La aplicación de células madre de córnea cultivadas en pacientes que sufren de insuficiencia de células madre de la córnea

Materiales y métodos:

1. Se elegirán pacientes que padezcan insuficiencia de células madre limbares unilateral. Asegúrese de que esos voluntarios comprendan los beneficios y los factores de riesgo de la operación.
2. Prepare la membrana amniótica humana y cultive la membrana a 37 °C, 5 % de CO2, 95 % de aire ambiente.
3. Un mes antes del trasplante, tome 1-2 mm2 de tejido limbal del ojo sano y cultive el tejido limbal en la membrana amniótica con 1,5 ml de medio epitelial hormonal suplementario (en suero de ternera fetal al 5 %)
4. Continúe cultivando las células en medio de Eagle modificado por Dulbecco/F12 de Ham (proporción 1:1), adicionado con sulfóxido de dimetilo al 5 %, factor de crecimiento epidérmico humano 2 mg/ml, insulina 5 ug/ml, hidrocortisona 0,5 ug/ml, 50 ug/ ml de gentamicina, 1,25 ug/ml de anfotericina B, 5% de autosuero。Dos o tres semanas después, el trasplante se realizará cuando las células alcancen los 2-3 cm2
5. Retire el tejido superficial anormal en la córnea lesionada, trasplante la membrana amniótica con células madre limbares cultivadas en la córnea denudada. Cubra con lentes de contacto después de la operación y aplique antibióticos y esteroides tópicos.
6. Después de la operación, observe a los pacientes durante una semana. Después del alta, haga un seguimiento de los pacientes una semana, dos semanas, un mes, dos meses, tres meses, seis meses y un año después.
7. Se tomarán fotografías y se registrará el grado de regeneración del epitelio corneal, la agudeza visual y las complicaciones durante las visitas de seguimiento.
8. Los investigadores planean recolectar 20 pacientes del 1 de julio de 2007 al 30 de junio de 2010