Zastosowanie hodowli komórek macierzystych rogówki u pacjentów z niewydolnością komórek macierzystych rogówki

Materiały i metody:

1. Wybrani zostaną pacjenci cierpiący na jednostronną niewydolność komórek macierzystych rąbka. Upewnij się, że ci wolontariusze rozumieją korzyści i czynniki ryzyka związane z operacją.
2. Przygotuj ludzką błonę owodniową i hoduj ją w temperaturze 37°C, 5% CO2, 95% powietrza pokojowego.
3. Miesiąc przed przeszczepem pobrać 1-2 mm2 tkanki rąbka zdrowego oka i posiać tkankę rąbka na błonie owodniowej z 1,5 ml uzupełniającej hormonalnej pożywki nabłonkowej (w 5% cielęcej surowicy płodowej)
4. Kontynuuj hodowlę komórek w zmodyfikowanej przez Dulbecco pożywce Eagle'a/Ham's F12 (stosunek 1:1), z dodatkiem 5% dimetylosulfotlenku, 2 mg/ml ludzkiego naskórkowego czynnika wzrostu, 5 μg/ml insuliny, 0,5 μg/ml hydrokortyzonu, 50 μg/ml ml gentamycyny, 1,25 ug/ml amfoterycyny B, 5% autosurowicy. Dwa do trzech tygodni później przeszczep zostanie przeprowadzony, gdy komórki osiągną 2-3 cm2
5. Usunąć nieprawidłową tkankę powierzchniową na uszkodzonej rogówce, przeszczepić błonę owodniową z hodowanymi komórkami macierzystymi rąbka na obnażoną rogówkę. Po operacji zakryj soczewką kontaktową i zastosuj miejscowe antybiotyki i sterydy.
6. Po operacji należy obserwować pacjentów przez tydzień. Po wypisie należy obserwować pacjentów tydzień, dwa tygodnie, miesiąc, dwa miesiące, trzy miesiące, sześć miesięcy i rok później.
7. Podczas wizyt kontrolnych wykonywane będą zdjęcia i rejestrowany stopień regeneracji nabłonka rogówki, ostrość wzroku oraz powikłania.
8. Badacze planują zebrać 20 pacjentów od 1 lipca 2007 do 30 czerwca 2010