Stammzellen-Gentherapie zur Behandlung von schwerer kombinierter X-chromosomaler Immunschwäche (XSCID)

Dies ist eine klinische Studie der Phase I/II zur Ex-vivo-Gentherapie mit hämatopoetischen Stammzellen (HSC) für X-chromosomalen schweren kombinierten Immundefekt (XSCID). XSCID resultiert aus Defekten im IL2RG-Gen, das die gemeinsame Gammakette (gc) kodiert, die von Rezeptoren für Interleukin 2 (IL-2), IL-4, IL-7, IL-9, IL-15 und IL-21 geteilt wird. XSCID-Patienten fehlen im Allgemeinen T-Lymphozyten und NK-Zellen, und ihre B-Lymphozyten bilden keine essentiellen Antikörper. XSCID ist im Säuglingsalter ohne Immunrekonstitution tödlich, beispielsweise durch allogene Knochenmarktransplantation (KMT). Viele transplantierte Patienten erreichen jedoch nur eine teilweise Immunrekonstitution und haben folglich wiederkehrende Infektionen, Autoimmunität und/oder schlechtes Wachstum. Die jüngste erfolgreiche retrovirale Gentherapie anstelle von BMT für Säuglinge mit XSCID zeigt, dass die Ex-vivo-Gentherapie XSCID-Patienten klinischen Nutzen bringen kann.

Wir werden acht ältere XSCID-Patienten (im Alter von 1,5 bis 20 Jahren; mit einem Körpergewicht von mindestens 12 kg) aufnehmen, die eine KMT versucht haben, aber anhaltende T-Lymphozyten- und B-Lymphozyten-Beeinträchtigungen haben, die ihre Lebensqualität beeinträchtigen . Vor der Einschreibung müssen bei diesen Probanden autologe CD34+-HSC durch Behandlung mit Granulozyten-Kolonie-stimulierendem Faktor (G-CSF) mobilisiert, durch Apherese aus dem peripheren Blut gesammelt, immunselektiert und in ausreichender Anzahl kryokonserviert worden sein, um die Aufnahmekriterien zu erfüllen (größer als oder gleich 1,0 x 10(6) CD34+ HSC/kg Körpergewicht). Die HSC-Beschaffung erfolgt gemäß einem separaten, genehmigten und aktiven NIH-Protokoll, 94-I-0073, „Rekrutierung von hämatopoetischen Vorläuferzellen aus peripherem Blut durch Granulozyten-Kolonie-stimulierenden Faktor [G-CSF]“.

Autologe CD34+-HSC werden ex vivo mit dem Gibbon-Affen-Leukämie-Virus (GALV)-Hüllen-pseudotypisierten, replikationsdefekten, murinen Onco-Retrovirus-Vektor MFGS-gc transduziert, der die gemeinsame Gamma-Kette codiert. Die Transduktionen erfolgen in flexiblen, gasdurchlässigen Kunststoffbehältern unter Verwendung von serumfreiem Medium, ergänzt mit 1 % Humanserumalbumin und fünf rekombinanten Wachstumsfaktoren (50 ng/ml Flt3-L, 50 ng/ml SCF, 50 ng/ml TPO, 25 ng /ml IL-6 und 5 ng/ml IL-3). Patienten, die älter als 3 Jahre sind, erhalten ein Konditionierungsschema bestehend aus Fludarabin und Busulfan, dann erhalten sie eine einzelne Infusion mit transduziertem HSC. Vor der Chemotherapie und nach der Infusion der Zellen erhalten die gleichen Patienten auch den Keratinozyten-Wachstumsfaktor (KGF), auch bekannt als Palifermin. Die Probanden werden auf Sicherheit und Wirksamkeit überwacht; Letzteres wird durch die Neuentwicklung von autologen transduzierten Lymphozyten mit funktionellem gc belegt. Studienendpunkte sind (1) eine effiziente und sichere Transduktion von HSC im klinischen Maßstab von XSCID-Patienten nach BMT; (2) Verabreichung eines nicht-myeloablativen Konditionierungsschemas zur Verbesserung der Transplantation; (3) Verabreichung von transduziertem HSC an acht Probanden; (4) Verabreichung von KGF zur Verbesserung der Thymusfunktion nach der Transplantation zur Verbesserung der T-Zellentwicklung; und (5) angemessene Nachsorge der behandelten Patienten, um die Verteilung der Vektorsequenzen, die gc-Expression in hämatopoetischen Abstammungslinien und die Anzahl und Funktion von Lymphozyten zu überwachen; sowie allgemeine Gesundheit und Immunstatus.