Czy płukanie jamy macicy płynem pęcherzykowym po pobraniu komórki jajowej poprawia wskaźniki implantacji w cyklach ICSI?

Wstęp:

Przyglądając się procesowi zapłodnienia in vitro, stwierdziliśmy, że wykorzystujemy tylko komórkę jajową i plemnik, całkowicie zaniedbując cenny efekt płynu pęcherzykowego, na który obecnie zwraca się dużą uwagę. Kilka badań wykazało kluczową rolę tego płynu w procesie zapłodnienia i implantacji, ponieważ jest on bogaty w czynniki wzrostu, takie jak czynnik komórek macierzystych, transformujący czynnik wzrostu i insulinowy czynnik wzrostu oraz cytokiny (1,2).

Badanie Macciò potwierdziło, że płyn pęcherzykowy (FF) zawiera czynniki indukujące immunosupresję i wyjaśniło, że w immunosupresyjnej aktywności FF pośredniczy specyficzne hamowanie produkcji IL-1 alfa i IL-2 oraz zmniejszona ekspresja CD25 (3 ).

Podczas pobierania komórki jajowej zasysamy cały FF i wyrzucamy go po pobraniu komórki jajowej. Płyn ten zwykle dostaje się do jajowodów podczas wybierania komórki jajowej podczas owulacji w naturalnych cyklach i dociera również do jamy macicy, a kilka badań sugeruje, że może odgrywać kluczową rolę w modyfikowaniu receptywności macicy, przygotowując endometrium na przybycie zapłodnionej komórki jajowej po 3 dniach ponieważ TGF kontroluje apoptozę, IGF poprawia grubość endometrium, a działanie immunosupresyjne FF toruje drogę zagnieżdżeniu się zarodka w jamie macicy (4,5).

Właściwie badanie Huntera z 2007 roku dostarczyło poszlakowych dowodów na wejście płynu pęcherzykowego do jajowodów, szczególnie blisko czasu owulacji, z sugestią, że takie wejście może modyfikować charakter wydzielania i przesiąkania przez jamę ustną. Następnie spektrum hormonów gonadalnych w płynie pęcherzykowym może oddziaływać lokalnie na tkanki macicy (5).

Jednocześnie dobrze znany jest fakt, że implantacja jest krokiem ograniczającym powodzenie IVF, właściwie prawie wszystkie cykle IVF dają zapłodnione komórki jajowe dające początek zarodkom na różnych etapach rozwoju, ale niestety, kiedy przenosimy je do macicy ubytku, 60% nie udaje się wszczepić.

Implantacja jest złożonym początkowym krokiem w ustanowieniu udanej ciąży. Chociaż jakość zarodka jest ważnym wyznacznikiem implantacji, kluczowe znaczenie ma skoordynowane czasowo różnicowanie komórek endometrium w celu uzyskania receptywności macicy oraz zsynchronizowany dialog między tkankami matki i zarodka. Optymalizacja receptywności endometrium w leczeniu niepłodności poprawi wskaźnik powodzenia.

Wydaje się, że w proces implantacji zaangażowanych jest kilka czynników wzrostu i cytokin. Czynnik komórek macierzystych i jego receptor c-kit regulują rozwój i przeżywalność komórek rozrodczych oraz odgrywają ważną rolę w rozwoju pęcherzyka. Występuje w płynie pęcherzykowym, jednak niewiele było informacji na temat roli czynnika komórek macierzystych i jego receptora w procesie implantacji blastocysty. Dopiero Mitsunari zbadał ekspresję czynnika komórek macierzystych i jego receptora w zarodkach myszy oraz w komórkach zrębowych i nabłonkowych endometrium macicy za pomocą reakcji łańcuchowej polimerazy z odwrotną transkrypcją. Zilustrował, że czynnik komórek macierzystych pochodzący z komórek endometrium i zagnieżdżonego zarodka wywiera działanie parakrynne i autokrynne na proces implantacji poprzez stymulację wzrostu trofoblastu poprzez jego receptor c-kit (6).

Lekceważenie znaczenia płynu pęcherzykowego i wyrzucanie go podczas procesu zapłodnienia in vitro jest właściwie odstępstwem od tego, co dzieje się w naturze, gdzie jajowód jest wystarczająco inteligentny, aby docenić wartość tego płynu i pobrać go wraz z komórką jajową.

Dlatego w tym badaniu chcemy naśladować naturalne cykle i zbadać korzyści płynące z płukania jamy macicy płynem pęcherzykowym po pobraniu komórki jajowej w poprawie wskaźników implantacji w cyklach ICSI.

Materiały i metody:

100 pacjentów uczęszczających do ośrodka kasr El-Ainey IVF przygotowujących się do cykli ICSI zostanie losowo podzielonych na dwie grupy.

W tym prospektywnym badaniu interwencyjnym pacjentki z obu grup otrzymają ten sam protokół indukcji kontrolowanej hiperstymulacji jajników, który jest protokołem długim, naszym standardowym protokołem w ośrodku. Początkowe zahamowanie czynności jajników za pomocą agonisty hormonu uwalniającego gonadotropiny rozpocznie się w 21. dniu poprzedniego cyklu. Indukcja gonadotropin menopauzalnych u ludzi rozpocznie się po potwierdzeniu obniżenia czynności jajników zarówno w badaniach laboratoryjnych, jak i ultrasonograficznych, poprzez codzienne wstrzykiwanie domięśniowe 150-300 IU (Merional, IBSA), aż co najmniej 3 pęcherzyki osiągną 18 mm, a poziom estradiolu w surowicy będzie się mieścił między 1000-4000, a następnie 10000 Podano j.m., HCG.

Pobranie komórki jajowej zaplanowano na 35 godzin później, podczas którego każdy pęcherzyk zostanie zassany do osobnej probówki i osobno zbadany przez embriologa, gdzie:

• Płyn pęcherzykowy z pustych pęcherzyków zostanie odrzucony, wykorzystany zostanie tylko FF z pęcherzyków, z których pobrano dojrzałe oocyty.
• Płyn pęcherzykowy zanieczyszczony krwią zostanie wyrzucony i nie będzie używany, zostanie użyty tylko czysty FF.
• Po aspiracji oocytów nie stosowano spłukiwania, aby nie zakłócać stężenia czynników wzrostu w FF.

Po wyjaśnieniu procedury i uzyskaniu świadomej zgody od pacjentów:

2 ml klarownego płynu pęcherzykowego zostanie wstrzyknięte do jamy macicy w celu przepłukania endometrium przez cewnik IUI po wykonaniu pozorowanego transferu w grupie badanej.

Natomiast w grupie kontrolnej nie wykonuje się płukania jamy endometrium za pomocą FF.

W obu grupach transfer zarodków zostanie przeprowadzony 2-3 dni później w zależności od stanu zarodków, a test ciążowy 14 dni później.

Protokół został zatwierdzony przez komisję rewizyjną w szpitalu kasr el-Aini; Centrum IVF na uniwersytecie w Kairze.