Zlepší proplachování děložní dutiny folikulární tekutinou po odběru vajíčka míru implantace v cyklech ICSI?

Úvod:

Při pohledu na proces IVF jsme zjistili, že využíváme pouze vajíčko a sperma a zcela zanedbáváme cenný efekt folikulární tekutiny, která v současnosti přitahuje velkou pozornost. Několik studií odhalilo klíčovou roli této tekutiny v procesu oplodnění a implantace, protože je bohatá na růstové faktory, jako je faktor kmenových buněk, transformující růstový faktor a růstový faktor inzulínu a cytokiny (1,2).

Studie Macciò potvrdila, že folikulární tekutina (FF) obsahuje faktory, které indukují imunosupresi, a vysvětlila, že imunosupresivní aktivita FF je zprostředkována specifickou inhibicí produkce IL-1 alfa a IL-2 a sníženou expresí CD25 (3 ).

Při odběru vajíčka všechny FF odsajeme a po odběru vajíčka vyhodíme. Tato tekutina se normálně dostává do vejcovodů při vybírání vajíčka během ovulace v přirozených cyklech a dostává se také do děložní dutiny a několik studií naznačilo, že by mohla mít zásadní roli při úpravě vnímavosti dělohy při přípravě endometria na oplodněné vajíčko, které přijde po 3 dnech protože TGF řídí apoptózu, IGF zlepšuje tloušťku endometria a imunosupresivní aktivita FF připravuje cestu pro implantaci embrya do děložní dutiny (4,5).

Ve skutečnosti Hunterova studie z roku 2007 poskytla nepřímé důkazy pro vstup folikulární tekutiny do vejcovodů, zvláště v době ovulace, s návrhem, že takový vstup by mohl změnit povahu endosalpingeální sekrece a transsudace. Poté mohlo spektrum gonadálních hormonů ve folikulární tekutině ovlivňovat děložní tkáně lokálně [5].

Zároveň je dobře známou skutečností, že implantace je limitujícím krokem v úspěchu IVF, ve skutečnosti téměř všechny cykly IVF umožňují nabídnout oplodněná vajíčka, ze kterých vzejdou embrya v různých fázích vývoje, ale bohužel když je přeneseme do dělohy dutiny, 60 % se nepodaří implantovat.

Implantace je složitým počátečním krokem k ustavení úspěšného těhotenství. Přestože kvalita embrya je důležitým determinantem implantace, klíčová je časově koordinovaná diferenciace endometriálních buněk k dosažení receptivity dělohy a synchronizovaný dialog mezi mateřskou a embryonální tkání. Optimalizace vnímavosti endometria v léčbě plodnosti zlepší úspěšnost.

Zdá se, že do procesu implantace je zapojeno několik růstových faktorů a cytokinů. Faktor kmenových buněk a jeho receptor c-kit regulují progresi a přežití zárodečných buněk a hrají důležitou roli ve vývoji folikulů. Je přítomen ve folikulární tekutině, nicméně o úloze faktoru kmenových buněk a jeho receptoru v procesu implantace blastocyst bylo dostupných málo informací. Až Mitsunari zkoumal expresi faktoru kmenových buněk a jeho receptoru v myších embryích a ve stromálních a epiteliálních buňkách děložního endometria pomocí reverzní transkripce-polymerázové řetězové reakce. Ilustroval, že faktor kmenových buněk odvozený z endometriálních buněk a implantovaného embrya působí parakrinně a autokrinně na proces implantace stimulací růstu trofoblastu prostřednictvím svého receptorového c-kitu (6).

Zanedbání důležitosti folikulární tekutiny a její vyhození během procesu IVF je ve skutečnosti odchylka od toho, co se děje v přírodě, kde je vejcovod dostatečně inteligentní, aby ocenil hodnotu této tekutiny a vyzvedl ji s vajíčkem.

To je důvod, proč v této studii chceme napodobit přirozené cykly a prozkoumat výhody proplachování děložní dutiny folikulární tekutinou po odběru vajíčka při zlepšování míry implantace v cyklech ICSI.

Materiály a metody:

100 pacientů navštěvujících kasr El-Ainey IVF centrum připravujících se na ICSI cykly bude randomizováno do dvou skupin.

V této prospektivní intervenční studii dostanou pacientky obou skupin stejný indukční protokol pro řízenou ovariální hyperstimulaci, což je dlouhý protokol, náš standardní protokol v centru. Počáteční suprese ovariální funkce agonistou hormonu uvolňujícího gonadotropin začne 21. den předchozího cyklu. Indukce lidského menopauzálního gonadotropinu začne po potvrzené ovariální downregulaci jak laboratorními vyšetřeními, tak ultrazvukem denní intramuskulární injekcí 150-300 IU (Merional, IBSA), dokud alespoň 3 folikuly nedosáhnou 18 mm a hladina estradiolu v séru leží mezi 1000-4000 a pak 10000 Podává se IU, HCG.

Odběr vajíčka je naplánován o 35 hodin později, kdy je každý folikul odsát do samostatné zkumavky a bude vyšetřen embryologem samostatně, kde:

• Folikulární tekutina z prázdných folikulů bude odstraněna, použije se pouze FF z folikulů, kde byly získány zralé oocyty.
• Folikulární tekutina kontaminovaná krví bude zlikvidována a nebude použita, bude použita pouze čirá FF.
• Po aspiraci oocytů nebylo použito žádné proplachování, aby nedošlo k interferenci s koncentrací růstových faktorů ve FF.

Po vysvětlení postupu a získání informovaného souhlasu od pacientů:

2 ml čiré folikulární tekutiny budou injikovány do děložní dutiny k propláchnutí endometria přes IUI katetr po provedení simulovaného přenosu ve studované skupině.

Zatímco v kontrolní skupině se neprovádí žádné proplachování endometriální dutiny pomocí FF.

U obou skupin bude embryotransfer proveden o 2-3 dny později podle stavu embryí a těhotenský test bude proveden o 14 dní později.

Protokol byl schválen revizní komisí v nemocnici kasr el-Aini; IVF centrum na káhirské univerzitě.