Генная терапия стволовыми клетками для лечения Х-сцепленного тяжелого комбинированного иммунодефицита (XSCID)

Это клиническое испытание фазы I/II генной терапии гемопоэтическими стволовыми клетками (HSC) ex vivo для Х-сцепленного тяжелого комбинированного иммунодефицита (XSCID). XSCID возникает в результате дефектов в гене IL2RG, кодирующем общую гамма-цепь (gc), общую для рецепторов интерлейкина 2 (IL-2), IL-4, IL-7, IL-9, IL-15 и IL-21. У пациентов с XSCID обычно отсутствуют Т-лимфоциты и NK-клетки, а их В-лимфоциты не могут вырабатывать необходимые антитела. XSCID приводит к летальному исходу в младенчестве без восстановления иммунитета, например, при аллогенной трансплантации костного мозга (ТКМ). Однако многие пациенты после трансплантации достигают лишь частичного восстановления иммунитета и, следовательно, имеют рецидивирующие инфекции, аутоиммунитет и/или плохой рост. Недавняя успешная ретровирусная генная терапия вместо BMT для младенцев с XSCID указывает на то, что генная терапия ex vivo может принести клиническую пользу пациентам с XSCID.

Мы зарегистрируем восемь пожилых пациентов с XSCID (1,5–20 лет; масса тела больше или равна 12 кг), у которых была попытка ТКМ, но у которых есть стойкие нарушения Т-лимфоцитов и В-лимфоцитов, которые ухудшают качество их жизни. . Перед зачислением у этих субъектов должны быть аутологичные CD34+ HSC, мобилизованные путем обработки гранулоцитарным колониестимулирующим фактором (G-CSF), собранные из периферической крови с помощью афереза, иммунно-отобранные и криоконсервированные в количествах, достаточных для достижения критериев включения (больше или равных 1,0 x 10(6) CD34+ HSC/кг массы тела). Закупка HSC будет проводиться в соответствии с отдельным утвержденным и активным протоколом NIH, 94-I-0073, «Рекрутирование гемопоэтических предшественников периферической крови с помощью гранулоцитарного колониестимулирующего фактора [G-CSF]».

Аутологичные CD34+ HSC будут трансдуцированы ex vivo с помощью вируса лейкоза гиббоновых обезьян (GALV), псевдотипированного, дефектного по репликации мышиного онко-ретровирусного вектора, MFGS-gc, который кодирует общую гамма-цепь. Трансдукция будет происходить в гибких газопроницаемых пластиковых контейнерах с использованием бессывороточной среды с добавлением 1% сывороточного альбумина человека и пяти рекомбинантных факторов роста (50 нг/мл Flt3-L, 50 нг/мл SCF, 50 нг/мл TPO, 25 нг /мл ИЛ-6 и 5 нг/мл ИЛ-3). Субъектам старше 3 лет будет назначен режим кондиционирования, состоящий из флударабина и бусульфана, после чего они получат однократное вливание трансдуцированных HSC. Перед химиотерапией и после введения клеток тем же пациентам также вводят фактор роста кератиноцитов (KGF), также известный как палифермин. Субъекты будут находиться под наблюдением на предмет безопасности и эффективности; о последнем свидетельствовало новое развитие аутологичных трансдуцированных лимфоцитов с функциональным gc. Конечными точками исследования являются (1) эффективная и безопасная трансдукция HSC в клиническом масштабе от субъектов XSCID после BMT; (2) назначение немиелоаблативного режима кондиционирования для улучшения приживления трансплантата; (3) введение трансдуцированных HSC восьми субъектам; (4) введение KGF для улучшения функции тимуса после трансплантации для улучшения развития Т-клеток; и (5) соответствующее последующее наблюдение за субъектами, получающими лечение, для мониторинга распределения векторной последовательности, экспрессии gc в гемопоэтических линиях, а также количества и функции лимфоцитов; а также общее состояние здоровья и иммунный статус.