Nagromadzenie żelaza w erytrocytach u pacjentów

Talasemia odnosi się do grupy zaburzeń krwi charakteryzujących się zmniejszeniem lub brakiem syntezy jednego lub więcej normalnych łańcuchów globinowych. W zależności od ich nasilenia klinicznego i wymagań transfuzyjnych można je podzielić na talasemie zależne od transfuzji i niezależne od transfuzji. U pacjentów z ciężką postacią beta-talasemii synteza Hb A jest bardzo niska, a Hb F stanowi ponad 80% całkowitej hemoglobiny. Ci pacjenci często są zależni od transfuzji, aby zapewnić utlenowanie tkanek i tłumić nieskuteczną erytropoezę. Pacjenci zależni od transfuzji muszą również po pewnym czasie rozpocząć terapię chelatowania żelaza, aby zapobiec gromadzeniu się żelaza w organizmie. Chociaż istnieją procedury, takie jak biopsja wątroby i rezonans magnetyczny serca, aby bezpośrednio określić nagromadzenie żelaza w tkankach, te procedury są inwazyjne, czasochłonne, kosztowne i wymagają odpowiedniego środowiska. Dlatego decyzję o rozpoczęciu terapii chelatowania żelaza i dostosowaniu dawki często podejmuje się poprzez monitorowanie poziomu ferrytyny, która wskazuje na nagromadzenie żelaza w tkankach. Surowicza ferrytyna jest najczęściej stosowaną techniką do pośredniego wskazywania zapasów żelaza w organizmie.

Nagromadzenie żelaza w organizmie z powodu częstych transfuzji wpływa nie tylko na tkanki, takie jak wątroba, serce i układ nerwowy, ale także na komórki erytroidalne. Chociaż wcześniejsze badania często mierzyły żelazo w osoczu nie związane z transferyną, znane również jako labilne żelazo osocza, istnieją również publikacje analizujące wewnątrzkomórkowe labilne żelazo poprzez barwienie kalceiną i użycie cytometrii przepływowej. Inne badanie mierzyło wolne żelazo w erytrocytach przy użyciu HPLC (wysokosprawnej chromatografii cieczowej). Jednak zarówno HPLC, jak i cytometria przepływowa są kosztownymi i trudnymi technikami wymagającymi wiedzy technika i nie są dostępne w każdym laboratorium. W naszym badaniu zamierzamy zmodyfikować metodę kolorymetryczną stosowaną do tradycyjnego pomiaru żelaza i zmierzyć żelazo wolne od hemoglobiny w próbkach hemolizatu uzyskanych z erytrocytów. Mówiąc prościej, naszym celem jest wykrycie nagromadzenia żelaza w erytrocytach pacjentów z talasemią, którzy otrzymują częste transfuzje. Jak wiadomo, monitorowanie surowiczej ferrytyny jest parametrem wpływającym na decyzję o rozpoczęciu terapii chelatowania żelaza i dawce leczenia u pacjentów z talasemią. Jednak monitorowanie surowiczej ferrytyny ma pewne poważne wady. Surowicza ferrytyna jest pośrednim wskaźnikiem przeciążenia żelazem, wykazując nieliniową odpowiedź na wysokie przeciążenie żelazem; brak spadku surowiczej ferrytyny podczas obserwacji nie wyklucza tej odpowiedzi. Ponadto ferrytyna jest dodatnim białkiem ostrej fazy, a jej poziom w surowicy wzrasta w wielu przypadkach, utrudniając rozróżnienie, czy wzrost u pacjentów z talasemią jest spowodowany nagromadzeniem czy infekcją. W naszym badaniu zamierzamy bezpośrednio ocenić zmiany w przeciążeniu żelazem na poziomie komórkowym, w przeciwieństwie do ferrytyny, poprzez pomiar wewnątrzkomórkowego żelaza, które nie jest związane z hemoglobiną.