Längsbiomarker mit ausgewählten Ergebnismaßen in CMT (CMT-BIO-Extend)

Bisher wurden nur physikalische und elektrophysiologische Untersuchungen verwendet, um die Schwere der Erkrankung bei Patienten mit CMT zu bestimmen. Der CMT-Neuropathie-Score (CMTNS) ist eine gültige und zuverlässige Neun-Punkte-Verbundskala, die sensorische und motorische Symptome berücksichtigt (Shy et al. 2005). Seine Funktion als Schweregrad- oder Progressionsmarker ist jedoch aufgrund der langsamen Verschlechterung über Jahre umstritten (Wang et al. 2017). Ersatzbiomarker für die Schwere und das Fortschreiten von Erkrankungen würden als leistungsstarke Instrumente zur Überwachung der therapeutischen Wirkungen in klinischen Studien dienen. Derzeit sind keine praktischen Biomarker für CMT1A verfügbar. Eine nicht-invasive MRT-Studie zeigte Veränderungen der Muskel- und intramuskulären Fettakkumulation in den unteren Gliedmaßen, die mit klinischer Beeinträchtigungen korrelierten (Gaeta et al. 2012). Diese Methode zeigt vielversprechende Ergebnisse als Ersatz -Ergebnismaß für klinische Studien, ist jedoch technisch anspruchsvoll und wurde bisher nur bei einer kleinen Gruppe von CMT -Patienten und bei verschiedenen anderen neuromuskulären Störungen getestet.

Die molekulare Analyse von Körperflüssigkeiten oder Gewebeproben ist eine vielversprechende Strategie zur Entwicklung klinisch praktischer Ersatzbiomarker für die Schwere der Erkrankung bei CMT1A. In vorläufigen Arbeiten unserer Forschungsgruppe korrelierten Genexpressionsanalysen von CMT -Ratten mit Hautbiopsien bei CMT1A -Patienten. Diese Analyse identifizierte mehrere einzelne Gene (STT2, CTSA, PPARG, CDA, ENPP1 und NRG1), die mit der Schwere der Erkrankung korrelierten (Fledrich et al. 2017). Zusätzliche Experimente mit Genexpressionsanalysen von Haut und Ischiasnerv (N. Ischiadicus) ermöglichte eine Unterscheidung zwischen milde und stark betroffenen CMT -Ratten (Fledrich et al. 2012).

Aufgrund der hohen Variabilität der Krankheitsexpression postulierten wir, dass ein großer Teil der Krankheitsmanifestation auf epigenetischer Ebene auftritt. Aufbauend auf diesem ersten Ansatz ergab eine signifikante Überlappung zwischen differentiell methylierten DNA -Regionen und Transkriptionsänderungen bei CMT -Ratten. Dieser Befund deutete darauf hin, dass Veränderungen der DNA -Methylierung zu einer veränderten Genexpression und damit zur Pathogenese von CMT1a beitragen könnten. Bemerkenswerterweise enthielten zwei Cluster hochregulierte Transkripte, die mit Genen angereichert sind, die mit der Zellzyklusregulation assoziiert waren. Die Zellzyklusregulation ist mit PMP22/Gas315 verbunden, dem Gen, das CMT1a verursacht. Die Analyse von Transkriptionsfaktoren zeigte eine signifikante Beteiligung des wichtigen Zellzyklusregulators aus der E2F -Familie zusammen mit seinem bekannten nachgeschalteten Effektor EZH2, einer Methylase, die für die Transkriptionsrepression in Schwann -Zellen durch Methylierung von Histon H3 essentiell war.

Auf dieser Grundlage fand eine Rekrutierung von insgesamt 150 Patienten von 2016 bis 2019 statt, die an drei Besuchen für phänotypische Variabilität, Schweregrad der Erkrankung und klinische Werte (NCT0338626) bewertet wurden. In dieser translationalen Studie wurden Ratten verwendet, die das PMP22 -Gen und das Patientenmaterial überexprimieren. Aus 150 Tieren wurden 4 oder 5 mit milden bzw. schweren Krankheitsausdrücken ausgewählt. Die Patienten wurden über das CMT-Net-Netzwerk rekrutiert, wo der CMTNSV2 als Krankheitsbewertung verwendet wurde. RNaseq -Analysen identifizierten mehrere Kandidatengene, die sich sowohl bei CMT1A -Patienten als auch bei den Rattenmodellen überlappten, was auf potenzielle Marker für die Schwere der Erkrankung hinweist.

Diese vorläufigen Daten liefern Hinweise darauf, dass epigenetische und andere Omics -Daten von beiden CMT1A -Tiermodellen und menschlichen Patienten für bidirektionale, informative Übersetzungen sowohl in Vorwärts- als auch in Rückwärtsrichtungen verwendet werden können. Basierend auf diesen bidirektionalen Daten wurde die RNA-Sequenzierung aus dem Blut von Patienten in CMT-NET durchgeführt, wobei anfängliche potenzielle Biomarker, Krankheitsmodifikatoren und Ersatzmarker identifiziert wurden (Linhoff et al., Veröffentlichung in Vorbereitung). Die RT-PCR-Daten liefern Einblicke in die Vorhersageaussagen über die klinische Entwicklung der Patienten im Laufe der Zeit.

Basierend auf diesen Erkenntnissen planen wir, die identifizierten Biomarker in einem 4. Besuch weiter zu untersuchen, nachdem wir unsere neueste Ethikanwendung auf CMT-NET anwenden und ihre Anwesenheit in Hautbiopsien bestätigen können. Der Fokus liegt insbesondere auf Markern, die mit neu beobachteten Symptomen wie autonomer Dysfunktion und Zittern verbunden sind. Dieser erweiterte Ansatz zielt darauf ab, die Diagnose und Überwachung der Krankheit zu verbessern und genauere und individualisierte therapeutische Ansätze zu ermöglichen.

Ziel dieses Projekts ist es, das natürliche Fortschreiten der CMT1A -Krankheit besser zu verstehen und potenzielle Risikofaktoren zu identifizieren, die den Verlauf der Krankheit beeinflussen können. CMT1a, ein Subtyp von CMT, ist die häufigste erbliche periphere Neuropathie. Sein langsamer, progressiver Krankheitsverlauf zeigt eine hohe Variabilität einzelner Phänotypen trotz genetischer Homogenität. Das Hauptziel des Projekts ist es, potenzielle Determinanten der phänotypischen Expression, einschließlich der Schweregrade, zu analysieren und die Variabilität der Symptome über einen Zeitraum von fünf Jahren als Indikator für die Krankheitsdynamik zu dokumentieren.

CMT ist eine seltene, unheilbare Krankheit, obwohl derzeit neue Pharmakotherapien entwickelt werden. Die Nachweis der Wirksamkeit in klinischen Studien ist aufgrund des langsamen Fortschreitens und des Mangels an empfindlichen Ergebnismaßnahmen eine Herausforderung. Das Hauptziel dieses Unterprojekts ist es, identifizierte Biomarker (DNA/Epigenetik und RNA/RT-PCR) zu validieren und sensitive Ergebnisse im Blut und die Haut von CMT-Patienten über einen Beobachtungszeitraum von mindestens 5 Jahren ausgewählt, um die Bewertung der Wirksamkeit zu verbessern In zukünftigen klinischen Therapiestudien, einschließlich der diagnostischen Überwachung des Fortschreitens der Erkrankung bei CMT -Patienten. Ungefähr 25 gesunde Freiwillige werden ebenfalls als Kontrollen aufgenommen. Für die Freiwilligen wird eine kurze Krankengeschichte aufgezeichnet und Blut- und Hautproben werden gesammelt, um die Biomarker zu validieren.

Das Ziel dieses Unterprojekts ist es, Gewebeproben (Haut, Blut und kultivierte Fibroblasten) von CMT-Patienten mit verschiedenen Subtypen für uneingeschränkte wissenschaftliche und medizinische Forschungszwecke für Forschungsprojekte innerhalb des deutschen CMT-NET-Netzwerks zu sammeln. Wissenschaftliche Partner erhalten freien Zugriff auf die Beispiele und Daten. Der kommerzielle Einsatz außerhalb von Forschungszwecken ist nicht beabsichtigt. Mit Hilfe der CMT-Gewebesammlung können CMT-Netz-Partner morphologische und molekulare biologische Analysen von Patientenmaterial durchführen und Fibroblastenkulturen verwenden. Genotyp-Phänotypstudien können ebenfalls durchgeführt werden. Bisher gibt es bereits eine Sammlung von über 100 standardisierten Hautbiopsien von klinisch gut charakterisierten CMT1A-Patienten. Diese Sammlung ist das einzige Gewebe -Repository für Gewebeproben von Patienten mit erblichen Neuropathien in Deutschland.

Ziel dieses Projekts ist es, das natürliche Fortschreiten der CMT1A -Krankheit besser zu verstehen und potenzielle Risikofaktoren zu identifizieren, die den Verlauf der Krankheit beeinflussen können. CMT1a, ein Subtyp von CMT, ist die häufigste erbliche periphere Neuropathie. Sein langsamer, progressiver Krankheitsverlauf zeigt eine hohe Variabilität einzelner Phänotypen trotz genetischer Homogenität. Das Hauptziel des Projekts ist es, potenzielle Determinanten der phänotypischen Expression, einschließlich der Schweregrade, zu analysieren und die Variabilität der Symptome über einen Zeitraum von fünf Jahren als Indikator für die Krankheitsdynamik zu dokumentieren.

CMT ist eine seltene, unheilbare Krankheit, obwohl derzeit neue Pharmakotherapien entwickelt werden. Die Nachweis der Wirksamkeit in klinischen Studien ist aufgrund des langsamen Fortschreitens und des Mangels an empfindlichen Ergebnismaßnahmen eine Herausforderung. Das Hauptziel dieses Unterprojekts ist es, identifizierte Biomarker (DNA/Epigenetik und RNA/RT-PCR) zu validieren und sensitive Ergebnisse im Blut und die Haut von CMT-Patienten über einen Beobachtungszeitraum von mindestens 5 Jahren ausgewählt, um die Bewertung der Wirksamkeit zu verbessern In zukünftigen klinischen Therapiestudien, einschließlich der diagnostischen Überwachung des Fortschreitens der Erkrankung bei CMT -Patienten. Ungefähr 25 gesunde Freiwillige werden ebenfalls als Kontrollen aufgenommen. Für die Freiwilligen wird eine kurze Krankengeschichte aufgezeichnet und Blut- und Hautproben werden gesammelt, um die Biomarker zu validieren.

Das Ziel dieses Unterprojekts ist es, Gewebeproben (Haut, Blut und kultivierte Fibroblasten) von CMT-Patienten mit verschiedenen Subtypen für uneingeschränkte wissenschaftliche und medizinische Forschungszwecke für Forschungsprojekte innerhalb des deutschen CMT-NET-Netzwerks zu sammeln. Wissenschaftliche Partner erhalten freien Zugriff auf die Beispiele und Daten. Der kommerzielle Einsatz außerhalb von Forschungszwecken ist nicht beabsichtigt. Mit Hilfe der CMT-Gewebesammlung können CMT-Netz-Partner morphologische und molekulare biologische Analysen von Patientenmaterial durchführen und Fibroblastenkulturen verwenden. Genotyp-Phänotypstudien können ebenfalls durchgeführt werden. Bisher gibt es bereits eine Sammlung von über 100 standardisierten Hautbiopsien von klinisch gut charakterisierten CMT1A-Patienten. Diese Sammlung ist das einzige Gewebe -Repository für Gewebeproben von Patienten mit erblichen Neuropathien in Deutschland.

Ziel dieses Projekts ist es, das natürliche Fortschreiten der CMT1A -Krankheit besser zu verstehen und potenzielle Risikofaktoren zu identifizieren, die den Verlauf der Krankheit beeinflussen können. CMT1a, ein Subtyp von CMT, ist die häufigste erbliche periphere Neuropathie. Sein langsamer, progressiver Krankheitsverlauf zeigt eine hohe Variabilität einzelner Phänotypen trotz genetischer Homogenität. Das Hauptziel des Projekts ist es, potenzielle Determinanten der phänotypischen Expression, einschließlich der Schweregrade, zu analysieren und die Variabilität der Symptome über einen Zeitraum von fünf Jahren als Indikator für die Krankheitsdynamik zu dokumentieren.

CMT ist eine seltene, unheilbare Krankheit, obwohl derzeit neue Pharmakotherapien entwickelt werden. Die Nachweis der Wirksamkeit in klinischen Studien ist aufgrund des langsamen Fortschreitens und des Mangels an empfindlichen Ergebnismaßnahmen eine Herausforderung. Das Hauptziel dieses Unterprojekts ist es, identifizierte Biomarker (DNA/Epigenetik und RNA/RT-PCR) zu validieren und sensitive Ergebnisse im Blut und die Haut von CMT-Patienten über einen Beobachtungszeitraum von mindestens 5 Jahren ausgewählt, um die Bewertung der Wirksamkeit zu verbessern In zukünftigen klinischen Therapiestudien, einschließlich der diagnostischen Überwachung des Fortschreitens der Erkrankung bei CMT -Patienten. Ungefähr 25 gesunde Freiwillige werden ebenfalls als Kontrollen aufgenommen. Für die Freiwilligen wird eine kurze Krankengeschichte aufgezeichnet und Blut- und Hautproben werden gesammelt, um die Biomarker zu validieren.