Metoda ISET (izolacja na podstawie wielkości nabłonkowych komórek nowotworowych)

Rak płuc jest najbardziej rozpowszechnionym nowotworem i główną przyczyną śmiertelności związanej z nowotworami na całym świecie. Pomimo niedawnych postępów w leczeniu resekcji raka płuca (tj. stosowania terapii adjuwantowej) i skuteczniejszych metod leczenia guzów przerzutowych (tj. Klasyfikacja histologiczna guzów płuca rozróżnia raki drobnokomórkowe (SCLC) i niedrobnokomórkowe (NSCLC). Większość NSCLC wykazuje trzy podtypy histologiczne: gruczolakorak, rak płaskonabłonkowy i rak wielkokomórkowy. Rokowanie w przypadku tych trzech podtypów NSCLC jest dość podobne. Pod tym względem rozwój i walidacja nowych biomarkerów prognostycznych/predykcyjnych z tkanek nowotworowych i płynów biologicznych jest jedną z bardziej obiecujących dziedzin translacyjnych badań nad rakiem. Jednak wpływ kliniczny nowych biomarkerów musi zostać dokładnie zweryfikowany, w tym w przypadku NSCLC. Podczas gdy stopień zaawansowania pTNM jest obecnie jedynym zatwierdzonym czynnikiem prognostycznym stosowanym w obserwacji i leczeniu pacjentów z NSCLC, u 25% do 50% pacjentów z NSCLC we wczesnym stadium I występuje nawrót nowotworu po rozległej resekcji guza, co wskazuje na pilną potrzebę bardziej czułych markerów prognostycznych. Ponadto doniesiono, że obecność utajonej choroby przerzutowej koreluje z nawrotem choroby u pacjentów z NSCLC w stadium I. Obecnie istnieje pokaźna liczba dowodów na to, że przerzuty mogą powstawać z krążących komórek nowotworowych (CTC) rozsianych we krwi przed lub w trakcie operacji. Zatem czułe i swoiste wykrywanie CTC we krwi jest uważane za potencjalnie istotny biomarker prognostyczny dla pacjentów z NSCLC. Rzeczywiście, głównym celem przedoperacyjnego wykrywania CTC jest identyfikacja pacjentów z wysokim ryzykiem nawrotu po operacji, w celu zastosowania bardziej dostosowanej strategii terapeutycznej. Pomimo kilku badań dotyczących wykrywania CTC, aspekty metodologiczne dotyczące czułości, swoistości i odtwarzalności uniemożliwiły jasną ocenę ich wpływu klinicznego. Podczas gdy RT-PCR i metody immunologiczne mogą być bardzo czułe, specyficzność pozostaje krytycznym problemem dla tych podejść, ponieważ obecnie nie jest znany żaden transkrypt ani antygen specyficznie rozpoznający komórki nowotworowe z guzów litych. W tym kontekście analiza cytopatologiczna krążących komórek niehematologicznych (CNHC), pochodzenia nabłonkowego (CEC) i śródbłonkowego (CEN-C), izolowanych zgodnie z ich wielkością (ISET, Isolation by Size of Epithelial Tumor cells) jest uważana za obiecujące podejście , ponieważ wzbogacenie CNHC jest bardzo czułe, a morfologia komórek nie jest uszkodzona, co pozwala na zastosowanie klasycznych kryteriów cytopatologicznych do identyfikacji komórek nowotworowych. W związku z tym wcześniej informowano, że technologia ISET umożliwia identyfikację CTC u pacjentów z nowotworami wątroby i piersi. Jednak metoda ISET nigdy nie była stosowana do wykrywania CTC u pacjentów z NSCLC. Celem pracy jest określenie potencjału diagnostycznego metody ISET do przedoperacyjnego wykrywania CTC u chorych na NSCLC. W tym celu grupa 10 cytologów ustaliła kryteria cytomorfologiczne, aby podzielić CNHC na 3 grupy: i) CNHC o cechach złośliwych (CNHC-MF), ii) CNHC o niepewnych cechach (CNHC-UMF) oraz iii) CNHC z cechami łagodnymi (CNHC-BF). Obecność i liczbę tych krążących komórek koreluje się następnie z pTNM, podtypem histologicznym i odsetkiem komórek nowotworowych w guzach pierwotnych.