Bezpieczeństwo, toksyczność i MTD jednego dożylnego wstrzyknięcia IV CTL dawcy specyficzne dla CMV i adenowirusa (ACT-CAT)

Planujemy wyhodować limfocyty T z krwi pępowinowej w laboratorium w specjalny sposób, aby sprawdzić, czy mogą one pomóc w zapobieganiu lub leczeniu zakażeń tymi wirusami u pacjentów po przeszczepach. Ta terapia ze specjalnie wyszkolonymi limfocytami T (zwanymi CTL) wykazała działanie przeciwko tym wirusom, gdy komórki są wytwarzane z krwi dawcy i podawane pacjentom otrzymującym przeszczep szpiku kostnego lub komórek macierzystych krwi. Chcemy dowiedzieć się, czy możemy wykorzystać CTL, które zrobimy z krwi pępowinowej, do zapobiegania lub leczenia infekcji wirusowych, gdy odporność pacjenta jest osłabiona po przeszczepie krwi pępowinowej. Komórki te nazywane są „CTL specyficznymi dla CMV/AdV”, ponieważ mogą atakować te dwa wirusy.

Lekarz znajdzie już jednostkę krwi pępowinowej odpowiednią do przeszczepu pacjenta. Jeśli pacjent wyrazi zgodę na to badanie, pobierzemy 5-10 ml (1-2 łyżeczki) z tej jednostki krwi pępowinowej przed przeszczepem. Pobierzemy tylko tyle krwi pępowinowej, ile jest dostępne w specjalnie zamrożonej małej frakcji jednostki krwi pępowinowej.

Użyjemy tej krwi pępowinowej do wyhodowania limfocytów T w laboratorium. Z tej krwi najpierw wyhodujemy specjalny rodzaj komórek zwanych komórkami dendrytycznymi i umieścimy w tych komórkach dendrytycznych specjalnie wyprodukowanego ludzkiego wirusa (adenowirusa), który przenosi gen CMVpp65. Komórki dendrytyczne zostaną napromieniowane, aby nie mogły rosnąć, a następnie wykorzystane do stymulacji komórek T. Ta stymulacja nauczy limfocyty T zabijania komórek z CMV i adenowirusem na ich powierzchni.

Następnie będziemy hodować dużą liczbę tych CTL specyficznych dla AdV/CMV poprzez większą stymulację komórkami B zakażonymi EBV (które otrzymamy z krwi pępowinowej poprzez zakażenie ich EBV w laboratorium). Umieścimy również specjalnego wirusa w tych komórkach B, aby one również miały AdV/CMV. Ponownie, te komórki B zostaną poddane działaniu promieniowania, aby nie mogły rosnąć. Gdy wytworzymy wystarczającą liczbę limfocytów T, przetestujemy je, aby upewnić się, że zabijają komórki zakażone adenowirusem i CMV. Aby upewnić się, że te komórki nie zaatakują własnych zdrowych tkanek pacjenta, testujemy te komórki z niektórymi komórkami krwi, które będziemy hodować w laboratorium. Zostaną one użyte do sprawdzenia, czy AdV/CMV CTL może je zaatakować. Alternatywnie możemy pobrać krew od krewnego pierwszego stopnia lub pobrać od pacjenta mały kawałek skóry, aby wyhodować komórki skóry, które można również wykorzystać do sprawdzenia, czy CTL AdV/CMV mogą je zaatakować. Biopsję skóry można wykonać w tym samym czasie, co inną procedurę, taką jak biopsja szpiku kostnego.

Komórki AdV/CMV CTL dawcy pępowinowego zostaną rozmrożone i wstrzyknięte do linii IV przez okres do 10 minut. Pacjenci mogą otrzymać premedykację Benadrylem i Tylenolem. Jeśli pacjent wyrazi na to zgodę i jeśli czuje się wystarczająco dobrze, jedna dawka CTL zostanie podana w 30. dniu po przeszczepie lub później. Jeśli pacjent nie ma zakażenia AdV/CMV, nie będziemy mu podawać leków przeciwwirusowych podczas tego badania, ale będziemy ściśle monitorować pacjenta w celu wykrycia zakażenia AdV/CMV. Jeśli pacjent ma infekcję AdV/CMV przed infuzją CTL, podczas tego badania można go również leczyć lekami przeciwwirusowymi. Będziemy ściśle monitorować pacjentów pod kątem zakażenia AdV/CMV, pobierając krew i ewentualnie mocz oraz kał i badając ich pod kątem AdV/CMV.