Akumulace železa v erytrocytech u pacientů

Talasemie označuje skupinu krevních poruch charakterizovaných snížením nebo absencí syntézy jednoho nebo více normálních globinových řetězců. V závislosti na jejich klinické závažnosti a potřebě transfuzí je lze rozdělit na talasemie závislé na transfuzích a talasemie nezávislé na transfuzích. U pacientů s beta-talasemií major je syntéza Hb A velmi nízká a Hb F tvoří více než 80 % celkového hemoglobinu. Tito pacienti jsou často závislí na transfuzích, aby byla zajištěna tkáňová oxygenace a potlačena neefektivní erytropoéza. Pacienti závislí na transfuzích také potřebují po určité době zahájit chelatační terapii železem, aby se zabránilo hromadění železa v těle. Ačkoli existují postupy, jako je jaterní biopsie a kardiální MRI (magnetická rezonance), které přímo určují hromadění železa v tkáních, tyto postupy jsou invazivní, časově náročné, nákladné a vyžadují vhodné prostředí. Proto se rozhodnutí zahájit chelatační terapii železem a upravit dávkování často činí sledováním hladin feritinu, které indikují hromadění železa v tkáních. Sérový feritin je nejčastěji používanou technikou pro nepřímé indikování zásob železa v těle.

Hromadění železa v těle v důsledku častých transfuzí ovlivňuje nejen tkáně, jako jsou játra, srdce a nervový systém, ale také erytroidní buňky. Zatímco předchozí studie často měřily plazmatické železo nevázané na transferin, známé také jako labilní plazmatické železo, existují také publikace analyzující intracelulární labilní železo barvením kalceinem a pomocí průtokové cytometrie. Další studie měřila volné železo v erytrocytech pomocí HPLC (vysokotlaká kapalinová chromatografie). Avšak jak HPLC, tak průtoková cytometrie jsou drahé a obtížné techniky vyžadující odborné znalosti technika a nejsou dostupné v každé laboratoři. V naší studii si klademe za cíl upravit kolorimetrickou metodu používanou pro tradiční měření železa a měřit železo bez hemoglobinu ve vzorcích hemolysátu získaných z erytrocytů. Jednoduše řečeno, naším cílem je detekovat hromadění železa v erytrocytech pacientů s talasemií, kteří dostávají časté transfuze. Jak je známo, sledování sérového feritinu je parametr, který ovlivňuje rozhodnutí zahájit chelatační terapii železem a léčebnou dávku u pacientů s talasemií. Sledování sérového feritinu má však některé závažné nevýhody. Sérový feritin je nepřímým ukazatelem přetížení železem, vykazuje nelineární odezvu na vysoké přetížení železem; absence poklesu sérového feritinu během sledování nevylučuje tuto odezvu. Navíc je feritin pozitivním reaktantem akutní fáze a jeho sérové hladiny se v mnoha případech zvyšují, což ztěžuje rozlišení, zda je zvýšení u pacientů s talasemií způsobeno hromaděním nebo infekcí. V naší studii si klademe za cíl přímo posoudit změny v přetížení železem na buněčné úrovni, na rozdíl od feritinu, měřením intracelulárního železa, které není vázáno na hemoglobin.