Il lavaggio della cavità uterina con fluido follicolare dopo il prelievo dell'ovulo migliora i tassi di impianto nei cicli ICSI?

Introduzione:

Osservando il processo della fecondazione in vitro, abbiamo scoperto che utilizziamo solo l'ovulo e lo sperma e trascuriamo completamente il prezioso effetto del fluido follicolare che attualmente sta attirando molta attenzione. Diversi studi hanno rivelato un ruolo fondamentale svolto da questo fluido nel processo di fecondazione e impianto in quanto è ricco di fattori di crescita come fattore di cellule staminali, fattore di crescita trasformante e fattore di crescita dell'insulina e citochine (1,2).

Lo studio di Macciò ha confermato che il liquido follicolare (FF) contiene fattori che inducono immunosoppressione e ha spiegato che l'attività immunosoppressiva di FF è mediata dall'inibizione specifica della produzione di IL-1 alfa e IL-2 e dalla diminuita espressione del CD25 (3 ).

Durante il prelievo degli ovociti, aspiriamo tutto il FF e lo gettiamo via dopo il prelievo dell'ovulo. Questo fluido entra normalmente nelle tube di Falloppio durante la raccolta dell'ovulo durante l'ovulazione nei cicli naturali e raggiunge anche la cavità uterina e diversi studi hanno suggerito che potrebbe avere un ruolo cruciale nel modificare la ricettività uterina preparando l'endometrio per l'ovulo fecondato che arriva dopo 3 giorni poiché il TGF controlla l'apoptosi, l'IGF migliora lo spessore endometriale e l'attività immunosoppressiva del FF apre la strada all'impianto dell'embrione nella cavità uterina (4,5).

In realtà lo studio di Hunter nel 2007, ha fornito prove circostanziali per l'ingresso di fluido follicolare nelle tube di Falloppio, soprattutto vicino al momento dell'ovulazione, con il suggerimento che tale ingresso potrebbe modificare la natura della secrezione endosalpingea e trasudazione. Successivamente, lo spettro degli ormoni gonadici nel liquido follicolare potrebbe influenzare i tessuti uterini in maniera locale (5).

Allo stesso tempo, è risaputo che l'impianto è il passaggio limitante nel successo della fecondazione in vitro, in realtà quasi tutti i cicli di fecondazione in vitro riescono a offrire ovuli fecondati dando origine a embrioni nelle diverse fasi di sviluppo ma purtroppo quando li trasferiamo nell'utero cavità, il 60% non riesce a impiantare.

L'impianto è un complesso passo iniziale nella creazione di una gravidanza di successo. Sebbene la qualità dell'embrione sia un importante determinante dell'impianto, la differenziazione temporalmente coordinata delle cellule endometriali per raggiungere la ricettività uterina e un dialogo sincronizzato tra i tessuti materni ed embrionali sono cruciali. L'ottimizzazione della ricettività endometriale nel trattamento della fertilità migliorerà il tasso di successo.

Diversi fattori di crescita e citochine sembrano essere coinvolti nel processo di impianto. Il fattore delle cellule staminali e il suo recettore c-kit regolano la progressione e la sopravvivenza delle cellule germinali e svolgono un ruolo importante nello sviluppo follicolare. È presente nel fluido follicolare, tuttavia erano disponibili poche informazioni sul ruolo del fattore delle cellule staminali e del suo recettore nel processo di impianto della blastocisti. Non è stato fino a quando Mitsunari ha esaminato l'espressione del fattore delle cellule staminali e del suo recettore negli embrioni di topo e nelle cellule stromali ed epiteliali dell'endometrio uterino mediante trascrizione inversa - reazione a catena della polimerasi. Ha illustrato che il fattore delle cellule staminali derivato dalle cellule endometriali e l'embrione impiantante esercita un'azione paracrina e autocrina sul processo di impianto stimolando la crescita del trofoblasto attraverso il suo recettore c-kit (6).

Trascurare l'importanza del fluido follicolare e buttarlo via durante il processo di fecondazione in vitro è in realtà una deviazione da ciò che accade in natura dove la tuba di Falloppio è abbastanza intelligente da apprezzare il valore di questo fluido e raccoglierlo con l'ovulo.

Ecco perché in questo studio vogliamo imitare i cicli naturali ed esplorare i vantaggi del lavaggio della cavità uterina con fluido follicolare dopo il prelievo dell'ovulo nel migliorare i tassi di impianto nei cicli ICSI.

Materiali e metodi:

100 pazienti che frequentano il centro di fecondazione in vitro kasr El-Ainey che si preparano per i cicli ICSI saranno randomizzati in due gruppi.

In questo studio prospettico interventistico, le pazienti di entrambi i gruppi riceveranno lo stesso protocollo di induzione per l'iperstimolazione ovarica controllata che è il protocollo lungo, il nostro protocollo standard nel centro. La soppressione iniziale della funzione ovarica con l'agonista dell'ormone di rilascio delle gonadotropine inizierà il giorno 21 del ciclo precedente. L'induzione della gonadotropina umana della menopausa inizierà dopo la downregolazione ovarica confermata sia dalle indagini di laboratorio che dagli ultrasuoni mediante iniezione intramuscolare giornaliera di 150-300 UI (Merional, IBSA) fino a quando almeno 3 follicoli raggiungono 18 mm e il livello sierico di estradiolo è compreso tra 1000-4000 e poi 10000 UI, viene somministrato HCG.

Il prelievo dell'ovulo è programmato 35 ore dopo, dove ogni follicolo viene aspirato in una provetta separata e sarà esaminato dall'embriologo separatamente dove:

• Il fluido follicolare dei follicoli vuoti verrà scartato, verrà utilizzato solo il FF dai follicoli in cui sono stati recuperati gli ovociti maturi.
• Il fluido follicolare contaminato dal sangue verrà scartato e non verrebbe utilizzato, verrà utilizzato solo il FF trasparente.
• Non è stato utilizzato alcun lavaggio dopo l'aspirazione degli ovociti per non interferire con la concentrazione dei fattori di crescita nel FF.

Dopo aver spiegato la procedura e preso il consenso informato dai pazienti:

Verranno iniettati 2 ml di fluido follicolare chiaro nella cavità uterina per lavare l'endometrio attraverso un catetere IUI dopo aver eseguito il finto trasferimento nel gruppo di studio.

Mentre, nel gruppo di controllo, non viene eseguito alcun lavaggio della cavità endometriale con FF.

In entrambi i gruppi, il trasferimento degli embrioni verrà effettuato 2-3 giorni dopo in base alle condizioni degli embrioni e il test di gravidanza verrà eseguito 14 giorni dopo.

Il protocollo è stato approvato dal comitato di revisione dell'ospedale Kasr el-Aini; Centro di fecondazione in vitro presso l'università del Cairo.