Longitudinella biomarkörer med utvalda resultatmått i CMT (CMT-BIO-Extend)

Fram till nu har endast fysiska och elektrofysiologiska undersökningar använts för att bestämma sjukdomens svårighetsgrad hos patienter med CMT. CMT Neuropathy Score (CMTNS) är en giltig och pålitlig niopunkts sammansatt skala som beaktar sensoriska och motoriska symtom (Shy et al. 2005). Emellertid är dess funktion som en svårighetsgrad eller progressionsmarkör kontroversiell på grund av den långsamma försämringen under flera år (Wang et al. 2017). Surrogatbiomarkörer för sjukdomens svårighetsgrad och progression skulle tjäna som kraftfulla verktyg för att övervaka terapeutiska effekter i kliniska studier. För närvarande finns inga praktiska biomarkörer för CMT1A tillgängliga. En icke-invasiv MRI-studie visade förändringar i muskel- och intramuskulär fettansamling i nedre extremiteterna som korrelerade med klinisk nedsättning (Gaeta et al. 2012). Denna metod visar lovande resultat som ett surrogatutfallsmått för kliniska studier, men det är tekniskt krävande och har hittills bara testats i en liten grupp CMT -patienter och de med olika andra neuromuskulära störningar.

Molekylär analys av kroppsvätskor eller vävnadsprover är en lovande strategi för att utveckla kliniskt praktiska surrogatbiomarkörer för sjukdomens svårighetsgrad i CMT1A. I det preliminära arbetet av vår forskningsgrupp korrelerades genuttrycksanalyser av CMT -råttor med hudbiopsier hos CMT1A -patienter. Denna analys identifierade flera enskilda gener (STT2, CTSA, PPARG, CDA, ENPP1 och NRG1) som korrelerade med sjukdomens svårighetsgrad (Fledrich et al. 2017). Ytterligare experiment med användning av genuttrycksanalyser av hud och ischiasnerven (N. Ischiadicus) möjliggjorde en åtskillnad mellan milt och allvarligt drabbade CMT -råttor (Fledrich et al. 2012).

På grund av den höga variationen i sjukdomsuttrycket antydde vi att en stor del av sjukdomens manifestation sker på epigenetisk nivå. Genom att bygga på detta avslöjade vår initiala tillvägagångssätt signifikant överlappning mellan differentiellt metylerade DNA -regioner och transkriptionella förändringar i CMT -råttor. Denna upptäckt antydde att förändringar i DNA -metylering kunde bidra till förändrat genuttryck och därmed till patogenesen av CMT1A. Noterbart innehöll två kluster mycket uppreglerade transkript berikade med gener associerade med cellcykelreglering. Cellcykelreglering är kopplad till PMP22/GAS315, genen som orsakar CMT1A. Analys av transkriptionsfaktorer indikerade signifikant involvering av den viktiga cellcykelregulatorn från E2F -familjen, tillsammans med dess kända nedströmseffektor EZH2, ett metylas som är nödvändigt för transkriptionell förtryck i Schwann -celler genom metylering av histon H3.

Baserat på detta ägde en rekrytering av totalt 150 patienter från 2016 till 2019, som utvärderades över tre besök för fenotypisk variation, sjukdomens svårighetsgrad och kliniska poäng (NCT03386266). I denna translationella studie användes råttor som överuttrycker PMP22 -genen och patientmaterialet. Från 150 djur valdes 4 eller 5 med milda respektive allvarliga sjukdomsuttryck. Patienterna rekryterades via CMT-NET-nätverket, där CMTNSV2 användes som sjukdomspoäng. RNASEQ -analyser identifierade flera kandidatgener som överlappade hos både CMT1A -patienter och råttmodellerna, vilket indikerar potentiella markörer för sjukdomens svårighetsgrad.

Dessa preliminära data ger bevis på att epigenetiska och andra omikdata från både CMT1A djurmodeller och mänskliga patienter kan användas för dubbelriktad, informativ översättning i både framåt och bakåtriktningar. Baserat på dessa dubbelriktade data genomfördes RNA-sekvensering från blodet från patienter i CMT-NET, där initiala potentiella biomarkörer, sjukdomsmodifierare och surrogatmarkörer identifierades (Linhoff et al., Publikation i beredning). RT-PCR-data ger insikter i prediktiva uttalanden om patientens kliniska utveckling över tid.

Baserat på dessa resultat planerar vi att ytterligare undersöka de identifierade biomarkörerna i ett fjärde besök, efter vår senaste etikapplikation till CMT-NET och bekräfta deras närvaro i hudbiopsier. Fokus är särskilt på markörer förknippade med nyligen observerade symtom, såsom autonom dysfunktion och skakningar. Detta utvidgade tillvägagångssätt syftar till att förbättra diagnosen och övervakningen av sjukdomen, vilket möjliggör mer exakta och individualiserade terapeutiska tillvägagångssätt.

Syftet med detta projekt är att bättre förstå den naturliga utvecklingen av CMT1A -sjukdom och att identifiera potentiella riskfaktorer som kan påverka sjukdomsförloppet. CMT1A, en subtyp av CMT, är den vanligaste ärftliga perifera neuropatin. Dess långsamma, progressiva sjukdomskurs visar en hög variation av individuella fenotyper trots genetisk homogenitet. Projektets primära mål är att analysera potentiella determinanter för fenotypiskt uttryck, inklusive svårighetsnivåer, och att dokumentera symptomvariabilitet under en total period på fem år som en indikator på sjukdomsdynamik.

CMT är en sällsynt, obotlig sjukdom, även om nya farmakoterapier för närvarande utvecklas. Att visa effektivitet i kliniska studier är utmanande på grund av den långsamma utvecklingen och bristen på känsliga resultatmått. Huvudmålet med detta delprojekt är att validera identifierade biomarkörer (DNA/epigenetik och RNA/RT-PCR) och utvalda känsliga resultatmätningar i blod och hud hos CMT-patienter under en observationsperiod på minst 5 år för att förbättra bedömningen av effektiviteten I framtida kliniska terapiförsök, inklusive diagnostisk övervakning av sjukdomsprogression hos CMT -patienter. Cirka 25 friska frivilliga kommer också att inkluderas som kontroller. För de frivilliga kommer en kort medicinsk historia att registreras, och blod- och hudprover kommer att samlas in för att validera biomarkörerna.

Målet med detta delprojekt är att samla vävnadsprover (hud, blod och odlade fibroblaster) från CMT-patienter med olika subtyper för obegränsade vetenskapliga och medicinska forskningsändamål, till exempel för forskningsprojekt inom det tyska CMT-NET-nätverket. Scientific Partners kommer att få gratis tillgång till prover och data. Kommersiellt bruk utanför forskningsändamål är inte avsett. Med hjälp av CMT-vävnadssamlingen kan CMT-NET-partners utföra morfologiska och molekylära biologiska analyser av patientmaterial samt använda fibroblastkulturer. Genotyp-fenotypstudier kan också genomföras. Hittills finns redan en samling av över 100 standardiserade hudbiopsier från kliniskt välkarakteriserade CMT1A-patienter. Denna samling är det enda vävnadsförvaret för vävnadsprover från patienter med ärftliga neuropatier i Tyskland.

Syftet med detta projekt är att bättre förstå den naturliga utvecklingen av CMT1A -sjukdom och att identifiera potentiella riskfaktorer som kan påverka sjukdomsförloppet. CMT1A, en subtyp av CMT, är den vanligaste ärftliga perifera neuropatin. Dess långsamma, progressiva sjukdomskurs visar en hög variation av individuella fenotyper trots genetisk homogenitet. Projektets primära mål är att analysera potentiella determinanter för fenotypiskt uttryck, inklusive svårighetsnivåer, och att dokumentera symptomvariabilitet under en total period på fem år som en indikator på sjukdomsdynamik.

CMT är en sällsynt, obotlig sjukdom, även om nya farmakoterapier för närvarande utvecklas. Att visa effektivitet i kliniska studier är utmanande på grund av den långsamma utvecklingen och bristen på känsliga resultatmått. Huvudmålet med detta delprojekt är att validera identifierade biomarkörer (DNA/epigenetik och RNA/RT-PCR) och utvalda känsliga resultatmätningar i blod och hud hos CMT-patienter under en observationsperiod på minst 5 år för att förbättra bedömningen av effektiviteten I framtida kliniska terapiförsök, inklusive diagnostisk övervakning av sjukdomsprogression hos CMT -patienter. Cirka 25 friska frivilliga kommer också att inkluderas som kontroller. För de frivilliga kommer en kort medicinsk historia att registreras, och blod- och hudprover kommer att samlas in för att validera biomarkörerna.

Målet med detta delprojekt är att samla vävnadsprover (hud, blod och odlade fibroblaster) från CMT-patienter med olika subtyper för obegränsade vetenskapliga och medicinska forskningsändamål, till exempel för forskningsprojekt inom det tyska CMT-NET-nätverket. Scientific Partners kommer att få gratis tillgång till prover och data. Kommersiellt bruk utanför forskningsändamål är inte avsett. Med hjälp av CMT-vävnadssamlingen kan CMT-NET-partners utföra morfologiska och molekylära biologiska analyser av patientmaterial samt använda fibroblastkulturer. Genotyp-fenotypstudier kan också genomföras. Hittills finns redan en samling av över 100 standardiserade hudbiopsier från kliniskt välkarakteriserade CMT1A-patienter. Denna samling är det enda vävnadsförvaret för vävnadsprover från patienter med ärftliga neuropatier i Tyskland.

Syftet med detta projekt är att bättre förstå den naturliga utvecklingen av CMT1A -sjukdom och att identifiera potentiella riskfaktorer som kan påverka sjukdomsförloppet. CMT1A, en subtyp av CMT, är den vanligaste ärftliga perifera neuropatin. Dess långsamma, progressiva sjukdomskurs visar en hög variation av individuella fenotyper trots genetisk homogenitet. Projektets primära mål är att analysera potentiella determinanter för fenotypiskt uttryck, inklusive svårighetsnivåer, och att dokumentera symptomvariabilitet under en total period på fem år som en indikator på sjukdomsdynamik.

CMT är en sällsynt, obotlig sjukdom, även om nya farmakoterapier för närvarande utvecklas. Att visa effektivitet i kliniska studier är utmanande på grund av den långsamma utvecklingen och bristen på känsliga resultatmått. Huvudmålet med detta delprojekt är att validera identifierade biomarkörer (DNA/epigenetik och RNA/RT-PCR) och utvalda känsliga resultatmätningar i blod och hud hos CMT-patienter under en observationsperiod på minst 5 år för att förbättra bedömningen av effektiviteten I framtida kliniska terapiförsök, inklusive diagnostisk övervakning av sjukdomsprogression hos CMT -patienter. Cirka 25 friska frivilliga kommer också att inkluderas som kontroller. För de frivilliga kommer en kort medicinsk historia att registreras, och blod- och hudprover kommer att samlas in för att validera biomarkörerna.