Jernakkumulering i erytrocytter hos pasienter

Thalassemi refererer til en gruppe blodsykdommer kjennetegnet av en reduksjon eller fravær av syntesen av en eller flere normale globinkjeder. Avhengig av deres kliniske alvorlighetsgrad og transfusjonsbehov, kan de deles inn i transfusjonsavhengig og ikke-transfusjonsavhengig thalassemi. Hos pasienter med beta-thalassemi major er Hb A-syntesen svært lav, og Hb F utgjør mer enn 80 % av det totale hemoglobinet. Disse pasientene er ofte transfusjonsavhengige for å sikre vevsoxygenasjon og undertrykke ineffektiv erytropoese. Transfusjonsavhengige pasienter må også starte jernkjelasjonsterapi etter en periode for å forhindre jernopphopning i kroppen. Selv om prosedyrer som leverbiopsi og kardiell MR (magnetresonansavbildning) finnes for direkte å bestemme vevsjernopphopning, er disse prosedyrene invasive, tidkrevende, kostbare og krever et egnet miljø. Derfor tas beslutningen om å starte jernkjelasjonsterapi og justere doseringen ofte ved å overvåke ferritinnivåer, som indikerer vevsjernopphopning. Serumferritin er den mest brukte teknikken for indirekte å indikere kroppens jernlagre.

Jernopphopning i kroppen på grunn av hyppige transfusjoner påvirker ikke bare vev som lever, hjerte og nervesystem, men også erytroide celler. Mens tidligere studier ofte har målt plasma jern ikke bundet til transferrin, også kjent som labilt plasmajern, finnes det også publikasjoner som analyserer intracellulært labilt jern ved farging med calcein og bruk av flowcytometri. En annen studie målte fritt jern innenfor erytrocytter ved hjelp av HPLC (høytrykksvæskekromatografi). Imidlertid er både HPLC og flowcytometri dyre og vanskelige teknikker som krever teknikerekspertise og er ikke tilgjengelige i alle laboratorier. I vår studie har vi som mål å modifisere den kolorimetriske metoden brukt for tradisjonell jernmåling og måle hemoglobin-fritt jern i hemolysatprøver hentet fra erytrocytter. Enklere sagt, vi ønsker å oppdage jernopphopning i erytrocyttene til thalassemipasienter som mottar hyppige transfusjoner. Som kjent er serumferritinovervåkning en parameter som påvirker beslutningen om å starte jernkjelasjonsterapi og behandlingsdosen hos thalassemipasienter. Imidlertid har serumferritinovervåkning noen alvorlige ulemper. Serumferritin er en indirekte indikator på jernoverbelastning, som viser et ikke-lineært respons på høy jernoverbelastning; fraværet av en reduksjon i serumferritin under oppfølging utelukker ikke dette responset. Videre er ferritin en positiv akutfasereaktant, og serumnivåene øker i mange tilfeller, noe som gjør det vanskelig å skille om økningen hos thalassemipasienter skyldes opphopning eller infeksjon. I vår studie har vi som mål å direkte vurdere endringer i jernoverbelastning på cellenivå, i motsetning til ferritin, ved å måle intracellulært jern som ikke er bundet til hemoglobin.