方法 ISET（按上皮肿瘤细胞大小进行绝缘）

肺癌是最普遍的肿瘤，也是全世界肿瘤相关死亡率的主要原因。 尽管最近在切除肺癌的管理（即使用辅助治疗）和更有效的转移性肿瘤治疗（即分子靶向药物）方面取得了进展，但肺癌患者的治愈率仍然很低（. 肺肿瘤的组织学分类区分小细胞肺癌 (SCLC) 和非小细胞肺癌 (NSCLC)。 大多数 NSCLC 显示三种组织学亚型：腺癌、鳞状细胞癌和大细胞癌。 这三种 NSCLC 亚型的预后非常相似。 在这方面，从肿瘤组织和生物体液中开发和验证新的预后/预测生物标志物是转化癌症研究中更有希望的领域之一。 然而，必须仔细验证新生物标志物的临床影响，包括对 NSCLC 的影响。 虽然 pTNM 分期是目前用于 NSCLC 患者随访和治疗的唯一经过验证的预后因素，但 25% 至 50% 的早期 I NSCLC 患者在广泛肿瘤切除后显示肿瘤复发，表明迫切需要更敏感的预后标志物。 此外，据报道，隐匿性转移性疾病的存在与 I 期 NSCLC 患者的疾病复发相关。 现在有大量证据表明，在术前或术中扩散到血液中的循环肿瘤细胞 (CTC) 可能会导致转移。 因此，血液中 CTC 的灵敏和特异性检测被认为是 NSCLC 患者潜在相关的预测性生物标志物。 事实上，CTC 术前检测的主要目标是识别术后复发风险高的患者，以便实施更适应的治疗策略。 尽管有几项关于 CTC 检测的研究报告，但有关灵敏度、特异性和可重复性的方法学方面阻碍了对其临床影响的明确评估。 虽然 RT-PCR 和免疫介导的方法可能非常敏感，但特异性仍然是这些方法的关键问题，因为目前还不知道特异性识别来自实体瘤的肿瘤细胞的转录物或抗原。 在这种情况下，循环非血液细胞 (CNHC)、上皮细胞 (CEC) 和内皮细胞 (CEN-C) 来源的细胞病理学分析根据其大小进行分离（ISET，按上皮肿瘤细胞大小进行分离）被认为是一种有前途的方法, 由于 CNHC 富集非常敏感, 细胞形态未受损, 允许应用经典的细胞病理学标准来识别肿瘤细胞。 在这方面，之前曾报道过 ISET 技术可以识别肝脏和乳腺肿瘤患者的 CTC。 然而，ISET 方法从未用于检测 NSCLC 患者的 CTC。 本研究的目的是确定 ISET 方法对 NSCLC 患者术前检测 CTC 的诊断潜力。 为此，一组 10 名细胞学家制定了细胞形态学标准，将 CNHC 分为 3 组：i) 具有恶性特征的 CNHC (CNHC-MF)，ii) 具有不确定特征的 CNHC (CNHC-UMF)，以及 iii) CNHC具有良性特征（CNHC-BF）。 然后将这些循环细胞的存在和数量与 pTNM、组织学亚型和肿瘤细胞进入原发性肿瘤的百分比相关联。