Jernophobning i erytrocytter hos patienter

Thalassæmi henviser til en gruppe blodsygdomme, der er karakteriseret ved et fald eller fravær af syntesen af en eller flere normale globinkæder. Afhængigt af deres kliniske sværhedsgrad og transfusionbehov kan de inddeles i transfusionafhængig og ikke-transfusionafhængig thalassæmi. Hos patienter med beta-thalassæmi major er Hb A-syntesen meget lav, og Hb F udgør mere end 80 % af det samlede hæmoglobin. Disse patienter er ofte transfusionafhængige for at sikre vævsiltning og undertrykke ineffektiv erytropoese. Transfusionafhængige patienter skal også påbegynde jernchelationsterapi efter en periode for at forhindre jernophobning i kroppen. Selvom procedurer som leverbiopsi og kardial MR-skanning (magnetisk resonansbilleddannelse) findes for direkte at bestemme vævsjernophobning, er disse procedurer invasive, tidskrævende, dyre og kræver et passende miljø. Derfor træffes beslutningen om at påbegynde jernchelationsterapi og justere dosis ofte ved at overvåge ferritinniveauer, som indikerer vævsjernophobning. Serumferritin er den mest almindeligt anvendte teknik til indirekte at indikere kroppens jernlagre.

Jernophobning i kroppen på grund af hyppige transfusioner påvirker ikke kun væv som leveren, hjertet og nervesystemet, men også erytroide celler. Mens tidligere studier ofte har målt plasma-jern ikke bundet til transferrin, også kendt som labilt plasma-jern, er der også publikationer, der analyserer intracellulært labilt jern ved farvning med calcein og brug af flowcytometri. Et andet studie målte frit jern indenfor erytrocytter ved hjælp af HPLC (højtryksvæskekromatografi). HPLC og flowcytometri er dog begge dyre og vanskelige tekniker, der kræver teknikerekspertise og er ikke tilgængelige i alle laboratorier. I vores studie sigter vi mod at modificere den kolorimetriske metode, der bruges til traditionel jernmåling, og måle hæmoglobinfrit jern i hemolysatprøver opnået fra erytrocytter. Med enklere ord sigter vi mod at påvise jernophobning i erytrocytterne hos thalassæmipatienter, der modtager hyppige transfusioner. Som bekendt er serumferritinovervågning en parameter, der påvirker beslutningen om at påbegynde jernchelationsterapi og behandlingsdosis hos thalassæmipatienter. Serumferritinovervågning har dog nogle alvorlige ulemper. Serumferritin er en indirekte indikator for jernoverbelastning, der viser et ikke-lineært respons på høj jernoverbelastning; fraværet af et fald i serumferritin under opfølgning udelukker ikke dette respons. Desuden er ferritin en positiv akutfasereaktant, og serumniveauer stiger i mange tilfælde, hvilket gør det svært at differentiere, om stigningen hos thalassæmipatienter skyldes ophobning eller infektion. I vores studie sigter vi mod direkte at vurdere ændringer i jernoverbelastning på cellulært niveau, i modsætning til ferritin, ved at måle intracellulært jern, der ikke er bundet til hæmoglobin.