Monociti chemotattici Protein-1 (MCP-1) che esprimono monociti per predire il parto pretermine: Studio PhenoMAP (PHENOMAP)

La minaccia di parto pretermine (PTL) è la prima causa di ricovero nel corso della gravidanza. La sua diagnosi si basa sull'esame clinico con un valore predittivo positivo di circa il 40%. Il ruolo della proteina-1 chemiotattica dei monociti (MCP-1) nel parto è stato suggerito dalla sua secrezione nel liquido amniotico durante il travaglio e dall'aumento dell'espressione dei suoi messaggeri di RNA nel sangue materno periferico. Abbiamo anche dimostrato che la percentuale di monociti che esprimono MCP-1 è più alta nelle donne con parto vaginale rispetto a quelle con parto cesareo prima dell'inizio del travaglio.

OBIETTIVI: Primario Cercare un legame tra le rispettive proporzioni delle sottopopolazioni materne di monociti e linfociti circolanti e la vera insorgenza di PTL caratterizzata dal parto che si verifica entro 7 giorni dopo il ricovero. Secondario: per (1) confrontare i valori predittivi di questi nuovi marcatori con quelli attualmente utilizzati, ad es. quantificazione della fibronectina fetale e valutazione della lunghezza e dell'eliminazione del collo dell'utero, (2) confrontare le rispettive proporzioni di monociti e sottopopolazioni linfocitarie nel sangue materno e nelle membrane fetali, (3) determinare se esiste una correlazione tra i marcatori di attivazione espressi dalle sottopopolazioni materne di monociti e linfociti e gli esiti neonatali dei neonati prematuri.

MATERIALI E METODI: 200 pazienti con gravidanza singola tra le 24 e le 34 settimane di amenorrea e PTL complicato, saranno inserite prospetticamente nei reparti di maternità di Galway (Irlanda) e di Digione con il supporto della rete perinatale della Borgogna. Un campione di sangue 2X5ml sarà raccolto al momento del ricovero, a D1, D2, D4 e D6 per le donne che non hanno partorito entro i primi 7 giorni; infine, alla dimissione verrà prelevato un altro campione di sangue. Dopo il parto, le membrane fetali saranno raccolte per caratterizzare e confrontare le varie sottopopolazioni di monociti e linfociti nel sangue materno. La caratterizzazione e lo studio del livello di attivazione delle cellule del sangue e della membrana fetale sarà effettuata mediante tecnica di citometria a flusso con opportuni marcatori. Il principale criterio di giudizio sarà la percentuale di monociti che esprimono positivamente MCP-1 per tutte e tre le sottopopolazioni di monociti ("infiammatori", "residenti o pattugliatori" e "intermedi", secondo i marcatori CD14, CD16, CCR2 e MCP-1. Le sottopopolazioni linfocitarie saranno valutate utilizzando i seguenti marcatori: CD45, CD3, CD4, CD8 (linfociti T), HLA-DR (linfociti T attivati), CD19 (linfociti B), CD16/CD56 (cellule NK), IFN-gamma intracellulare ( linfociti Th1), IL-4 intracellulare (linfociti Th-2), IL-17 intracellulare e CCR6 (linfociti Th17), CD4, CD25, Foxp3 e CD127 (Tregs). L'analisi statistica univariata dei dati quantitativi sarà effettuata mediante il test di Mann e Witney o ANOVA, previa verifica delle condizioni applicative. I confronti delle percentuali saranno effettuati utilizzando i test di Pearson Chi-quadro e il test esatto di Fisher, a seconda dei casi. L'analisi multivariata verrà eseguita utilizzando un'analisi discendente graduale.

DIMENSIONE TRASLAZIONALE: La caratterizzazione delle varie sottopopolazioni di monociti e linfociti nel sangue materno e nelle membrane fetali potrebbe costituire una "firma immunologica" del travaglio e quindi convalidare la rilevanza di un marker predittivo per i clinici.

RISULTATI ATTESI E PROSPETTIVE: Lo studio delle varie sottopopolazioni di monociti e linfociti nel sangue materno consentirà di meglio caratterizzare i meccanismi immunologici che intervengono all'inizio del travaglio prematuro e di identificare marcatori predittivi del parto pretermine, da validare prospetticamente al fine di ottimizzare la gestione del PTL