Farmakogenetikk av Leflunomid i Behandlingen av Revmatoid Artritt

Revmatoid artritt (RA) er en inflammatorisk autoimmun sykdom. Forekomsten i Pakistan er omtrent 0,5 % av den generelle befolkningen. Tidlig innføring av sykdomsmodifiserende antireumatika (DMARD) sammen med passende intensivering av DMARD (behandle-for-mål-tilnærmingen) er den mest effektive behandlingsstrategien. Leflunomid, et prodrug, er et annelinje DMARD som brukes i behandlingen av RA. Den aktive metabolitten av teriflunomid hemmer enzymet dihydroorotatdehydrogenase (DHODH). Dette forhindrer de novo-syntese av pyrimidiner. Derfor hemmes T-celleproliferasjonen som er karakteristisk for RA. Farmakogenetiske studier spesifiserer forholdet mellom enkeltnukleotidpolymorfier (SNPer) og variasjonen i LEF-serumnivåer med potensiell relevans for effektivitet og tolerabilitet hos individuelle RA-pasienter.

Som et enkeltmiddel i RA er effektiviteten av leflunomid annelinje. Nesten 30 % av pasientene slutter med metotreksat i det første året av behandlingen, og leflunomid er billigere enn biologiske DMARD og har færre bivirkninger. Imidlertid har det vist en effektivitetsrate på nesten 68 % i aktiv RA. Forsøk viser at 58,1 % av pasientene opplever én bivirkning på grunn av leflunomid, og 29 % avbryter behandlingen på grunn av dem. Dermed kan «behandle-for-mål»-tilnærmingen mislykkes, og permanent leddskade oppstår, noe som fører til funksjonshemming. Derfor er en prospektiv studie av RA-pasienter i den pakistanske befolkningen som tar Leflunomid som et enkelt DMARD (med eller uten steroider) som analyserer variasjoner i gener som koder for DHODH og ABCG2 med behandlingsutfall, og som studerer både effektivitet og toksisitet.

Hypotese: Det er et signifikant forhold mellom DHODH, ABCG2-genpolymorfier med kliniske effekter og toksisiteten av leflunomid.

Målet med denne studien er å avgjøre om polymorfisme i DHODH, ABCG2-gener er assosiert med respons på leflunomidbehandling hos pasienter med RA.

MÅL Å bestemme frekvensen av genpolymorfier i DHODH, ABCG2 hos pakistanske pasienter.

Å finne ut sammenhengen mellom DHODH, ABCG2-genpolymorfier og kliniske effekter av Leflunomid Å finne ut sammenhengen mellom DHODH, ABCG2-genpolymorfier og toksisiteten av Leflunomid For å oppnå dette vil vi først prospektivt studere RA-pasienter som tar enkelt DMARD Leflunomid som rapporterer til FFH Revmatologi OPD. Vi vil registrere egenskapene til effektivitets- og toksisitetsparametere ved utgangspunktet, 3 måneder og 6 måneder. På deres første besøk vil samtykke til å delta i studien og en 5 ml blodprøve bli tatt. DNA-ekstraksjon etterfulgt av sager-sekvensering vil bli utført. Til slutt vil de genetiske assosiasjonene med de kliniske parametrene bli oppnådd ved bruk av korrelasjon og multivariat analyse på den nyeste versjonen av SPSS.

Leflunomid er et konvensjonelt syntetisk DMARD som brukes i behandlingen av RA når førstelinjemidler svikter; enten er de ineffektive eller for giftige til å tolereres av pasienten. Før man bytter til biologika som er dyre og har et spekter av bivirkninger; et forsøk med et lett administrert (gitt oralt i motsetning til biologika som må gis ved infusjon) og et kostnadseffektivt legemiddel synes å være avgjørende. Imidlertid; effektiviteten av leflunomid kan generelt bedømmes over en periode på omtrent 3–6 måneder, og å forkorte tiden til sykdomsundertrykkelse er avgjørende for forbedrede utfall i RA. Det er derfor ønskelig å unngå forsinkelser forårsaket av bruk av leflunomid hos pasienter hvor respons er usannsynlig, siden potensielt mer effektive alternativer, som biologiske DMARD, er tilgjengelige. Genetiske polymorfier kan påvirke legemiddelresponser gjennom mange mekanismer. Resultatene fra mange studier bekrefter at genotypebaserte terapier er de mest effektive og kan bidra til å unngå forekomsten av større bivirkninger, samt redusere behandlingskostnadene. Genetiske variasjoner påvirker dannelsen av aktive metabolitter. Cytochrom P450 (CYP)-systemet, spesielt enzymet kodet av CYP1A2, CYP2C19, aktiverer leflunomid. ABCG2-genet koder for efflukspumpen og studeres for effektivitet. DHODH 19A>C (rs 3213422) polymorfismen har blitt studert som en prediktor for både effektivitet og toksisitet av leflunomid.

Til dags dato har LEF-farmakogenetikk ikke blitt studert i den pakistanske befolkningen. Det er ingen innsikt i leflunomid-genetikk i Sørøst-Asia.

Basert på genotyping, kan tidligere identifisering av pasienter som enten er resistente mot LEF-terapi eller antas å være i høy risiko for bivirkninger gjøres Dette ville tillate oss å bytte terapien til et annet DMARD i tide. Dette er også verdifullt fordi vi kan etablere før vi i det hele tatt initierer terapien En prospektiv studie av RA-pasienter i den pakistanske befolkningen som tar Leflunomid som et enkelt DMARD (med eller uten steroider), analyserer variasjoner i gener som koder for DHODH, ABCG2 med behandlingsutfall, og studerer både effektivitet og toksisitet.

Er det noen sammenheng mellom DHODH, ABCG2-genpolymorfier med kliniske effekter og toksisiteten av leflunomid?

Metodikk:

Studiedesign: Prospektiv, observasjonsbasert, kohortlongitudinal studie Setting: Fauji Foundation Hospital, Rawalpindi, laboratorieinnstillinger ved Shifa College of Medicine & Shifa College of Pharmaceutical Science, Islamabad.

Studiens varighet: 24 måneder etter godkjenning av synopsisen. Utvalgsstørrelse: N=120 ved bruk av nettbasert utvalgsstørrelseskalkulator for genetiske studier; studiens styrke er 80 %, signifikansnivå på 0,05 %, KI 95 % Prøvetakingsteknikk: Målrettet bekvemmelighetsutvalg Inklusjonskriterier

1. Ved utgangspunktet skal alle pasienter oppfylle de reviderte ACR/EULAR-kriteriene for RA10
2. Pakistanske individer
3. mellom 20–75 år
4. Nye tilfeller startet på leflunomid/de som allerede tar i mindre enn en måned og deres biokjemiske og kliniske data er tilgjengelig

Eksklusjonskriterier:

1. Pasienter som ikke er villige til å delta/samtykke ikke gitt
2. Pasienter under 20 år
3. Ikke-pakistansk opprinnelse
4. Tar et annet DMARD samtidig
5. Nedsatt nyre- og leverfunksjon
6. Kognitiv svikt, nevrologisk sykdom
7. Gravide/ ammende pasienter
8. Pasienter med inflammatorisk tarmsykdom/ irritabel tarmsyndrom
9. Pasienter med aktive infeksjonssykdommer
10. Pasienter som ikke fullfører 3 måneders leflunomidterapi Måling av effektivitet DAS28-ESR (sykdomsaktivitetsresultat) Pasientens globale vurdering av generell helse uttrykt på visuell analog skala (VAS 0-100 mm).

Antisyklisk sitrullinert peptidantistoff (anti-CCP), Overvåking av erosive endringer i hender og føtter observert på røntgenbilder Overvåking av synovitt på ultralyd Måling av toksisitet

• LFT-er - hepatotoksisitet
• Datainnsamling for toksisitet i. Kvalme, Oppkast ii. Diaré iii. Magesmerter iv. Hårtap v. Vektøkning vi. Utslett / eksem vii. Slimhinneforandringer, furunkulose, negleforandringer viii. Blodtrykk ix. Antall infeksjoner under behandlingen (urinveisinfeksjoner, luftveisinfeksjoner) x. Hodepine, Svimmelhet, Parastesier xi. Menstruasjonsforstyrrelser xii. Hudinfeksjoner

Dataskjema er designet for det, som er vedlagt. Pasientutvalg: Prøven vil bli samlet fra pasienter som mottar leflunomidbehandling for RA Formålet og prosedyren vil bli forklart. Samtykke til å delta i studien vil bli registrert Alle pasienter vil bli vurdert med DAS28 ved utgangspunktet og seks og tolv uker etter behandlingsstart. Bivirkningers frekvens og intensitet vil også bli registrert på datainnsamlingsskjemaet Prøveinnsamling: 5 ml blod vil bli samlet i EDTA-antikoagulerte rør for ekstraksjon av DNA og sekvensering Endepunkt: Pasienter vil bli klassifisert i respondenter og ikke-respondenter (EULAR 2022-retningslinjer og DAS 28) Alle de biokjemiske markørene og bivirkningene vil bli studert Statistisk analyse: vil bli utført på SPSS v27 Kategoriske variabler vil bli presentert som verdier og sammenlignet ved bruk av Chi-kvadrat-test. En P-verdi på <0,05 vil være statistisk signifikant Kvantitative variabler vil bli uttrykt som gjennomsnittet ± standardavvik (SD) og genotypevis forskjell mellom grupper vil bli vurdert ved bruk av enveis variansanalyse (ANOVA) med post hoc Tukey multippel sammenligningstest.

Alle SNPer vil bli studert, nye SNPer vil bli rapportert DHODH-haplotype, SNPer vil bli identifisert ved in silico-analyse Algoritmekonstruksjon i henhold til resultater for den pakistanske befolkningen