Accumulo di Ferro negli Eritrociti nei Pazienti

La talassemia si riferisce a un gruppo di disturbi del sangue caratterizzati da una diminuzione o assenza della sintesi di una o più catene globiniche normali. A seconda della loro gravità clinica e delle esigenze trasfusionali, possono essere suddivise in talassemie trasfusione-dipendenti e non trasfusione-dipendenti. Nei pazienti con beta-talassemia maggiore, la sintesi di Hb A è molto bassa e l'Hb F costituisce oltre l'80% dell'emoglobina totale. Questi pazienti sono spesso trasfusione-dipendenti per garantire l'ossigenazione dei tessuti e sopprimere l'eritropoiesi inefficace. I pazienti trasfusione-dipendenti devono anche iniziare la terapia chelante del ferro dopo un periodo per prevenire l'accumulo di ferro nell'organismo. Sebbene esistano procedure come la biopsia epatica e la risonanza magnetica cardiaca (imaging a risonanza magnetica) per determinare direttamente l'accumulo di ferro nei tessuti, queste procedure sono invasive, richiedono tempo, costose e necessitano di un ambiente adeguato. Pertanto, la decisione di iniziare la terapia chelante del ferro e di regolare il dosaggio viene spesso presa monitorando i livelli di ferritina, che indicano l'accumulo di ferro nei tessuti. La ferritina sierica è la tecnica più comunemente utilizzata per indicare indirettamente le riserve di ferro nell'organismo.

L'accumulo di ferro nell'organismo dovuto a trasfusioni frequenti colpisce non solo tessuti come fegato, cuore e sistema nervoso, ma anche gli eritrociti. Sebbene studi precedenti abbiano frequentemente misurato il ferro plasmatico non legato alla transferrina, noto anche come ferro plasmatico labile, ci sono anche pubblicazioni che analizzano il ferro labile intracellulare colorando con calceina e utilizzando la citometria a flusso. Un altro studio ha misurato il ferro libero all'interno degli eritrociti utilizzando HPLC (cromatografia liquida ad alta pressione). Tuttavia, sia l'HPLC che la citometria a flusso sono tecniche costose e difficili che richiedono competenze tecniche e non sono disponibili in ogni laboratorio. Nel nostro studio, miriamo a modificare il metodo colorimetrico utilizzato per la misurazione tradizionale del ferro e misurare il ferro libero dall'emoglobina in campioni di emolisato ottenuti dagli eritrociti. In termini più semplici, miriamo a rilevare l'accumulo di ferro negli eritrociti dei pazienti con talassemia che ricevono trasfusioni frequenti. Come è noto, il monitoraggio della ferritina sierica è un parametro che influenza la decisione di iniziare la terapia chelante del ferro e la dose di trattamento nei pazienti con talassemia. Tuttavia, il monitoraggio della ferritina sierica presenta alcuni seri svantaggi. La ferritina sierica è un indicatore indiretto del sovraccarico di ferro, mostrando una risposta non lineare all'elevato sovraccarico di ferro; l'assenza di una diminuzione della ferritina sierica durante il follow-up non preclude questa risposta. Inoltre, la ferritina è un reagente di fase acuta positivo e i livelli sierici aumentano in molti casi, rendendo difficile differenziare se l'aumento nei pazienti con talassemia sia dovuto ad accumulo o infezione. Nel nostro studio, miriamo a valutare direttamente i cambiamenti nel sovraccarico di ferro a livello cellulare, in contrasto con la ferritina, misurando il ferro intracellulare che non è legato all'emoglobina.