Acumulação de Ferro em Eritrócitos em Pacientes

A talassemia refere-se a um grupo de distúrbios sanguíneos caracterizados por uma diminuição ou ausência da síntese de uma ou mais cadeias de globina normais. Dependendo da sua gravidade clínica e necessidades de transfusão, podem ser divididas em talassemias dependentes de transfusão e talassemias não dependentes de transfusão. Em pacientes com beta-talassemia major, a síntese de Hb A é muito baixa, e a Hb F constitui mais de 80% da hemoglobina total. Estes pacientes são frequentemente dependentes de transfusão para garantir a oxigenação dos tecidos e suprimir a eritropoiese ineficaz. Os pacientes dependentes de transfusão também precisam de iniciar terapia de quelação de ferro após um período para prevenir a acumulação de ferro no corpo. Embora existam procedimentos como a biópsia hepática e a RMC (ressonância magnética cardíaca) para determinar diretamente a acumulação de ferro nos tecidos, estes procedimentos são invasivos, demorados, dispendiosos e requerem um ambiente adequado. Portanto, a decisão de iniciar a terapia de quelação de ferro e ajustar a dosagem é frequentemente tomada monitorizando os níveis de ferritina, que indicam a acumulação de ferro nos tecidos. A ferritina sérica é a técnica mais utilizada para indicar indiretamente as reservas de ferro do corpo.

A acumulação de ferro no corpo devido a transfusões frequentes afeta não apenas tecidos como o fígado, coração e sistema nervoso, mas também as células eritróides. Embora estudos anteriores tenham frequentemente medido o ferro plasmático não ligado à transferrina, também conhecido como ferro plasmático lábil, também existem publicações analisando o ferro lábil intracelular através de coloração com calceína e usando citometria de fluxo. Outro estudo mediu o ferro livre dentro dos eritrócitos usando HPLC (cromatografia líquida de alta pressão). No entanto, tanto o HPLC como a citometria de fluxo são técnicas dispendiosas e difíceis que requerem especialização técnica e não estão disponíveis em todos os laboratórios. No nosso estudo, pretendemos modificar o método colorimétrico utilizado para a medição tradicional de ferro e medir o ferro livre de hemoglobina em amostras de hemolisado obtidas a partir de eritrócitos. Em termos mais simples, pretendemos detetar a acumulação de ferro nos eritrócitos de pacientes com talassemia que recebem transfusões frequentes. Como é sabido, a monitorização da ferritina sérica é um parâmetro que influencia a decisão de iniciar a terapia de quelação de ferro e a dose de tratamento em pacientes com talassemia. No entanto, a monitorização da ferritina sérica tem algumas desvantagens graves. A ferritina sérica é um indicador indireto de sobrecarga de ferro, mostrando uma resposta não linear a uma alta sobrecarga de ferro; a ausência de uma diminuição na ferritina sérica durante o acompanhamento não exclui esta resposta. Além disso, a ferritina é um reagente positivo de fase aguda, e os níveis séricos aumentam em muitos casos, tornando difícil diferenciar se o aumento em pacientes com talassemia se deve a acumulação ou infeção. No nosso estudo, pretendemos avaliar diretamente as alterações na sobrecarga de ferro ao nível celular, em oposição à ferritina, medindo o ferro intracelular que não está ligado à hemoglobina.