Thérapie génique par cellules souches pour traiter le déficit immunitaire combiné sévère lié à l'X (XSCID)

Il s'agit d'un essai clinique de phase I/II sur la thérapie génique ex vivo par cellules souches hématopoïétiques (CSH) pour le déficit immunitaire combiné sévère lié à l'X (XSCID). XSCID résulte de défauts du gène IL2RG codant pour la chaîne gamma commune (gc) partagée par les récepteurs de l'interleukine 2 (IL-2), IL-4, IL-7, IL-9, IL-15 et IL-21. Les patients XSCID manquent généralement de lymphocytes T et de cellules NK, et leurs lymphocytes B ne produisent pas d'anticorps essentiels. XSCID est mortel dans la petite enfance sans reconstitution immunitaire, comme par une greffe allogénique de moelle osseuse (BMT). Cependant, de nombreux patients transplantés n'obtiennent qu'une reconstitution immunitaire partielle et, par conséquent, ont des infections récurrentes, une auto-immunité et/ou une mauvaise croissance. La récente thérapie génique rétrovirale réussie au lieu de la BMT pour les nourrissons atteints de XSCID indique que la thérapie génique ex vivo peut apporter un bénéfice clinique aux patients XSCID.

Nous allons recruter huit patients XSCID plus âgés (1,5 à 20 ans ; poids corporel supérieur ou égal à 12 kg), qui ont tenté une BMT, mais qui présentent des déficiences persistantes des lymphocytes T et des lymphocytes B qui compromettent leur qualité de vie . Avant l'inscription, ces sujets auront eu des CSH autologues CD34 + mobilisées par un traitement avec le facteur de stimulation des colonies de granulocytes (G-CSF), prélevées à partir de sang périphérique par aphérèse, immunosélectionnées et cryoconservées en nombre suffisant pour atteindre les critères d'entrée (supérieur ou égal à 1,0 x 10(6) CD34+ HSC/kg de poids corporel). L'approvisionnement en HSC sera effectué selon un protocole NIH distinct, approuvé et actif, 94-I-0073, «Recrutement de progéniteurs hématopoïétiques du sang périphérique par le facteur de stimulation des colonies de granulocytes [G-CSF]».

Les CSH CD34+ autologues seront transduites ex vivo avec le vecteur d'onco-rétrovirus murin pseudotypé à enveloppe pseudotypée par le virus de la leucémie du singe gibbon (GALV), MFGS-gc, qui code pour la chaîne gamma commune. Les transductions se produiront dans des récipients en plastique flexibles perméables aux gaz en utilisant un milieu sans sérum additionné de 1 % d'albumine sérique humaine et de cinq facteurs de croissance recombinants (50 ng/mL Flt3-L, 50 ng/mL SCF, 50 ng/mL TPO, 25 ng /mL IL-6 et 5 ng/mL IL-3). Les sujets âgés de plus de 3 ans recevront un régime de conditionnement composé de fludarabine et de busulfan, puis ils recevront une seule perfusion de HSC transduite. Avant la chimiothérapie et après la perfusion des cellules, les mêmes patients recevront également le facteur de croissance des kératinocytes (KGF), également connu sous le nom de palifermine. Les sujets seront surveillés pour la sécurité et l'efficacité ; ce dernier mis en évidence par un nouveau développement de lymphocytes transduits autologues avec gc fonctionnel. Les critères d'évaluation de l'étude sont (1) une transduction efficace et sûre à l'échelle clinique des CSH à partir de sujets post-BMT XSCID ; (2) l'administration d'un régime de conditionnement non myéloablatif pour améliorer la prise de greffe ; (3) administration de HSC transduite à huit sujets ; (4) administration de KGF pour améliorer la fonction thymique après la greffe afin d'améliorer le développement des lymphocytes T ; et (5) un suivi approprié des sujets traités pour surveiller la distribution des séquences vectorielles, l'expression de gc dans les lignées hématopoïétiques, ainsi que le nombre et la fonction des lymphocytes ; ainsi que l'état de santé général et l'état immunitaire.