Lymphoseek® come agenti mirati ai tessuti linfoidi nel cancro del colon (CNC)

Questo studio è un singolo centro, in aperto, all'interno del tessuto del paziente studio comparativo ex vivo di Lymphoseek (Lymphoseek (Technetium Tc 99m Tilmanocept) è un radiotracciante che si accumula nel tessuto linfatico legandosi a un recettore legante il mannosio che risiede sulla superficie del dendritico cellule e macrofagi. Lymphoseek ha un diametro di circa 5 nm, che è sostanzialmente più piccolo degli attuali agenti radiomarcati usati per bersagliare il tessuto linfoide. Il piccolo diametro di Lymphoseek consente una migliore diffusione nei linfonodi e nei capillari sanguigni, determinando una rapida clearance del sito di iniezione. All'ingresso nel sangue, l'agente si lega ai recettori nel fegato o viene filtrato dal rene e si accumula nella vescica.) e colorante blu vitale (Brevetto Bleu V) nella rilevazione dei linfonodi asportati in pazienti con cancro del colon noto.

Il segmento del colon con il tumore e il previsto letto nodale coinvolto verranno rimossi intatti. Dopo che la procedura chirurgica è stata completata, il campione viene immediatamente portato su un tavolo aggiuntivo nella sala operatoria. Viene eseguito subito dopo che il campione è stato prelevato. Il campione del colon viene inciso longitudinalmente sul lato antimesenterico.

La mappatura linfatica viene impiegata sul campione utilizzando la prima iniezione Lymphoseek (50 µg/2 mCi) in 0,1-1,0 ml, seguiti in 15-30 minuti da 1 ml di colorante blu all'1%, ciascuno iniettato per via sottosierosa e sottomucosa attorno al tumore (siti peritumorali impiegati) utilizzando una siringa per tubercolina. Dopo 5-7 minuti di massaggio con piccoli movimenti circolatori sulla lesione, gli agenti di marcatura vengono spostati nei percorsi linfatici ai linfonodi sentinella (SLN) nel mesentere.

A causa della diatermia di basso livello, può essere presente una netta dissezione del percorso linfatico verso il linfonodo sentinella.

I nodi blu devono essere rimossi prima mediante ispezione visiva. Questa ispezione e dissezione non deve durare più di 20 minuti. Ogni nodo blu verrà quindi valutato per i conteggi e il colore e verrà applicata la regola "calda" (3σ) come descritto di seguito.

Dopo la rimozione del linfonodo blu, ciascun linfonodo sentinella può essere rimosso dal bacino e contrassegnato prima che il campione venga sottoposto a valutazione patologica.

I linfonodi (localizzati) designati da Lymphoseek sono definiti come linfonodi che hanno un numero di rilevatori gamma maggiore della somma di 3 radici quadrate del conteggio medio di fondo (cioè deviazione standard) aggiunto al conteggio medio di fondo. Ciò è indicato in seguito come "regola del 3σ" e come "criteri di soglia". Se il rilevatore gamma utilizzato non è in grado di ottenere i conteggi gamma in tre intervalli di 2 secondi, è possibile utilizzare un conteggio di 10 secondi per rilevare i conteggi gamma. Qualsiasi conteggio dei linfonodi che non soddisfi questo criterio di soglia sarà considerato un risultato negativo (non localizzato). Il conteggio di fondo può essere ottenuto effettuando il conteggio di 2 secondi o il conteggio di 10 secondi con la sonda gamma portatile estesa ad almeno 100 cm di distanza dal sito di iniezione e la sonda puntata lontano da qualsiasi fonte Lymphoseek (siringhe, sito di iniezione, contaminato da isotopi materiali).

Il sondaggio dell'area sarà completo quando tutti i conteggi dei nodi selezionati saranno negativi utilizzando i criteri di soglia. Il chirurgo continuerà con la visualizzazione e la palpazione secondo la pratica locale per garantire che non rimangano linfonodi gravemente positivi nel sito di resezione. Per confermare la procedura in vivo, verrà registrata la valutazione della presenza di una tonalità blu e una serie di tre conte di 2 secondi o una conta di 10 secondi per i linfonodi asportati. Il conteggio medio dei linfonodi ex vivo sarà confrontato con la media dei conteggi di fondo della stanza e gli stessi criteri di soglia utilizzati per determinare un risultato positivo per i linfonodi in vivo saranno applicati ai campioni ex vivo.

Tutti i linfonodi rimossi verranno inviati alla patologia per un'ulteriore valutazione. Tutti i linfonodi saranno sottoposti a una valutazione patologica potenziata che include il sezionamento seriale con colorazione H&E e marcatori immunoistochimici (IHC) A- L'obiettivo primario dell'efficacia è la concordanza dei tassi di rilevamento in vivo di Lymphoseek e VBD nei linfonodi asportati quando il fenotipo del tessuto è confermato per istologia.

B- L'obiettivo primario è la valutazione dei linfonodi asportati per confermare la presenza/assenza di metastasi tumorali in tutti i linfonodi e un contrasto dei reperti patologici nei linfonodi trovati per agente rispetto a tutti i linfonodi rimossi non basati sull'agente.

Le valutazioni secondarie includeranno i tassi di localizzazione (identificazione di qualsiasi nodo caldo e/o blu), il grado di localizzazione (numero di nodi/tessuto totale ex vivo del paziente), i conteggi localizzati per nodo e il tempo di localizzazione e stabilizzazione.