Järnackumulering i erytrocyter hos patienter

Thalassemi syftar på en grupp blodsjukdomar som kännetecknas av en minskning eller frånvaro av syntes av en eller flera normala globinkedjor. Beroende på deras kliniska allvarlighetsgrad och transfusionsbehov kan de delas in i transfusionsberoende och icke-transfusionsberoende thalassemier. Hos patienter med beta-thalassemi major är Hb A-syntes mycket låg, och Hb F utgör mer än 80 % av det totala hemoglobinhalten. Dessa patienter är ofta transfusionsberoende för att säkerställa vävnads syresättning och undertrycka ineffektiv erytropoes. Transfusionsberoende patienter måste också påbörja järnkelationsterapi efter en tid för att förhindra järnackumulering i kroppen. Även om procedurer som leverbiopsi och magnetisk resonanstomografi (MRI) av hjärtat finns för att direkt bestämma vävnadsjärnackumulering, är dessa procedurer invasiva, tidskrävande, kostsamma och kräver en lämplig miljö. Därför fattas beslutet att påbörja järnkelationsterapi och justera doseringen ofta genom att övervaka ferritinnivåer, vilka indikerar vävnadsjärnackumulering. Serumferritin är den vanligaste tekniken för att indirekt indikera kroppens järnlagringar.

Järnackumulering i kroppen på grund av frekventa transfusioner påverkar inte bara vävnader som levern, hjärtat och nervsystemet, utan även erytroida celler. Även om tidigare studier ofta har mätt plasmajärn som inte är bundet till transferrin, även känt som labilt plasmajärn, finns det också publikationer som analyserar intracellulärt labilt järn genom färgning med calcein och användning av flödescytometri. En annan studie mätte fritt järn inom erytrocyter med HPLC (högprestandavätskekromatografi). Både HPLC och flödescytometri är dock dyra och svåra tekniker som kräver tekniska kunskaper och är inte tillgängliga i alla laboratorier. I vår studie syftar vi till att modifiera den kolorimetriska metoden som används för traditionell järnmätning och mäta hemoglobin-fritt järn i hemolysatprover erhållna från erytrocyter. Enklare uttryckt syftar vi till att upptäcka järnackumulering i erytrocyterna hos thalassemipatienter som får frekventa transfusioner. Som bekant är övervakning av serumferritin en parameter som påverkar beslutet att påbörja järnkelationsterapi och behandlingsdosen hos thalassemipatienter. Serumferritinövervakning har dock vissa allvarliga nackdelar. Serumferritin är en indirekt indikator på järnöverbelastning, som visar ett icke-linjärt svar på hög järnöverbelastning; frånvaron av en minskning i serumferritin under uppföljning utesluter inte detta svar. Dessutom är ferritin en positiv akutfasreaktant, och serumnivåerna ökar i många fall, vilket gör det svårt att skilja på om ökningen hos thalassemipatienter beror på ackumulering eller infektion. I vår studie syftar vi till att direkt bedöma förändringar i järnöverbelastning på cellnivå, i motsats till ferritin, genom att mäta intracellulärt järn som inte är bundet till hemoglobin.