Trzy metody stosowane w diagnostyce EER u dzieci z OME

Do prospektywnego badania włączono dzieci w wieku od 1 do 7 lat z rozpoznaniem obustronnego lub jednostronnego OME, u których wykonano adenotomię i myringotomię z założeniem rurki wentylacyjnej. OME zdefiniowano jako wysięk w uchu środkowym za nienaruszoną błoną bębenkową trwający dłużej niż 3 miesiące. Rozpoznanie postawiono na podstawie wyników badania otomikroskopowego, otoskopii pneumatycznej, tympanometrii typu B i audiometrii (u dzieci starszych, współpracujących). Dzieci bez płynu w uchu środkowym podczas myringotomii zostały ponownie zdiagnozowane jako mające tympanosklerozę i zostały wyłączone z badania. Z badania wykluczono również dzieci z wadami twarzoczaszki (zespół Downa, zespół Treachera Collinsa, rozszczepy itp.). Dane demograficzne i objawy choroby EER przekazali rodzice, których konkretnie zapytano o chrypkę, nawracające infekcje dolnych dróg oddechowych (zapalenie oskrzeli, zapalenie płuc) oraz astmę oskrzelową u ich dziecka.

Przed operacją wykonano całodobowe monitorowanie pH jamy ustnej i gardła za pomocą systemu Restech. Rodziców poinstruowano, aby rejestrowali czas, jaki ich dziecko spędzało na jedzeniu, piciu oraz w pozycji poziomej bezpośrednio na urządzeniu i ręcznie w dzienniczku. W przypadku rozbieżności okresy zarejestrowane w urządzeniu były modyfikowane zgodnie z dzienniczkiem. Standaryzowany wynik złożony RYAN został obliczony automatycznie przy użyciu dostarczonego oprogramowania. Pacjenci z patologicznymi wynikami złożonymi RYAN w pozycji pionowej (powyżej 9,4) i/lub poziomej (powyżej 6,8) zostali sklasyfikowani jako posiadający patologiczną EER. Ciężkie EER rozpoznawano, gdy wynik złożony RYAN w pozycji pionowej lub poziomej był wyższy niż 200.

Myringotomię pod mikroskopem wykonano na przednim dolnym odcinku błony bębenkowej. Rejestrowano rodzaj wysięku w uchu środkowym (płynny, śluzowy). Płyn z ucha środkowego pobierano za pomocą specjalnego urządzenia ssącego z butelką zbierającą, a do błony bębenkowej wprowadzano rurkę wentylacyjną. W przypadku obustronnego OME płyny z ucha środkowego pobierano i analizowano oddzielnie. Próbkę najpierw poddano standaryzacji. Dodano 0,1 ml 10% kwasu cytrynowego, próbkę wirowano przez 10 minut, a następnie dodano oryginalny odczynnik do migracji. Następnie próbkę zbadano za pomocą Peptestu, który zawiera przeciwciała monoklonalne ukierunkowane na pepsynę. Wynik testu Peptest podano jako dodatni (2 kreski), ujemny (1 kreska) lub nieważny (brak kreski).

Następnie wykonano adenotomię zimnym instrumentem. Próbkę migdałków (5x5x5mm) z okolic torusa tubarius utrwalono w formaldehydzie i poddano analizie immunohistochemicznej w Zakładzie Patologii. Jako przeciwciało pierwszorzędowe zastosowano przeciwciało P3635Rb-h (Uscnlife, USA, stężenie 1:100). Przeciwciało N-HistofineSimple Stain MAX PO (Nichirei Biosciences Inc.) zastosowano jako przeciwciało drugorzędowe.

Analizę statystyczną przeprowadzono za pomocą programu MS Excel.