Tre metodi utilizzati nella diagnosi di EER nei bambini con OME

Sono stati inclusi nello studio prospettico bambini di età compresa tra 1 e 7 anni con diagnosi di OME bilaterale o unilaterale sottoposti ad adenoidectomia e miringotomia con inserimento di un tubo di ventilazione. OME è stato definito come versamento nell'orecchio medio dietro un timpano intatto per più di 3 mesi. La diagnosi è stata fatta sulla base di reperti otomicroscopici, otoscopia pneumatica, timpanometria di tipo B e audiometria (nei bambini più grandi e collaborativi). I bambini senza liquido nell'orecchio medio durante la miringotomia sono stati nuovamente diagnosticati come affetti da timpanosclerosi e sono stati esclusi dallo studio. Anche i bambini con anomalie craniofacciali (sindrome di Down, sindrome di Treacher Collins, schisi ecc.) sono stati esclusi dallo studio. I dati demografici ei sintomi della malattia EER sono stati forniti dai genitori, a cui è stato chiesto specificamente di raucedine, infezioni ricorrenti delle vie respiratorie inferiori (bronchite, polmonite) e asma bronchiale nel loro bambino.

Prima dell'intervento chirurgico è stato eseguito il monitoraggio delle 24 ore del pH orofaringeo utilizzando il sistema Restech. I genitori sono stati istruiti a registrare il tempo trascorso dal loro bambino mangiando, bevendo e in posizione orizzontale direttamente sul dispositivo e manualmente sul diario. In caso di discrepanza, i periodi registrati nel dispositivo sono stati modificati in base al diario. Un punteggio composito RYAN standardizzato è stato calcolato automaticamente utilizzando il software fornito. I pazienti con punteggi compositi RYAN patologici in posizione verticale (superiore a 9,4) e/o orizzontale (superiore a 6,8) sono stati classificati come affetti da EER patologico. L'EER grave è stato diagnosticato quando il punteggio composito RYAN in posizione verticale o orizzontale era superiore a 200.

La miringotomia al microscopio è stata eseguita sulla parte anteriore inferiore della membrana timpanica. È stato registrato il tipo di versamento dell'orecchio medio (fluido, mucoso). Il fluido dell'orecchio medio è stato raccolto utilizzando uno speciale dispositivo di aspirazione con un flacone di raccolta e un tubo di ventilazione è stato inserito nella membrana timpanica. Nel caso di OME bilaterale, i fluidi dell'orecchio medio sono stati raccolti e analizzati separatamente. Il campione è stato prima standardizzato. Sono stati aggiunti 0,1 ml di acido citrico al 10%, il campione è stato centrifugato per 10 minuti e successivamente è stato aggiunto il reagente di migrazione originale. Successivamente, il campione è stato esaminato utilizzando Peptest, che contiene anticorpi monoclonali che prendono di mira la pepsina. Il risultato del Peptest è stato indicato come positivo (2 righe), negativo (1 riga) o non valido (nessuna riga).

Quindi, è stata eseguita l'adenoidectomia utilizzando uno strumento freddo. Un campione di adenoidi (5x5x5mm) dalla zona prossima al torus tubarius è stato fissato in formaldeide e analizzato immunoistochimicamente presso il Dipartimento di Patologia. L'anticorpo P3635Rb-h (Uscnlife, USA, concentrazione 1:100) è stato utilizzato come anticorpo primario. L'anticorpo N-HistofineSimple Stain MAX PO (Nichirei Biosciences Inc.) è stato utilizzato come anticorpo secondario.

L'analisi statistica è stata effettuata utilizzando MS Excel.