Biomarcadores longitudinales con medidas de resultado seleccionadas en CMT (CMT-BIO-Extend)

Hasta ahora, solo se han utilizado exámenes físicos y electrofisiológicos para determinar la gravedad de la enfermedad en pacientes con CMT. La puntuación de neuropatía CMT (CMTN) es una escala compuesta de nueve puntos válida y confiable que considera los síntomas sensoriales y motores (Shy et al. 2005). Sin embargo, su función como marcador de gravedad o progresión es controvertida debido al lento deterioro durante los años (Wang et al. 2017). Los biomarcadores sustitutos para la gravedad y la progresión de la enfermedad servirían como herramientas poderosas para monitorear los efectos terapéuticos en los estudios clínicos. Actualmente, no hay biomarcadores prácticos para CMT1A disponibles. Un estudio de resonancia magnética no invasiva mostró cambios en la acumulación de grasa muscular e intramuscular en las extremidades inferiores que se correlacionaron con el deterioro clínico (Gaeta et al. 2012). Este método muestra resultados prometedores como una medida de resultado sustituto para los ensayos clínicos, pero técnicamente es exigente y hasta ahora solo se ha probado en un pequeño grupo de pacientes con CMT y aquellos con varios otros trastornos neuromusculares.

El análisis molecular de fluidos corporales o muestras de tejido es una estrategia prometedora para desarrollar biomarcadores sustitutos clínicamente prácticos para la gravedad de la enfermedad en CMT1A. En el trabajo preliminar de nuestro grupo de investigación, los análisis de expresión génica de ratas CMT se correlacionaron con biopsias de piel en pacientes con CMT1A. Este análisis identificó varios genes individuales (STT2, CTSA, PPARG, CDA, ENPP1 y NRG1) que se correlacionaron con la gravedad de la enfermedad (Fledrich et al. 2017). Experimentos adicionales utilizando análisis de expresión génica de la piel y el nervio ciático (N. Ischiadicus) permitió una distinción entre ratas CMT ligeramente y gravemente afectadas (Fledrich et al. 2012).

Debido a la alta variabilidad en la expresión de la enfermedad, postulamos que una gran porción de manifestación de la enfermedad ocurre a nivel epigenético. Sobre la base de esto, nuestro enfoque inicial reveló una superposición significativa entre las regiones de ADN metiladas diferencialmente y los cambios transcripcionales en las ratas CMT. Este hallazgo sugirió que los cambios en la metilación del ADN podrían contribuir a la expresión génica alterada y, por lo tanto, a la patogénesis de CMT1A. En particular, dos grupos contenían transcripciones altamente reguladas enriquecidas con genes asociados con la regulación del ciclo celular. La regulación del ciclo celular está vinculada a PMP22/GAS315, el gen que causa CMT1A. El análisis de los factores de transcripción indicó una afectación significativa del importante regulador del ciclo celular de la familia E2F, junto con su conocido efector posterior EZH2, una metilasa esencial para la represión transcripcional en las células de Schwann a través de la metilación de la histona H3.

Según esto, un reclutamiento de un total de 150 pacientes tuvo lugar de 2016 a 2019, quienes fueron evaluados en tres visitas para variabilidad fenotípica, gravedad de la enfermedad y puntajes clínicos (NCT033386266). En este estudio traslacional, se utilizaron ratas que sobreexpresan el gen PMP22 y el material del paciente. De 150 animales, se seleccionaron 4 o 5 con expresiones de enfermedad suaves y graves, respectivamente. Los pacientes fueron reclutados a través de la red CMT-NET, donde el CMTNSV2 se usó como puntaje de enfermedad. Los análisis de RNASEQ identificaron varios genes candidatos que se superponían tanto en los pacientes con CMT1A como en los modelos de rata, lo que indica marcadores potenciales para la gravedad de la enfermedad.

Estos datos preliminares proporcionan evidencia de que los datos epigenéticos y de otros ómicos de los modelos animales CMT1A y los pacientes humanos pueden usarse para la traducción bidireccional e informativa en direcciones hacia adelante y hacia atrás. Según estos datos bidireccionales, la secuenciación de ARN se realizó a partir de la sangre de pacientes en CMT-NET, donde se identificaron biomarcadores potenciales iniciales, modificadores de la enfermedad y marcadores sustitutos (Linhoff et al., Publicación en preparación). Los datos de RT-PCR proporcionan información sobre declaraciones predictivas sobre el desarrollo clínico de los pacientes a lo largo del tiempo.

Según estos hallazgos, planeamos investigar más a fondo los biomarcadores identificados en una cuarta visita, siguiendo nuestra última aplicación de ética a CMT-NET y confirmar su presencia en biopsias de piel. El enfoque se centra particularmente en los marcadores asociados con síntomas recientemente observados, como la disfunción autonómica y los temblores. Este enfoque ampliado tiene como objetivo mejorar el diagnóstico y el monitoreo de la enfermedad, permitiendo enfoques terapéuticos más precisos e individualizados.

El objetivo de este proyecto es comprender mejor la progresión natural de la enfermedad CMT1A e identificar posibles factores de riesgo que pueden influir en el curso de la enfermedad. CMT1A, un subtipo de CMT, es la neuropatía periférica hereditaria más común. Su curso de enfermedad lenta y progresiva muestra una alta variabilidad de los fenotipos individuales a pesar de la homogeneidad genética. El objetivo principal del proyecto es analizar potenciales determinantes de la expresión fenotípica, incluidos los niveles de gravedad, y documentar la variabilidad de los síntomas durante un período total de cinco años como indicador de la dinámica de la enfermedad.

CMT es una enfermedad rara e incurable, aunque actualmente se están desarrollando nuevas farmacoterapias. Demostrar eficacia en los ensayos clínicos es un desafío debido a la lenta progresión y la falta de medidas de resultado sensibles. El objetivo principal de este subproyecto es validar biomarcadores identificados (ADN/epigenética y ARN/RT-PCR) y medidas de resultado sensibles seleccionadas en la sangre y la piel de los pacientes con CMT durante un período de observación de al menos 5 años para mejorar la evaluación de la eficacia. En futuros ensayos de terapia clínica, incluida la monitorización diagnóstica de la progresión de la enfermedad en pacientes con CMT. Aproximadamente 25 voluntarios sanos también se incluirán como controles. Para los voluntarios, se registrará un breve historial médico y se recolectarán muestras de sangre y piel para validar los biomarcadores.

El objetivo de este subproject es recolectar muestras de tejido (piel, sangre y fibroblastos cultivados) de pacientes con CMT con varios subtipos para fines de investigación científica y médica sin restricciones, por ejemplo, para proyectos de investigación dentro de la red de redes CMT alemanas. Los socios científicos recibirán acceso gratuito a las muestras y datos. El uso comercial fuera de los propósitos de investigación no está destinado. Con la ayuda de la recolección de tejidos CMT, los socios de la red CMT pueden realizar análisis biológicos morfológicos y moleculares del material del paciente, así como utilizar cultivos de fibroblastos. También se pueden realizar estudios de genotipo-fenotipo. Hasta la fecha, ya existe una colección de más de 100 biopsias de piel estandarizadas de pacientes con CMT1A clínicamente bien caracterizados. Esta colección es el único repositorio de tejidos para muestras de tejidos de pacientes con neuropatías hereditarias en Alemania.

El objetivo de este proyecto es comprender mejor la progresión natural de la enfermedad CMT1A e identificar posibles factores de riesgo que pueden influir en el curso de la enfermedad. CMT1A, un subtipo de CMT, es la neuropatía periférica hereditaria más común. Su curso de enfermedad lenta y progresiva muestra una alta variabilidad de los fenotipos individuales a pesar de la homogeneidad genética. El objetivo principal del proyecto es analizar potenciales determinantes de la expresión fenotípica, incluidos los niveles de gravedad, y documentar la variabilidad de los síntomas durante un período total de cinco años como indicador de la dinámica de la enfermedad.

CMT es una enfermedad rara e incurable, aunque actualmente se están desarrollando nuevas farmacoterapias. Demostrar eficacia en los ensayos clínicos es un desafío debido a la lenta progresión y la falta de medidas de resultado sensibles. El objetivo principal de este subproyecto es validar biomarcadores identificados (ADN/epigenética y ARN/RT-PCR) y medidas de resultado sensibles seleccionadas en la sangre y la piel de los pacientes con CMT durante un período de observación de al menos 5 años para mejorar la evaluación de la eficacia. En futuros ensayos de terapia clínica, incluida la monitorización diagnóstica de la progresión de la enfermedad en pacientes con CMT. Aproximadamente 25 voluntarios sanos también se incluirán como controles. Para los voluntarios, se registrará un breve historial médico y se recolectarán muestras de sangre y piel para validar los biomarcadores.

El objetivo de este subproject es recolectar muestras de tejido (piel, sangre y fibroblastos cultivados) de pacientes con CMT con varios subtipos para fines de investigación científica y médica sin restricciones, por ejemplo, para proyectos de investigación dentro de la red de redes CMT alemanas. Los socios científicos recibirán acceso gratuito a las muestras y datos. El uso comercial fuera de los propósitos de investigación no está destinado. Con la ayuda de la recolección de tejidos CMT, los socios de la red CMT pueden realizar análisis biológicos morfológicos y moleculares del material del paciente, así como utilizar cultivos de fibroblastos. También se pueden realizar estudios de genotipo-fenotipo. Hasta la fecha, ya existe una colección de más de 100 biopsias de piel estandarizadas de pacientes con CMT1A clínicamente bien caracterizados. Esta colección es el único repositorio de tejidos para muestras de tejidos de pacientes con neuropatías hereditarias en Alemania.

El objetivo de este proyecto es comprender mejor la progresión natural de la enfermedad CMT1A e identificar posibles factores de riesgo que pueden influir en el curso de la enfermedad. CMT1A, un subtipo de CMT, es la neuropatía periférica hereditaria más común. Su curso de enfermedad lenta y progresiva muestra una alta variabilidad de los fenotipos individuales a pesar de la homogeneidad genética. El objetivo principal del proyecto es analizar potenciales determinantes de la expresión fenotípica, incluidos los niveles de gravedad, y documentar la variabilidad de los síntomas durante un período total de cinco años como indicador de la dinámica de la enfermedad.

CMT es una enfermedad rara e incurable, aunque actualmente se están desarrollando nuevas farmacoterapias. Demostrar eficacia en los ensayos clínicos es un desafío debido a la lenta progresión y la falta de medidas de resultado sensibles. El objetivo principal de este subproyecto es validar biomarcadores identificados (ADN/epigenética y ARN/RT-PCR) y medidas de resultado sensibles seleccionadas en la sangre y la piel de los pacientes con CMT durante un período de observación de al menos 5 años para mejorar la evaluación de la eficacia. En futuros ensayos de terapia clínica, incluida la monitorización diagnóstica de la progresión de la enfermedad en pacientes con CMT. Aproximadamente 25 voluntarios sanos también se incluirán como controles. Para los voluntarios, se registrará un breve historial médico y se recolectarán muestras de sangre y piel para validar los biomarcadores.