innen det tyske CMT-Net-nettverket. Vitenskapelige partnere vil motta gratis tilgang til prøvene og dataene. Kommersiell bruk utenfor forskningsformål er ikke ment. Ved hjelp av CMT-vevssamling kan CMT-NET-partnere utføre morfologiske og molekylære biologiske analyser av pasientmateriale, samt bruke fibroblastkulturer. Genotype-fenotypestudier kan også utføres. Til dags dato eksisterer allerede en samling av over 100 standardiserte hudbiopsier fra klinisk godt karakteriserte CMT1A-pasienter. Denne samlingen er det eneste vevslageret for vevsprøver fra pasienter med arvelige nevropatier i Tyskland.

Målet med dette prosjektet er å bedre forstå den naturlige progresjonen av CMT1A -sykdom og å identifisere potensielle risikofaktorer som kan påvirke sykdomsforløpet. CMT1a, en undertype av CMT, er den vanligste arvelige perifer neuropati. Det langsomme, progressive sykdomsforløpet viser en høy variasjon av individuelle fenotyper til tross for genetisk homogenitet. Det primære målet med prosjektet er å analysere potensielle determinanter for fenotypisk uttrykk, inkludert alvorlighetsnivåer, og å dokumentere symptomvariabilitet over en total periode på fem år som en indikator på sykdomsdynamikk.

CMT er en sjelden, uhelbredelig sykdom, selv om nye farmakoterapier for tiden utvikles. Å demonstrere effekt i kliniske studier er utfordrende på grunn av den langsomme progresjonen og mangelen på sensitive resultatmål. Hovedmålet med dette delprosjektet er å validere identifiserte biomarkører (DNA/epigenetikk og RNA/RT-PCR) og utvalgte sensitive utfallsmål i blodet og huden til CMT-pasienter over en observasjonsperiode på minst 5 år for å forbedre vurderingen av effektiviteten I fremtidige kliniske terapiforsøk, inkludert diagnostisk overvåking av sykdomsprogresjon hos CMT -pasienter. Omtrent 25 sunne frivillige vil også bli inkludert som kontroller. For de frivillige vil en kort medisinsk historie bli registrert, og blod- og hudprøver vil bli samlet for å validere biomarkørene.

Målet med dette delprosjektet er å samle vevsprøver (hud, blod og dyrkede fibroblaster) fra CMT-pasienter med forskjellige undertyper for ubegrensede vitenskapelige og medisinske forskningsformål, for eksempel for forskningsprosjekter innen det tyske CMT-Net-nettverket. Vitenskapelige partnere vil motta gratis tilgang til prøvene og dataene. Kommersiell bruk utenfor forskningsformål er ikke ment. Ved hjelp av CMT-vevssamling kan CMT-NET-partnere utføre morfologiske og molekylære biologiske analyser av pasientmateriale, samt bruke fibroblastkulturer. Genotype-fenotypestudier kan også utføres. Til dags dato eksisterer allerede en samling av over 100 standardiserte hudbiopsier fra klinisk godt karakteriserte CMT1A-pasienter. Denne samlingen er det eneste vevslageret for vevsprøver fra pasienter med arvelige nevropatier i Tyskland.

Målet med dette prosjektet er å bedre forstå den naturlige progresjonen av CMT1A -sykdom og å identifisere potensielle risikofaktorer som kan påvirke sykdomsforløpet. CMT1a, en undertype av CMT, er den vanligste arvelige perifer neuropati. Det langsomme, progressive sykdomsforløpet viser en høy variasjon av individuelle fenotyper til tross for genetisk homogenitet. Det primære målet med prosjektet er å analysere potensielle determinanter for fenotypisk uttrykk, inkludert alvorlighetsnivåer, og å dokumentere symptomvariabilitet over en total periode på fem år som en indikator på sykdomsdynamikk.

CMT er en sjelden, uhelbredelig sykdom, selv om nye farmakoterapier for tiden utvikles. Å demonstrere effekt i kliniske studier er utfordrende på grunn av den langsomme progresjonen og mangelen på sensitive resultatmål. Hovedmålet med dette delprosjektet er å validere identifiserte biomarkører (DNA/epigenetikk og RNA/RT-PCR) og utvalgte sensitive utfallsmål i blodet og huden til CMT-pasienter over en observasjonsperiode på minst 5 år for å forbedre vurderingen av effektiviteten I fremtidige kliniske terapiforsøk, inkludert diagnostisk overvåking av sykdomsprogresjon hos CMT -pasienter. Omtrent 25 sunne frivillige vil også bli inkludert som kontroller. For de frivillige vil en kort medisinsk historie bli registrert, og blod- og hudprøver vil bli samlet for å validere biomarkørene.