Monocyte Chemotaktic Protein-1 (MCP-1) Ekspresja monocytów w celu przewidywania porodu przedwczesnego: badanie PhenoMAP (PHENOMAP)

Zagrożenie porodem przedwczesnym (PTL) jest pierwszą przyczyną hospitalizacji w przebiegu ciąży. Jej diagnostyka opiera się na badaniu klinicznym, którego dodatnia wartość predykcyjna wynosi około 40%. Rola białka chemotaktycznego monocytów-1 (MCP-1) w dostarczaniu została zasugerowana przez jego wydzielanie do płynu owodniowego podczas porodu oraz wzrost ekspresji jego przekaźników RNA we krwi obwodowej matki. Wykazaliśmy również, że odsetek monocytów wykazujących ekspresję MCP-1 jest wyższy u kobiet, które rodziły drogą pochwową w porównaniu z tymi, które rodziły przez cesarskie cięcie przed rozpoczęciem porodu.

CELE: Pierwotne Poszukiwanie związku między odpowiednimi proporcjami krążących matczynych subpopulacji monocytów i subpopulacji limfocytów a prawdziwym początkiem PTL charakteryzującym się porodem występującym w ciągu 7 dni po przyjęciu. Drugorzędne: (1) porównać wartości predykcyjne tych nowych markerów z obecnie stosowanymi, np. oznaczenie ilościowe fibronektyny płodowej oraz ocena długości i usunięcia szyjki macicy, (2) porównanie odpowiednich proporcji monocytów i subpopulacji limfocytów we krwi matki i błonach płodowych, (3) ustalenie, czy istnieje korelacja między markerami aktywacji wyrażanymi przez matczyne populacje monocytów i subpopulacji limfocytów oraz wyniki noworodków wcześniaków.

MATERIAŁ I METODY: 200 pacjentek z ciążą pojedynczą między 24 a 34 tygodniem z brakiem miesiączki i powikłanym PTL zostanie prospektywnie włączonych do oddziałów położniczych w Galway (Irlandia) iw Dijon przy wsparciu sieci perinatalnej w Burgundii. Próbka krwi 2 x 5 ml zostanie pobrana przy przyjęciu w D1, D2, D4 i D6 w przypadku kobiet, które nie rodziły w ciągu pierwszych 7 dni; na koniec po wypisie zostanie pobrana kolejna próbka krwi. Po porodzie zostaną pobrane błony płodowe w celu scharakteryzowania i porównania różnych subpopulacji monocytów i limfocytów we krwi matki. Charakterystyka i badanie poziomu aktywacji komórek krwi i błony płodowej zostanie przeprowadzone techniką cytometrii przepływowej z użyciem odpowiednich markerów. Głównymi kryteriami oceny będzie odsetek monocytów wykazujących pozytywną ekspresję MCP-1 dla wszystkich trzech subpopulacji monocytów („zapalnych”, „mieszkańców lub patrolujących” i „pośrednich”, zgodnie z markerami CD14, CD16, CCR2 i MCP-1. Subpopulacje limfocytów będą oceniane przy użyciu następujących markerów: CD45, CD3, CD4, CD8 (limfocyty T), HLA-DR (aktywowane limfocyty T), CD19 (limfocyty B), CD16/CD56 (komórki NK), wewnątrzkomórkowy IFN-gamma ( limfocyty Th1), wewnątrzkomórkowa IL-4 (limfocyty Th-2), wewnątrzkomórkowa IL-17 i CCR6 (limfocyty Th17), CD4, CD25, Foxp3 i CD127 (Treg). Jednoczynnikowa analiza statystyczna danych ilościowych zostanie przeprowadzona za pomocą testu Manna i Witneya lub ANOVA, po weryfikacji warunków zastosowania. Porównania wartości procentowych zostaną wykonane przy użyciu testu chi-kwadrat Pearsona i dokładnego testu Fishera, odpowiednio. Analiza wielowymiarowa zostanie przeprowadzona przy użyciu analizy malejącej krokowo.

WYMIAR TRANSLACYJNY: Charakterystyka różnych subpopulacji monocytów i limfocytów we krwi matki iw błonach płodowych może stanowić „sygnaturę immunologiczną” porodu, a tym samym potwierdzać przydatność markera prognostycznego dla klinicystów.

OCZEKIWANE WYNIKI I PERSPEKTYWY: Badanie różnych subpopulacji monocytów i limfocytów we krwi matki pozwoli lepiej scharakteryzować mechanizmy immunologiczne zachodzące na początku porodu przedwczesnego oraz zidentyfikować markery prognostyczne porodu przedwczesnego, ich prospektywną walidację w celu optymalizacji kierownictwo PTL