Proteína Quimiotática de Monócitos-1 (MCP-1) Expressando Monócitos para Prever o Parto Prematuro: Estudo PhenoMAP (PHENOMAP)

A ameaça de trabalho de parto prematuro (PTL) é a primeira causa de hospitalização no decorrer da gravidez. Seu diagnóstico é baseado no exame clínico com valor preditivo positivo de cerca de 40%. O papel da proteína quimiotática-1 dos monócitos (MCP-1) no parto tem sido sugerido por sua secreção no líquido amniótico durante o trabalho de parto e pelo aumento da expressão de seus mensageiros de RNA no sangue periférico materno. Também mostramos que a proporção de monócitos que expressam MCP-1 é maior em mulheres com parto vaginal em comparação com aquelas com parto cesáreo antes do início do trabalho de parto.

OBJETIVOS: Primário Para buscar a ligação entre as respectivas proporções de monócitos maternos circulantes e subpopulações de linfócitos e o verdadeiro início de PTL caracterizado pelo parto ocorrendo dentro de 7 dias após a internação. Secundário: para (1) comparar os valores preditivos desses novos marcadores com os usados ​​atualmente, por exemplo, quantificação de fibronectina fetal e avaliação do comprimento e apagamento cervical, (2) Comparar as respectivas proporções de monócitos e subpopulações de linfócitos no sangue materno e nas membranas fetais, (3) determinar se existe uma correlação entre os marcadores de ativação expressos pelas subpopulações de monócitos e linfócitos maternos e os resultados neonatais de prematuros.

MATERIAL E MÉTODOS: 200 pacientes com gestação única entre 24 e 34 semanas de amenorréia e PTL complicada serão prospectivamente incluídas nas maternidades de Galway (Irlanda) e de Dijon com o apoio da rede perinatal da Borgonha. Uma amostra de sangue de 2X5ml será coletada na admissão, em D1, D2, D4 e D6 para mulheres que não pariram nos primeiros 7 dias; finalmente, outra amostra de sangue será coletada na alta. Após o parto, as membranas fetais serão coletadas para caracterizar e comparar as várias subpopulações de monócitos e linfócitos no sangue materno. A caracterização e o estudo do nível de ativação das células sanguíneas e da membrana fetal serão realizados por meio da técnica de citometria de fluxo com marcadores adequados. O principal critério de julgamento será a porcentagem de monócitos expressando MCP-1 positivamente para todas as três subpopulações de monócitos ("inflamatórios", "residentes ou patrulheiros" e "intermediários", de acordo com os marcadores CD14, CD16, CCR2 e MCP-1. As subpopulações de linfócitos serão avaliadas usando os seguintes marcadores: CD45, CD3, CD4, CD8 (linfócitos T), HLA-DR (linfócitos T ativados), CD19 (linfócitos B), CD16/CD56 (células NK), IFN-gama intracelular ( linfócitos Th1), IL-4 intracelular (linfócitos Th-2), IL-17 intracelular e CCR6 (linfócitos Th17), CD4, CD25, Foxp3 e CD127 (Tregs). A análise estatística univariada dos dados quantitativos será realizada por meio do teste de Mann e Witney ou ANOVA, após verificação das condições de aplicação. As comparações de porcentagens serão feitas por meio dos testes qui-quadrado de Pearson e exato de Fisher, conforme o caso. A análise multivariada será realizada por meio de uma análise descendente passo a passo.

DIMENSÃO TRANSLACIONAL: A caracterização das várias subpopulações de monócitos e linfócitos no sangue materno e nas membranas fetais pode constituir uma "assinatura imunológica" do trabalho de parto e, portanto, validar a relevância de um marcador preditivo para os médicos.

RESULTADOS ESPERADOS E PERSPECTIVAS: O estudo das várias subpopulações de monócitos e linfócitos no sangue materno permitirá melhor caracterizar os mecanismos imunológicos que ocorrem no início do trabalho de parto prematuro e identificar marcadores preditivos do parto prematuro, validar prospectivamente para otimizar a gestão do PTL