Lymphoseek® jako czynniki ukierunkowane na tkankę limfatyczną w raku okrężnicy (CNC)

Niniejsze badanie jest jednoośrodkowym, otwartym badaniem porównawczym ex vivo tkanki pacjenta z preparatem Lymphoseek (Lymphoseek (Technet Tc 99m Tilmanocept) jest radioznacznikiem, który gromadzi się w tkance limfatycznej poprzez wiązanie się z receptorem wiążącym mannozę, znajdującym się na powierzchni komórek dendrytycznych komórki i makrofagi. Lymphoseek ma średnicę około 5 nm, która jest znacznie mniejsza niż obecne środki znakowane radioaktywnie stosowane do celowania w tkankę limfatyczną. Mała średnica Lymphoseek umożliwia lepszą dyfuzję do węzłów chłonnych i naczyń włosowatych, co skutkuje szybkim oczyszczeniem miejsca wstrzyknięcia. Po wejściu do krwi czynnik wiąże się z receptorami w wątrobie lub jest filtrowany przez nerki i gromadzi się w pęcherzu). błękitu witalnego (Patent Bleu V) w wykrywaniu wyciętych węzłów chłonnych u pacjentów z rozpoznanym rakiem okrężnicy.

Segment okrężnicy z guzem i przewidywanym zajęciem loży węzłowej zostanie usunięty w stanie nienaruszonym. Po zakończeniu zabiegu chirurgicznego preparat jest natychmiast przenoszony na dodatkowy stół w sali operacyjnej. Wykonuje się go zaraz po pobraniu preparatu. Próbkę okrężnicy nacina się wzdłużnie po stronie przeciwkrezkowej.

Na próbce stosuje się mapowanie limfatyczne przy użyciu pierwszego wstrzyknięcia Lymphoseek (50 µg/2 mCi) w 0,1-1,0 ml, a następnie po 15-30 minutach 1 ml 1% niebieskiego barwnika, każdy wstrzyknięty podsurowiówkowo i podśluzówkowo wokół guza (zastosowano miejsca okołoguzowe) za pomocą strzykawki tuberkulinowej. Po 5-7 minutach masażu z niewielkimi ruchami krążeniowymi zmiany, środki znakujące przemieszczają się drogami limfatycznymi do wartowniczych węzłów chłonnych (SLN) w krezce.

Dzięki diatermii niskiego poziomu może dojść do ostrego rozwarstwienia dróg limfatycznych prowadzących do SLN.

Niebieskie węzły należy najpierw usunąć za pomocą oględzin. Oględziny i sekcje trwają nie dłużej niż 20 minut. Każdy niebieski węzeł zostanie następnie oceniony pod kątem zliczeń, a także koloru i zastosowanej zasady „gorącego” (3σ), jak opisano poniżej.

Po usunięciu niebieskiego węzła każdy wartowniczy węzeł chłonny można usunąć z basenu i oznaczyć przed przekazaniem próbki do oceny patologicznej.

Wskazane przez Lymphoseek (zlokalizowane) węzły chłonne definiuje się jako węzły chłonne, które mają liczbę z detektora gamma większą niż suma 3 pierwiastków kwadratowych średniej liczby tła (tj. odchylenia standardowego) dodanej do średniej liczby tła. Nazywa się to dalej „regułą 3σ” i „kryteriami progowymi”. Jeżeli zastosowany detektor gamma nie może uzyskać zliczeń gamma w trzech odstępach 2-sekundowych, do wykrycia zliczeń gamma można zastosować jedno zliczenie 10-sekundowe. Każda liczba węzłów chłonnych niespełniająca tego kryterium progowego zostanie uznana za wynik negatywny (niezlokalizowany). Liczbę tła można uzyskać, zliczając 2-sekundowe lub 10-sekundowe zliczenia z ręczną sondą gamma wysuniętą co najmniej 100 cm od miejsca wstrzyknięcia i sondą skierowaną z dala od dowolnego źródła Lymphoseek (strzykawki, miejsce wstrzyknięcia, skażone izotopem materiały).

Sondowanie obszaru zostanie zakończone, gdy wszystkie wybrane liczby węzłów będą ujemne przy użyciu kryteriów progowych. Chirurg będzie kontynuował wizualizację i badanie palpacyjne zgodnie z lokalną praktyką, aby upewnić się, że w miejscu resekcji nie pozostały rażąco dodatnie węzły chłonne. W celu potwierdzenia procedury in vivo dla wyciętych węzłów chłonnych zostanie zarejestrowana ocena obecności niebieskiego odcienia oraz seria trzech zliczeń 2-sekundowych lub jedno zliczenie 10-sekundowe. Średnia liczba węzłów chłonnych ex vivo zostanie porównana ze średnią liczby zliczeń tła w pomieszczeniu, a te same kryteria progowe, które zastosowano do określenia pozytywnego wyniku dla węzłów chłonnych in vivo, zostaną zastosowane do próbek ex vivo.

Wszystkie usunięte węzły chłonne zostaną wysłane do patologii w celu dalszej oceny. Wszystkie węzły chłonne zostaną poddane rozszerzonej ocenie patologicznej, w tym seryjnemu cięciu na skrawki z barwieniem H&E oraz markerami immunohistochemicznymi (IHC). przez histologię.

B- Głównym celem jest ocena wyciętych węzłów chłonnych w celu potwierdzenia obecności/braku przerzutów nowotworu we wszystkich węzłach oraz porównanie wyników patologii w węzłach wykrytych przez środek w porównaniu do węzłów usuniętych bez użycia środka.

Oceny wtórne będą obejmować współczynniki lokalizacji (identyfikacja wszelkich gorących i/lub niebieskich węzłów), stopień lokalizacji (liczba węzłów/całkowita tkanka pacjenta ex vivo), zliczenia zlokalizowane w każdym węźle oraz czas do lokalizacji i stabilizacji.