Biomarcatori longitudinali con misure di esito selezionate in CMT (CMT-BIO-Extend)

Fino ad ora, solo esami fisici ed elettrofisiologici sono stati usati per determinare la gravità della malattia nei pazienti con CMT. Il punteggio della neuropatia CMT (CMTNS) è una scala composita a nove punti valida e affidabile che considera sintomi sensoriali e motori (Shy et al. 2005). Tuttavia, la sua funzione di severità o marcatore di progressione è controversa a causa del lento deterioramento nel corso degli anni (Wang et al. 2017). I biomarcatori surrogati per la gravità e la progressione della malattia servirebbero come potenti strumenti per il monitoraggio degli effetti terapeutici negli studi clinici. Attualmente, non sono disponibili biomarcatori pratici per CMT1A. Uno studio di risonanza magnetica non invasiva ha mostrato cambiamenti nell'accumulo di grassi muscolari e intramuscolari negli arti inferiori correlati alla compromissione clinica (Gaeta et al. 2012). Questo metodo mostra risultati promettenti come misura di esito surrogato per gli studi clinici, ma è tecnicamente impegnativo ed è stato finora testato solo in un piccolo gruppo di pazienti con CMT e in quelli con vari altri disturbi neuromuscolari.

L'analisi molecolare di fluidi corporei o campioni di tessuto è una strategia promettente per lo sviluppo di biomarcatori surrogati clinicamente pratici per la gravità della malattia in CMT1A. Nel lavoro preliminare del nostro gruppo di ricerca, le analisi di espressione genica dei ratti CMT erano correlate alle biopsie cutanee nei pazienti con CMT1A. Questa analisi ha identificato diversi singoli geni (STT2, CTSA, PPARG, CDA, ENPP1 e NRG1) correlati alla gravità della malattia (Fledrich et al. 2017). Ulteriori esperimenti con analisi di espressione genica della pelle e del nervo sciatico (N. ischiadicus) ha consentito una distinzione tra ratti CMT leggermente e gravemente colpiti (Fledrich et al. 2012).

A causa dell'elevata variabilità nell'espressione della malattia, abbiamo postulato che una grande porzione di manifestazione della malattia si verifica a livello epigenetico. Basandosi su questo, il nostro approccio iniziale ha rivelato una significativa sovrapposizione tra regioni di DNA differenziata e metilati e cambiamenti trascrizionali nei ratti CMT. Questa scoperta ha suggerito che i cambiamenti nella metilazione del DNA potrebbero contribuire all'alterata espressione genica e quindi alla patogenesi di CMT1A. In particolare, due cluster contenevano trascrizioni altamente sovraregolate arricchite con geni associati alla regolazione del ciclo cellulare. La regolazione del ciclo cellulare è collegata a PMP22/GAS315, il gene che causa CMT1A. L'analisi dei fattori di trascrizione ha indicato un coinvolgimento significativo dell'importante regolatore del ciclo cellulare della famiglia E2F, insieme al suo effettore a valle noto EZH2, una metilasi essenziale per la repressione trascrizionale nelle cellule di Schwann attraverso la metilazione dell'istone H3.

Sulla base di questo, un reclutamento di un totale di 150 pazienti ha avuto luogo dal 2016 al 2019, che sono stati valutati in tre visite per variabilità fenotipica, gravità della malattia e punteggi clinici (NCT03386266). In questo studio traslazionale, sono stati utilizzati ratti che sovraesprimono il gene PMP22 e il materiale del paziente. Da 150 animali, 4 o 5 con espressioni di malattia lievi e gravi, rispettivamente, sono state selezionate. I pazienti sono stati reclutati attraverso la rete CMT-NET, in cui il CMTNSV2 è stato utilizzato come punteggio della malattia. Le analisi RNaseQ hanno identificato diversi geni candidati che si sono sovrapposti nei pazienti con CMT1A e nei modelli di ratto, indicando potenziali marcatori per la gravità della malattia.

Questi dati preliminari forniscono prove che i dati epigenetici e altri omici dei modelli animali CMT1A e dei pazienti umani possano essere utilizzati per la traduzione bidirezionale e informativa in direzioni in avanti e all'indietro. Sulla base di questi dati bidirezionali, il sequenziamento dell'RNA è stato condotto dal sangue dei pazienti in CMT-NET, in cui sono stati identificati i potenziali biomarcatori iniziali, i modificatori della malattia e i marcatori surrogati (Linhoff et al., Pubblicazione in preparazione). I dati RT-PCR forniscono approfondimenti su dichiarazioni predittive sullo sviluppo clinico dei pazienti nel tempo.

Sulla base di questi risultati, prevediamo di indagare ulteriormente i biomarcatori identificati in una quarta visita, seguendo la nostra ultima applicazione etica a CMT-Net e confermare la loro presenza nelle biopsie della pelle. L'attenzione è in particolare sui marcatori associati a sintomi appena osservati, come la disfunzione autonomica e i tremori. Questo approccio ampliato mira a migliorare la diagnosi e il monitoraggio della malattia, consentendo approcci terapeutici più precisi e individualizzati.

Lo scopo di questo progetto è comprendere meglio la naturale progressione della malattia di CMT1A e identificare potenziali fattori di rischio che possono influenzare il decorso della malattia. CMT1A, un sottotipo di CMT, è la neuropatia periferica ereditaria più comune. Il suo corso di malattia lento e progressivo mostra un'alta variabilità dei singoli fenotipi nonostante l'omogeneità genetica. L'obiettivo principale del progetto è analizzare potenziali determinanti dell'espressione fenotipica, compresi i livelli di gravità, e documentare la variabilità dei sintomi per un periodo totale di cinque anni come indicatore della dinamica della malattia.

CMT è una malattia rara e incurabile, sebbene siano attualmente in fase di sviluppo nuove farmacoterapie. Dimostrare l'efficacia negli studi clinici è impegnativo a causa della lenta progressione e della mancanza di misure di esito sensibili. L'obiettivo principale di questo sottoprogetto è di convalidare i biomarcatori identificati (DNA/epigenetica e RNA/RT-PCR) e misure di esito sensibili selezionate nel sangue e nella pelle dei pazienti con CMT per un periodo di osservazione di almeno 5 anni per migliorare la valutazione dell'efficacia Nei futuri studi di terapia clinica, incluso il monitoraggio diagnostico della progressione della malattia nei pazienti con CMT. Circa 25 volontari sani saranno anche inclusi come controlli. Per i volontari, verrà registrata una breve storia medica e verranno raccolti campioni di sangue e pelle per convalidare i biomarcatori.

L'obiettivo di questo sottoproietto è raccogliere campioni di tessuto (pelle, sangue e fibroblasti in coltura) da pazienti con CMT con vari sottotipi per scopi di ricerca scientifica e medica senza restrizioni, ad esempio per progetti di ricerca all'interno della rete tedesca CMT-Net. I partner scientifici riceveranno il libero accesso ai campioni e ai dati. L'uso commerciale al di fuori dei fini della ricerca non è previsto. Con l'aiuto della raccolta dei tessuti CMT, i partner CMT-Net possono condurre analisi biologiche morfologiche e molecolari del materiale del paziente, oltre a utilizzare colture di fibroblasti. Possono anche essere condotti studi genotipo-fenotipo. Ad oggi, esiste già una raccolta di oltre 100 biopsie cutanee standardizzate da pazienti CMT1A clinicamente ben caratterizzati. Questa raccolta è l'unico repository tissutale per campioni di tessuto da pazienti con neuropatie ereditarie in Germania.

Lo scopo di questo progetto è comprendere meglio la naturale progressione della malattia di CMT1A e identificare potenziali fattori di rischio che possono influenzare il decorso della malattia. CMT1A, un sottotipo di CMT, è la neuropatia periferica ereditaria più comune. Il suo corso di malattia lento e progressivo mostra un'alta variabilità dei singoli fenotipi nonostante l'omogeneità genetica. L'obiettivo principale del progetto è analizzare potenziali determinanti dell'espressione fenotipica, compresi i livelli di gravità, e documentare la variabilità dei sintomi per un periodo totale di cinque anni come indicatore della dinamica della malattia.

CMT è una malattia rara e incurabile, sebbene siano attualmente in fase di sviluppo nuove farmacoterapie. Dimostrare l'efficacia negli studi clinici è impegnativo a causa della lenta progressione e della mancanza di misure di esito sensibili. L'obiettivo principale di questo sottoprogetto è di convalidare i biomarcatori identificati (DNA/epigenetica e RNA/RT-PCR) e misure di esito sensibili selezionate nel sangue e nella pelle dei pazienti con CMT per un periodo di osservazione di almeno 5 anni per migliorare la valutazione dell'efficacia Nei futuri studi di terapia clinica, incluso il monitoraggio diagnostico della progressione della malattia nei pazienti con CMT. Circa 25 volontari sani saranno anche inclusi come controlli. Per i volontari, verrà registrata una breve storia medica e verranno raccolti campioni di sangue e pelle per convalidare i biomarcatori.

L'obiettivo di questo sottoproietto è raccogliere campioni di tessuto (pelle, sangue e fibroblasti in coltura) da pazienti con CMT con vari sottotipi per scopi di ricerca scientifica e medica senza restrizioni, ad esempio per progetti di ricerca all'interno della rete tedesca CMT-Net. I partner scientifici riceveranno il libero accesso ai campioni e ai dati. L'uso commerciale al di fuori dei fini della ricerca non è previsto. Con l'aiuto della raccolta dei tessuti CMT, i partner CMT-Net possono condurre analisi biologiche morfologiche e molecolari del materiale del paziente, oltre a utilizzare colture di fibroblasti. Possono anche essere condotti studi genotipo-fenotipo. Ad oggi, esiste già una raccolta di oltre 100 biopsie cutanee standardizzate da pazienti CMT1A clinicamente ben caratterizzati. Questa raccolta è l'unico repository tissutale per campioni di tessuto da pazienti con neuropatie ereditarie in Germania.

Lo scopo di questo progetto è comprendere meglio la naturale progressione della malattia di CMT1A e identificare potenziali fattori di rischio che possono influenzare il decorso della malattia. CMT1A, un sottotipo di CMT, è la neuropatia periferica ereditaria più comune. Il suo corso di malattia lento e progressivo mostra un'alta variabilità dei singoli fenotipi nonostante l'omogeneità genetica. L'obiettivo principale del progetto è analizzare potenziali determinanti dell'espressione fenotipica, compresi i livelli di gravità, e documentare la variabilità dei sintomi per un periodo totale di cinque anni come indicatore della dinamica della malattia.

CMT è una malattia rara e incurabile, sebbene siano attualmente in fase di sviluppo nuove farmacoterapie. Dimostrare l'efficacia negli studi clinici è impegnativo a causa della lenta progressione e della mancanza di misure di esito sensibili. L'obiettivo principale di questo sottoprogetto è di convalidare i biomarcatori identificati (DNA/epigenetica e RNA/RT-PCR) e misure di esito sensibili selezionate nel sangue e nella pelle dei pazienti con CMT per un periodo di osservazione di almeno 5 anni per migliorare la valutazione dell'efficacia Nei futuri studi di terapia clinica, incluso il monitoraggio diagnostico della progressione della malattia nei pazienti con CMT. Circa 25 volontari sani saranno anche inclusi come controlli. Per i volontari, verrà registrata una breve storia medica e verranno raccolti campioni di sangue e pelle per convalidare i biomarcatori.