각막줄기세포 부전 환자에서 배양된 각막줄기세포의 적용

재료 및 방법:

1. 일측성 윤부 줄기 세포 부전을 앓고 있는 환자가 선택될 것입니다. 자원봉사자들이 수술의 이점과 위험 요인을 이해하고 있는지 확인하십시오.
2. 인간 양막을 준비하고 37°C, 5% CO2, 95% 실내 공기에서 배양합니다.
3. 이식 1개월 전에 건강한 눈에서 윤부 조직 1-2mm2를 채취하여 1.5 ml 호르몬 보충 상피 배지(in 5% 的 fetal calf serum)로 양막에서 윤부 조직을 배양한다.
4. 5% dimethyl sulfoxide, 2 mg/ml human epidermal growth factor, 5 ug/ml 인슐린, 0.5 ug/ml hydrocortisone, 50 ug/ml가 첨가된 Dulbecco's modified Eagle's medium/Ham's F12(1:1 비율)에서 세포를 계속 배양합니다. ml gentamicin, 1.25 ug/ml amphotericin B, 5% 자가혈청. 2~3주 후 세포가 2~3 cm2에 도달한 후 이식을 시행합니다.
5. 병변 각막의 비정상적인 표면 조직을 제거하고, 배양된 각막 윤부 줄기 세포로 양막을 벗겨진 각막에 이식합니다. 수술 후 콘택트렌즈로 덮고 국소 항생제와 스테로이드를 바릅니다.
6. 수술 후 일주일 동안 환자를 관찰하십시오. 퇴원 후 1주, 2주, 1개월, 2개월, 3개월, 6개월, 1년 후에 환자를 추적합니다.
7. 사진을 찍고 각막 상피 ​​재생, 시력 및 합병증의 정도를 후속 방문 중에 기록합니다.
8. 조사관은 2007년 7월 1일부터 2010년 6월 30일까지 20명의 환자를 수집할 계획입니다.