Langsgående biomarkører med udvalgte resultatmål i CMT (CMT-BIO-Extend)

Indtil nu er kun fysiske og elektrofysiologiske undersøgelser blevet brugt til at bestemme sygdomsgrad hos patienter med CMT. CMT-neuropati-score (CMTNS) er en gyldig og pålidelig ni-punkts sammensat skala, der overvejer sensoriske og motoriske symptomer (Shy et al. 2005). Imidlertid er dens funktion som en sværhedsgrad eller progressionsmarkør kontroversiel på grund af den langsomme forringelse over år (Wang et al. 2017). Surrogatbiomarkører for sygdomsgrad og progression ville tjene som kraftfulde værktøjer til overvågning af terapeutiske effekter i kliniske studier. I øjeblikket er der ingen praktiske biomarkører for CMT1A tilgængelige. En ikke-invasiv MR-undersøgelse viste ændringer i muskel- og intramuskulært fedtakkumulering i underekstremiteterne, der korrelerede med klinisk svækkelse (Gaeta et al. 2012). Denne metode viser lovende resultater som et surrogatresultatmål for kliniske forsøg, men den er teknisk krævende og er hidtil kun blevet testet i en lille gruppe CMT -patienter og dem med forskellige andre neuromuskulære lidelser.

Molekylær analyse af kropsvæsker eller vævsprøver er en lovende strategi til udvikling af klinisk praktisk surrogatbiomarkører for sygdomsgrad i CMT1A. I foreløbigt arbejde fra vores forskningsgruppe blev genekspressionsanalyser af CMT -rotter korreleret med hudbiopsier hos CMT1A -patienter. Denne analyse identificerede adskillige individuelle gener (STT2, CTSA, PPARG, CDA, Enpp1 og Nrg1), der korrelerede med sygdomsgrad (Fledrich et al. 2017). Yderligere eksperimenter ved anvendelse af genekspressionsanalyser af hud og den iskiasnerv (N. Ischiadicus) muliggjorde en sondring mellem mildt og alvorligt påvirkede CMT -rotter (Fledrich et al. 2012).

På grund af den høje variation i sygdomsekspression postulerede vi, at en stor del af sygdoms manifestation forekommer på det epigenetiske niveau. På baggrund af dette afslørede vores oprindelige tilgang signifikant overlapning mellem differentielt methylerede DNA -regioner og transkriptionelle ændringer i CMT -rotter. Denne konstatering antydede, at ændringer i DNA -methylering kunne bidrage til ændret genekspression og dermed til patogenesen af ​​CMT1A. Navnlig indeholdt to klynger stærkt opregulerede transkripter beriget med gener, der er forbundet med cellecyklusregulering. Cellecyklusregulering er knyttet til PMP22/GAS315, genet, der forårsager CMT1A. Analyse af transkriptionsfaktorer indikerede signifikant involvering af den vigtige cellecyklusregulator fra E2F -familien sammen med dens kendte nedstrøms effektor EZH2, en methylase, der er essentiel for transkriptionel undertrykkelse i Schwann -celler gennem methylering af histon H3.

Baseret på dette fandt en rekruttering af i alt 150 patienter sted fra 2016 til 2019, som blev vurderet over tre besøg for fænotypisk variation, sygdomsgrad og kliniske score (NCT03386266). I denne translationelle undersøgelse blev rotter, der overudtrykker PMP22 -genet og patientmateriale, anvendt. Fra 150 dyr blev henholdsvis 4 eller 5 med milde og alvorlige sygdomsudtryk valgt. Patienter blev rekrutteret gennem CMT-Net-netværket, hvor CMTNSV2 blev anvendt som en sygdomsresultat. RNASEQ -analyser identificerede adskillige kandidatgener, der overlappede hos både CMT1A -patienter og rotte -modellerne, hvilket indikerede potentielle markører for sygdomsgrad.

Disse foreløbige data giver bevis for, at epigenetiske og andre omikdata fra både CMT1A -dyremodeller og humane patienter kan bruges til tovejs, informativ oversættelse i både fremad- og bagudvendelser. Baseret på disse tovejsdata blev RNA-sekventering udført fra blodet fra patienter i CMT-NET, hvor indledende potentielle biomarkører, sygdomsmodifikatorer og surrogatmarkører blev identificeret (Linhoff et al., Publikation under forberedelse). RT-PCR-dataene giver indsigt i forudsigelige udsagn om patienters kliniske udvikling over tid.

Baseret på disse fund planlægger vi at undersøge de identificerede biomarkører yderligere i et 4. besøg efter vores seneste etiske anvendelse til CMT-Net og bekræfte deres tilstedeværelse i hudbiopsier. Fokus er især på markører forbundet med nyligt observerede symptomer, såsom autonom dysfunktion og rysten. Denne udvidede tilgang sigter mod at forbedre diagnosen og overvågningen af ​​sygdommen, hvilket muliggør mere præcis og individualiserede terapeutiske tilgange.

Formålet med dette projekt er at bedre forstå den naturlige progression af CMT1A -sygdom og at identificere potentielle risikofaktorer, der kan have indflydelse på sygdommens forløb. CMT1A, en undertype af CMT, er den mest almindelige arvelige perifere neuropati. Dens langsomme, progressive sygdomsforløb viser en høj variation i individuelle fænotyper på trods af genetisk homogenitet. Det primære mål med projektet er at analysere potentielle determinanter for fænotypisk ekspression, herunder sværhedsgrad og at dokumentere symptomvariabilitet over en samlet periode på fem år som en indikator for sygdomsdynamik.

CMT er en sjælden, uhelbredelig sygdom, skønt der i øjeblikket udvikles nye farmakoterapier. Det er udfordrende at demonstrere effektivitet i kliniske forsøg på grund af den langsomme progression og mangel på følsomme resultatmål. Hovedmålet med dette underprojekt er at validere identificerede biomarkører (DNA/epigenetik og RNA/RT-PCR) og udvalgte følsomme resultatmål i blodet og hud hos CMT-patienter over en observationsperiode på mindst 5 år for at forbedre vurderingen af ​​effektivitet I fremtidige kliniske terapiforsøg, herunder diagnostisk overvågning af sygdomsprogression hos CMT -patienter. Cirka 25 raske frivillige vil også blive inkluderet som kontrol. For de frivillige registreres en kort medicinsk historie, og blod- og hudprøver indsamles for at validere biomarkørerne.

Målet med dette underprojekt er at indsamle vævsprøver (hud, blod og dyrkede fibroblaster) fra CMT-patienter med forskellige undertyper til ubegrænset videnskabelige og medicinske forskningsformål, for eksempel til forskningsprojekter inden for det tyske CMT-Net-netværk. Videnskabelige partnere vil modtage fri adgang til prøverne og dataene. Kommerciel brug uden for forskningsformål er ikke beregnet. Ved hjælp af CMT-vævssamlingen kan CMT-Net-partnere udføre morfologiske og molekylære biologiske analyser af patientmateriale samt udnytte fibroblastkulturer. Genotype-fænotypeundersøgelser kan også udføres. Indtil videre findes der allerede en samling af over 100 standardiserede hudbiopsier fra klinisk velkarakteriserede CMT1A-patienter. Denne samling er det eneste vævsopbevaringssted for vævsprøver fra patienter med arvelige neuropatier i Tyskland.

Formålet med dette projekt er at bedre forstå den naturlige progression af CMT1A -sygdom og at identificere potentielle risikofaktorer, der kan have indflydelse på sygdommens forløb. CMT1A, en undertype af CMT, er den mest almindelige arvelige perifere neuropati. Dens langsomme, progressive sygdomsforløb viser en høj variation i individuelle fænotyper på trods af genetisk homogenitet. Det primære mål med projektet er at analysere potentielle determinanter for fænotypisk ekspression, herunder sværhedsgrad og at dokumentere symptomvariabilitet over en samlet periode på fem år som en indikator for sygdomsdynamik.

CMT er en sjælden, uhelbredelig sygdom, skønt der i øjeblikket udvikles nye farmakoterapier. Det er udfordrende at demonstrere effektivitet i kliniske forsøg på grund af den langsomme progression og mangel på følsomme resultatmål. Hovedmålet med dette underprojekt er at validere identificerede biomarkører (DNA/epigenetik og RNA/RT-PCR) og udvalgte følsomme resultatmål i blodet og hud hos CMT-patienter over en observationsperiode på mindst 5 år for at forbedre vurderingen af ​​effektivitet I fremtidige kliniske terapiforsøg, herunder diagnostisk overvågning af sygdomsprogression hos CMT -patienter. Cirka 25 raske frivillige vil også blive inkluderet som kontrol. For de frivillige registreres en kort medicinsk historie, og blod- og hudprøver indsamles for at validere biomarkørerne.

Målet med dette underprojekt er at indsamle vævsprøver (hud, blod og dyrkede fibroblaster) fra CMT-patienter med forskellige undertyper til ubegrænset videnskabelige og medicinske forskningsformål, for eksempel til forskningsprojekter inden for det tyske CMT-Net-netværk. Videnskabelige partnere vil modtage fri adgang til prøverne og dataene. Kommerciel brug uden for forskningsformål er ikke beregnet. Ved hjælp af CMT-vævssamlingen kan CMT-Net-partnere udføre morfologiske og molekylære biologiske analyser af patientmateriale samt udnytte fibroblastkulturer. Genotype-fænotypeundersøgelser kan også udføres. Indtil videre findes der allerede en samling af over 100 standardiserede hudbiopsier fra klinisk velkarakteriserede CMT1A-patienter. Denne samling er det eneste vævsopbevaringssted for vævsprøver fra patienter med arvelige neuropatier i Tyskland.

Formålet med dette projekt er at bedre forstå den naturlige progression af CMT1A -sygdom og at identificere potentielle risikofaktorer, der kan have indflydelse på sygdommens forløb. CMT1A, en undertype af CMT, er den mest almindelige arvelige perifere neuropati. Dens langsomme, progressive sygdomsforløb viser en høj variation i individuelle fænotyper på trods af genetisk homogenitet. Det primære mål med projektet er at analysere potentielle determinanter for fænotypisk ekspression, herunder sværhedsgrad og at dokumentere symptomvariabilitet over en samlet periode på fem år som en indikator for sygdomsdynamik.

CMT er en sjælden, uhelbredelig sygdom, skønt der i øjeblikket udvikles nye farmakoterapier. Det er udfordrende at demonstrere effektivitet i kliniske forsøg på grund af den langsomme progression og mangel på følsomme resultatmål. Hovedmålet med dette underprojekt er at validere identificerede biomarkører (DNA/epigenetik og RNA/RT-PCR) og udvalgte følsomme resultatmål i blodet og hud hos CMT-patienter over en observationsperiode på mindst 5 år for at forbedre vurderingen af ​​effektivitet I fremtidige kliniske terapiforsøg, herunder diagnostisk overvågning af sygdomsprogression hos CMT -patienter. Cirka 25 raske frivillige vil også blive inkluderet som kontrol. For de frivillige registreres en kort medicinsk historie, og blod- og hudprøver indsamles for at validere biomarkørerne.