Накопление железа в эритроцитах у пациентов

Талассемия относится к группе заболеваний крови, характеризующихся снижением или отсутствием синтеза одной или нескольких нормальных глобиновых цепей. В зависимости от клинической тяжести и потребности в переливании крови, их можно разделить на талассемии, требующие переливания, и талассемии, не требующие переливания. У пациентов с большой бета-талассемией синтез Hb A очень низок, а Hb F составляет более 80% от общего гемоглобина. Эти пациенты часто зависят от переливаний крови для обеспечения оксигенации тканей и подавления неэффективного эритропоэза. Пациенты, зависимые от переливаний, также должны начать терапию хелатирования железа через некоторое время, чтобы предотвратить накопление железа в организме. Хотя существуют такие процедуры, как биопсия печени и МРТ сердца (магнитно-резонансная томография), для прямого определения накопления железа в тканях, эти процедуры являются инвазивными, трудоемкими, дорогостоящими и требуют подходящих условий. Поэтому решение о начале терапии хелатирования железа и корректировке дозировки часто принимается путем мониторинга уровня ферритина, который указывает на накопление железа в тканях. Сывороточный ферритин является наиболее часто используемой методикой для косвенного определения запасов железа в организме.

Накопление железа в организме из-за частых переливаний крови влияет не только на такие ткани, как печень, сердце и нервная система, но и на эритроидные клетки. Хотя в предыдущих исследованиях часто измеряли железо плазмы, не связанное с трансферрином, также известное как лабильное железо плазмы, есть также публикации, анализирующие внутриклеточное лабильное железо путем окрашивания кальцеином и использования проточной цитометрии. В другом исследовании измеряли свободное железо внутри эритроцитов с помощью ВЭЖХ (высокоэффективной жидкостной хроматографии). Однако как ВЭЖХ, так и проточная цитометрия являются дорогостоящими и сложными методами, требующими экспертных знаний техников, и они доступны не в каждой лаборатории. В нашем исследовании мы стремимся модифицировать колориметрический метод, используемый для традиционного измерения железа, и измерить железо, не связанное с гемоглобином, в образцах гемолизата, полученных из эритроцитов. Проще говоря, мы стремимся обнаружить накопление железа в эритроцитах пациентов с талассемией, получающих частые переливания крови. Как известно, мониторинг сывороточного ферритина является параметром, который влияет на решение о начале терапии хелатирования железа и дозе лечения у пациентов с талассемией. Однако мониторинг сывороточного ферритина имеет некоторые серьезные недостатки. Сывороточный ферритин является косвенным показателем перегрузки железом, демонстрируя нелинейный ответ на высокую перегрузку железом; отсутствие снижения сывороточного ферритина во время наблюдения не исключает этот ответ. Кроме того, ферритин является положительным белком острой фазы, и его уровень в сыворотке повышается во многих случаях, что затрудняет дифференциацию того, связано ли повышение у пациентов с талассемией с накоплением или инфекцией. В нашем исследовании мы стремимся напрямую оценить изменения перегрузки железом на клеточном уровне, в отличие от ферритина, путем измерения внутриклеточного железа, не связанного с гемоглобином.