Terapia genica con cellule staminali per trattare l'immunodeficienza combinata grave legata all'X (XSCID)

Questo è uno studio clinico di fase I/II della terapia genica ex vivo con cellule staminali ematopoietiche (HSC) per l'immunodeficienza combinata grave legata all'X (XSCID). XSCID deriva da difetti nel gene IL2RG che codifica per la catena gamma comune (gc) condivisa dai recettori per l'interleuchina 2 (IL-2), IL-4, IL-7, IL-9, IL-15 e IL-21. I pazienti XSCID generalmente mancano di linfociti T e cellule NK e i loro linfociti B non riescono a produrre anticorpi essenziali. XSCID è fatale nell'infanzia senza ricostituzione immunitaria, ad esempio mediante trapianto allogenico di midollo osseo (BMT). Tuttavia, molti pazienti trapiantati raggiungono solo una parziale ricostituzione immunitaria e di conseguenza presentano infezioni ricorrenti, autoimmunità e/o scarsa crescita. La recente terapia genica retrovirale di successo al posto della BMT per i neonati con XSCID indica che la terapia genica ex vivo può fornire benefici clinici ai pazienti con XSCID.

Arruolaremo otto pazienti XSCID più anziani (1,5-20 anni; maggiore o uguale a 12 kg di peso corporeo), che hanno tentato il trapianto di midollo osseo, ma che presentano alterazioni persistenti dei linfociti T e dei linfociti B che compromettono la loro qualità di vita . Prima dell'arruolamento, questi soggetti avranno cellule CD34+ autologhe mobilizzate mediante trattamento con fattore stimolante le colonie di granulociti (G-CSF), prelevate dal sangue periferico mediante aferesi, immuni selezionate e criopreservate in numero sufficiente per raggiungere i criteri di ingresso (maggiori o uguali a 1,0 x 10(6) CD34+ HSC/kg di peso corporeo). L'approvvigionamento di HSC sarà condotto nell'ambito di un protocollo NIH separato, approvato e attivo, 94-I-0073, "Reclutamento di progenitori ematopoietici del sangue periferico mediante fattore stimolante le colonie di granulociti [G-CSF]".

Le HSC CD34+ autologhe saranno trasdotte ex vivo con il vettore di onco-retrovirus murino, MFGS-gc, pseudotipato sull'envelope, difettoso nella replicazione, del gibbon ape leukemia virus (GALV) che codifica per la catena gamma comune. Le trasduzioni avverranno in contenitori di plastica flessibili permeabili ai gas utilizzando terreno privo di siero integrato con 1% di albumina sierica umana e cinque fattori di crescita ricombinanti (50 ng/mL Flt3-L, 50 ng/mL SCF, 50 ng/mL TPO, 25 ng /mL IL-6 e 5 ng/mL IL-3). I soggetti di età superiore ai 3 anni riceveranno un regime di condizionamento costituito da Fludarabina e Busulfan, quindi riceveranno una singola infusione di HSC trasdotte. Prima della chemioterapia, e dopo l'infusione delle cellule, agli stessi pazienti verrà somministrato anche il fattore di crescita dei cheratinociti (KGF), noto anche come palifermin. I soggetti saranno monitorati per sicurezza ed efficacia; quest'ultimo evidenziato dal nuovo sviluppo di linfociti trasdotti autologhi con gc funzionale. Gli endpoint dello studio sono (1) trasduzione su scala clinica efficiente e sicura di HSC da soggetti XSCID post-BMT; (2) somministrazione di un regime di condizionamento non mieloablativo per migliorare l'attecchimento; (3) somministrazione di HSC trasdotte a otto soggetti; (4) somministrazione di KGF per migliorare la funzione timica dopo il trapianto per migliorare lo sviluppo delle cellule T; e (5) follow-up appropriato dei soggetti trattati per monitorare la distribuzione della sequenza vettoriale, l'espressione di gc nei lignaggi ematopoietici e il numero e la funzione dei linfociti; così come la salute generale e lo stato immunitario.