Longitudinale biomarkers met geselecteerde uitkomstmaten bij CMT (CMT-BIO-Extend)

Tot nu toe zijn alleen fysieke en elektrofysiologische onderzoeken gebruikt om de ernst van de ziekte te bepalen bij patiënten met CMT. De CMT Neuropathy Score (CMTNS) is een geldige en betrouwbare composietschaal met negen punten die zintuiglijke en motorische symptomen beschouwt (Shy et al. 2005). De functie ervan als een ernst of progressiemarker is echter controversieel vanwege de langzame verslechtering in de loop van de jaren (Wang et al. 2017). Surrogaat biomarkers voor de ernst en progressie van ziekten zouden dienen als krachtige hulpmiddelen voor het monitoren van therapeutische effecten in klinische studies. Momenteel zijn er geen praktische biomarkers voor CMT1A beschikbaar. Een niet-invasieve MRI-studie toonde veranderingen in spier- en intramusculaire vetophoping in de onderste ledematen die correleerden met klinische stoornissen (Gaeta et al. 2012). Deze methode toont veelbelovende resultaten als een surrogaat -uitkomstmaat voor klinische onderzoeken, maar het is technisch veeleisend en is tot nu toe alleen getest in een kleine groep CMT -patiënten en patiënten met verschillende andere neuromusculaire aandoeningen.

Moleculaire analyse van lichaamsvloeistoffen of weefselmonsters is een veelbelovende strategie voor het ontwikkelen van klinisch praktische surrogaatbiomarkers voor de ernst van de ziekte bij CMT1A. In voorlopig werk van onze onderzoeksgroep waren genexpressieanalyses van CMT -ratten gecorreleerd met huidbiopsieën bij CMT1A -patiënten. Deze analyse identificeerde verschillende individuele genen (STT2, CTSA, PPARG, CDA, ENPP1 en NRG1) die correleerden met de ernst van de ziekte (Fledrich et al. 2017). Aanvullende experimenten met behulp van genexpressieanalyses van de huid en de heupzenuw (N. ischiadicus) maakte een onderscheid mogelijk tussen mild en ernstig aangetaste CMT -ratten (Fledrich et al. 2012).

Vanwege de hoge variabiliteit in ziekte -expressie hebben we gepostuleerd dat een groot deel van de ziektemanifestatie op epigenetisch niveau optreedt. Voortbouwend op dit, onthulde onze initiële benadering een significante overlapping tussen differentieel gemethyleerde DNA -gebieden en transcriptionele veranderingen bij CMT -ratten. Deze bevinding suggereerde dat veranderingen in DNA -methylatie zouden kunnen bijdragen aan veranderde genexpressie en dus aan de pathogenese van CMT1A. Met name bevatten twee clusters sterk opgereguleerde transcripten verrijkt met genen geassocieerd met celcyclusregulatie. Celcyclusregulatie is gekoppeld aan PMP22/GAS315, het gen dat CMT1A veroorzaakt. Analyse van transcriptiefactoren duidde op een significante betrokkenheid van de belangrijke celcyclusregulator van de E2F -familie, samen met de bekende stroomafwaartse effector EZH2, een methylase essentieel voor transcriptionele repressie in Schwann -cellen door methylering van histon H3.

Op basis hiervan vond een werving van in totaal 150 patiënten plaats van 2016 tot 2019, die werden beoordeeld over drie bezoeken op fenotypische variabiliteit, ernst van de ziekte en klinische scores (NCT03386266). In dit translationele onderzoek werden ratten gebruikt die het PMP22 -gen en het patiëntmateriaal tot overexpressie brengen. Uit 150 dieren werden 4 of 5 met respectievelijk milde en ernstige ziektes -uitdrukkingen geselecteerd. Patiënten werden aangeworven via het CMT-NET-netwerk, waarbij de CMTNSV2 werd gebruikt als een ziektescore. RNASEQ -analyses identificeerden verschillende kandidaatgenen die overlappen bij zowel CMT1A -patiënten als de rattenmodellen, wat wijst op potentiële markers voor de ernst van de ziekte.

Deze voorlopige gegevens leveren bewijs dat epigenetische en andere omics -gegevens van zowel CMT1A -diermodellen als menselijke patiënten kunnen worden gebruikt voor bidirectionele, informatieve vertaling in zowel voorwaartse als achterwaartse richtingen. Op basis van deze bidirectionele gegevens werd RNA-sequencing uitgevoerd uit het bloed van patiënten in CMT-NET, waar initiële potentiële biomarkers, ziektemodifiers en surrogaatmarkers werden geïdentificeerd (Linhoff et al., Publicatie in voorbereiding). De RT-PCR-gegevens bieden inzichten in voorspellende verklaringen over de klinische ontwikkeling van patiënten in de loop van de tijd.

Op basis van deze bevindingen zijn we van plan om de geïdentificeerde biomarkers in een 4e bezoek verder te onderzoeken, volgens onze nieuwste ethische toepassing bij CMT-NET, en hun aanwezigheid in huidbiopsieën te bevestigen. De focus ligt met name op markers geassocieerd met nieuw waargenomen symptomen, zoals autonome disfunctie en tremoren. Deze uitgebreide aanpak is bedoeld om de diagnose en monitoring van de ziekte te verbeteren, waardoor nauwkeuriger en geïndividualiseerde therapeutische benaderingen mogelijk worden.

Het doel van dit project is om de natuurlijke progressie van de ziekte van CMT1A beter te begrijpen en potentiële risicofactoren te identificeren die het verloop van de ziekte kunnen beïnvloeden. CMT1A, een subtype van CMT, is de meest voorkomende erfelijke perifere neuropathie. Het langzame, progressieve ziekteverloop vertoont een hoge variabiliteit van individuele fenotypes ondanks genetische homogeniteit. Het primaire doel van het project is het analyseren van potentiële determinanten van fenotypische expressie, inclusief ernstniveaus, en om de symptoomvariabiliteit gedurende een totale periode van vijf jaar te documenteren als een indicator voor ziektedynamiek.

CMT is een zeldzame, ongeneeslijke ziekte, hoewel momenteel nieuwe farmacotherapieën worden ontwikkeld. Het aantonen van werkzaamheid in klinische onderzoeken is een uitdaging vanwege de langzame progressie en het gebrek aan gevoelige uitkomstmaten. Het belangrijkste doel van dit subproject is om geïdentificeerde biomarkers (DNA/epigenetica en RNA/RT-PCR) en geselecteerde gevoelige uitkomstmaten in het bloed en de huid van CMT-patiënten gedurende een observatieperiode van ten minste 5 jaar te valideren om de beoordeling van de werkzaamheid te verbeteren In toekomstige onderzoeken van klinische therapie, inclusief diagnostische monitoring van ziekteprogressie bij CMT -patiënten. Ongeveer 25 gezonde vrijwilligers zullen ook als controles worden opgenomen. Voor de vrijwilligers zal een korte medische geschiedenis worden vastgelegd en worden bloed- en huidmonsters verzameld om de biomarkers te valideren.

Het doel van dit subproject is om weefselmonsters (huid, bloed en gekweekte fibroblasten) te verzamelen van CMT-patiënten met verschillende subtypen voor onbeperkte wetenschappelijke en medische onderzoeksdoeleinden, bijvoorbeeld voor onderzoeksprojecten binnen het Duitse CMT-Net-netwerk. Wetenschappelijke partners ontvangen gratis toegang tot de monsters en gegevens. Commercieel gebruik buiten onderzoeksdoeleinden is niet bedoeld. Met behulp van de CMT-weefselverzameling kunnen CMT-Net-partners morfologische en moleculaire biologische analyses van patiëntenmateriaal uitvoeren en fibroblastculturen gebruiken. Genotype-fenotype-studies kunnen ook worden uitgevoerd. Tot op heden bestaat er al een verzameling van meer dan 100 gestandaardiseerde huidbiopten van klinisch goed gekarakteriseerde CMT1A-patiënten. Deze collectie is de enige weefselrepository voor weefselmonsters van patiënten met erfelijke neuropathieën in Duitsland.

Het doel van dit project is om de natuurlijke progressie van de ziekte van CMT1A beter te begrijpen en potentiële risicofactoren te identificeren die het verloop van de ziekte kunnen beïnvloeden. CMT1A, een subtype van CMT, is de meest voorkomende erfelijke perifere neuropathie. Het langzame, progressieve ziekteverloop vertoont een hoge variabiliteit van individuele fenotypes ondanks genetische homogeniteit. Het primaire doel van het project is het analyseren van potentiële determinanten van fenotypische expressie, inclusief ernstniveaus, en om de symptoomvariabiliteit gedurende een totale periode van vijf jaar te documenteren als een indicator voor ziektedynamiek.

CMT is een zeldzame, ongeneeslijke ziekte, hoewel momenteel nieuwe farmacotherapieën worden ontwikkeld. Het aantonen van werkzaamheid in klinische onderzoeken is een uitdaging vanwege de langzame progressie en het gebrek aan gevoelige uitkomstmaten. Het belangrijkste doel van dit subproject is om geïdentificeerde biomarkers (DNA/epigenetica en RNA/RT-PCR) en geselecteerde gevoelige uitkomstmaten in het bloed en de huid van CMT-patiënten gedurende een observatieperiode van ten minste 5 jaar te valideren om de beoordeling van de werkzaamheid te verbeteren In toekomstige onderzoeken van klinische therapie, inclusief diagnostische monitoring van ziekteprogressie bij CMT -patiënten. Ongeveer 25 gezonde vrijwilligers zullen ook als controles worden opgenomen. Voor de vrijwilligers zal een korte medische geschiedenis worden vastgelegd en worden bloed- en huidmonsters verzameld om de biomarkers te valideren.

Het doel van dit subproject is om weefselmonsters (huid, bloed en gekweekte fibroblasten) te verzamelen van CMT-patiënten met verschillende subtypen voor onbeperkte wetenschappelijke en medische onderzoeksdoeleinden, bijvoorbeeld voor onderzoeksprojecten binnen het Duitse CMT-Net-netwerk. Wetenschappelijke partners ontvangen gratis toegang tot de monsters en gegevens. Commercieel gebruik buiten onderzoeksdoeleinden is niet bedoeld. Met behulp van de CMT-weefselverzameling kunnen CMT-Net-partners morfologische en moleculaire biologische analyses van patiëntenmateriaal uitvoeren en fibroblastculturen gebruiken. Genotype-fenotype-studies kunnen ook worden uitgevoerd. Tot op heden bestaat er al een verzameling van meer dan 100 gestandaardiseerde huidbiopten van klinisch goed gekarakteriseerde CMT1A-patiënten. Deze collectie is de enige weefselrepository voor weefselmonsters van patiënten met erfelijke neuropathieën in Duitsland.

Het doel van dit project is om de natuurlijke progressie van de ziekte van CMT1A beter te begrijpen en potentiële risicofactoren te identificeren die het verloop van de ziekte kunnen beïnvloeden. CMT1A, een subtype van CMT, is de meest voorkomende erfelijke perifere neuropathie. Het langzame, progressieve ziekteverloop vertoont een hoge variabiliteit van individuele fenotypes ondanks genetische homogeniteit. Het primaire doel van het project is het analyseren van potentiële determinanten van fenotypische expressie, inclusief ernstniveaus, en om de symptoomvariabiliteit gedurende een totale periode van vijf jaar te documenteren als een indicator voor ziektedynamiek.

CMT is een zeldzame, ongeneeslijke ziekte, hoewel momenteel nieuwe farmacotherapieën worden ontwikkeld. Het aantonen van werkzaamheid in klinische onderzoeken is een uitdaging vanwege de langzame progressie en het gebrek aan gevoelige uitkomstmaten. Het belangrijkste doel van dit subproject is om geïdentificeerde biomarkers (DNA/epigenetica en RNA/RT-PCR) en geselecteerde gevoelige uitkomstmaten in het bloed en de huid van CMT-patiënten gedurende een observatieperiode van ten minste 5 jaar te valideren om de beoordeling van de werkzaamheid te verbeteren In toekomstige onderzoeken van klinische therapie, inclusief diagnostische monitoring van ziekteprogressie bij CMT -patiënten. Ongeveer 25 gezonde vrijwilligers zullen ook als controles worden opgenomen. Voor de vrijwilligers zal een korte medische geschiedenis worden vastgelegd en worden bloed- en huidmonsters verzameld om de biomarkers te valideren.