Terapia genowa komórkami macierzystymi w leczeniu ciężkiego złożonego niedoboru odporności sprzężonego z chromosomem X (XSCID)

Jest to badanie kliniczne fazy I/II dotyczące terapii genowej hematopoetycznych komórek macierzystych (HSC) ex vivo w leczeniu ciężkiego złożonego niedoboru odporności sprzężonego z chromosomem X (XSCID). XSCID wynika z defektów w genie IL2RG kodującym wspólny łańcuch gamma (gc) wspólny dla receptorów dla interleukiny 2 (IL-2), IL-4, IL-7, IL-9, IL-15 i IL-21. Pacjenci z XSCID na ogół nie mają limfocytów T i komórek NK, a ich limfocyty B nie wytwarzają niezbędnych przeciwciał. XSCID jest śmiertelny w okresie niemowlęcym bez rekonstytucji immunologicznej, takiej jak allogeniczny przeszczep szpiku kostnego (BMT). Jednak wielu pacjentów po przeszczepie osiąga tylko częściową odbudowę układu odpornościowego, w wyniku czego mają nawracające infekcje, autoimmunizację i/lub słaby wzrost. Niedawna udana retrowirusowa terapia genowa zamiast BMT u niemowląt z XSCID wskazuje, że terapia genowa ex vivo może przynieść korzyści kliniczne pacjentom z XSCID.

Zarejestrujemy ośmiu starszych pacjentów z XSCID (w wieku 1,5-20 lat; o masie ciała większej lub równej 12 kg), którzy próbowali BMT, ale którzy mają uporczywe zaburzenia limfocytów T i limfocytów B, które pogarszają ich jakość życia . Przed włączeniem osoby te będą miały autologiczne CD34+ HSC zmobilizowane przez leczenie czynnikiem stymulującym tworzenie kolonii granulocytów (G-CSF), pobrane z krwi obwodowej przez aferezę, poddane selekcji immunologicznej i kriokonserwowane w liczbie wystarczającej do osiągnięcia kryteriów włączenia (większych lub równych 1,0 x 10(6) CD34+ HSC/kg masy ciała). Pobieranie HSC będzie prowadzone zgodnie z oddzielnym, zatwierdzonym i aktywnym protokołem NIH, 94-I-0073, „Rekrutacja prekursorów układu krwiotwórczego krwi obwodowej przez czynnik stymulujący tworzenie kolonii granulocytów [G-CSF]”.

Autologiczne CD34+ HSC będą transdukowane ex vivo za pomocą mysiego onko-retrowirusowego wektora mysiego onko-retrowirusa (GALV) z pseudotypem otoczkowym, z defektem replikacji, MFGS-gc, który koduje wspólny łańcuch gamma. Transdukcje będą zachodziły w elastycznych, przepuszczalnych dla gazów pojemnikach z tworzywa sztucznego przy użyciu pożywki wolnej od surowicy, uzupełnionej 1% albuminą surowicy ludzkiej i pięcioma rekombinowanymi czynnikami wzrostu (50 ng/ml Flt3-L, 50 ng/ml SCF, 50 ng/ml TPO, 25 ng /ml IL-6 i 5 ng/ml IL-3). Osoby w wieku powyżej 3 lat otrzymają schemat kondycjonujący składający się z fludarabiny i busulfanu, a następnie otrzymają pojedynczą infuzję transdukowanych HSC. Przed chemioterapią i po infuzji komórek tym samym pacjentom zostanie również podany czynnik wzrostu keratynocytów (KGF), znany również jako palifermina. Pacjenci będą monitorowani pod kątem bezpieczeństwa i skuteczności; o tym ostatnim świadczy nowy rozwój autologicznych transdukowanych limfocytów z funkcjonalnym gc. Punkty końcowe badania to (1) wydajna i bezpieczna transdukcja HSC na skalę kliniczną od pacjentów XSCID po BMT; (2) podawanie niemieloablacyjnego schematu kondycjonowania w celu poprawy wszczepienia; (3) podawanie transdukowanych HSC ośmiu osobnikom; (4) podawanie KGF w celu poprawy funkcji grasicy po przeszczepie w celu poprawy rozwoju komórek T; oraz (5) odpowiednia obserwacja leczonych osobników w celu monitorowania dystrybucji sekwencji wektora, ekspresji gc w liniach hematopoetycznych oraz liczby i funkcji limfocytów; a także ogólny stan zdrowia i stan odporności.