Dystrybucja statyn

Ostatecznym celem tego proponowanego badania jest ustalenie roli zmienności genetycznej i rozwoju kluczowych transporterów na zależność dawka-ekspozycja dwóch powszechnie stosowanych statyn u dzieci. To badanie jest pierwszym krokiem w serii badań mających na celu określenie mechanizmów stojących za zmianami odpowiedzi fizjologicznej, skuteczności klinicznej i znacznego ryzyka działań niepożądanych, które otaczają statyny u dzieci i młodzieży.

Projekt i metody badawcze

1. Projekt próbny 1.1. Środki badawcze Prawastatyna 20 mg tabletka (wiek 8-13 lat), 40 mg tabletka (>14 lat) Symwastatyna 10 mg tabletka (wiek 8-17 lat), 20 mg (>17 lat) Handlowe dostawy prawastatyny i symwastatyny zatwierdzone przez FDA zastosowanie w dyslipidemii pediatrycznej. Prawastatyna i symwastatyna z tego samego źródła i serii będą stosowane u wszystkich pacjentów. Wskazane powyżej dawki zostały wybrane zgodnie z wcześniejszymi danymi dotyczącymi dorosłych i dzieci 26, 28-32, 41 i są zgodne z aktualnymi zaleceniami dla prawastatyny i symwastatyny. Chociaż stosowane będą stałe dawki we wcześniej określonym przedziale wiekowym, dane dotyczące dawek będą analizowane z uwzględnieniem masy ciała (mg/kg) w oparciu o masę ciała pacjenta w momencie dawkowania.

1.2. Ryzyko/korzyści Wszyscy pacjenci ze stężeniem LDL >130 mg/dl (95% percentyl) będą kwalifikować się do tego badania, zgodnie z aktualnymi kryteriami klinicznymi leczenia statynami. Oczekuje się, że ryzyko związane z udziałem w tym badaniu farmakokinetycznym pojedynczej dawki będzie minimalne, biorąc pod uwagę znany profil zdarzeń niepożądanych dla badanych artykułów, a także ograniczoną ekspozycję. Najczęstszymi łagodnymi działaniami niepożądanymi statyn są bóle głowy, bóle mięśni i objawy żołądkowo-jelitowe (ból brzucha, niestrawność, biegunka, zaparcia). Jednak u dzieci te działania niepożądane występują z taką samą częstością jak placebo 14, 15, 18. Rzadkie działania niepożądane obejmują zwiększenie aktywności aminotransferaz wątrobowych i miopatię, ale są one na ogół obserwowane w przypadku leczenia przewlekłego. Ponadto do tej pory nie zgłoszono żadnego przypadku niewydolności wątroby podczas stosowania statyn 52. Istnieje również niewielkie ryzyko związane z umieszczeniem cewnika dożylnego (IV), który będzie używany do pobierania seryjnych próbek krwi do analizy farmakokinetycznej i badań przesiewowych/laboratoriów bezpieczeństwa. Wreszcie istnieje ryzyko utraty poufności przez uczestniczące podmioty. Metody ochrony PHI i postępowania z danymi są szczegółowo opisane w protokołach CMH CPR, rozdziały 4 i 5 (CMH IRB# 12040220). Wszystkie powyższe zagrożenia związane z tym nieterapeutycznym badaniem klinicznym są minimalne.

Nie ma bezpośrednich korzyści dla uczestników uczestniczących w badaniu, chociaż w przyszłości mogą one przynieść korzyści dzieciom, ponieważ oczekuje się, że informacje uzyskane z badania można uogólnić na większą populację pacjentów pediatrycznych, którzy mogą wymagać leczenia statynami. Celem badania jest określenie, w jaki sposób zmienność genetyczna wpływa na stężenia prawastatyny i symwastatyny w osoczu po podaniu zalecanych dawek leku w populacji pacjentów, która nie była wcześniej badana. Tak więc, mając tę ​​wiedzę, można by następnie opracować przyszłe protokoły, aby skutecznie „spersonalizować” dawkowanie dla pacjentów pediatrycznych z wyżej wymienionymi SNP, którzy przyjmują prawastatynę lub symwastatynę, poprawiając w ten sposób skuteczność i bezpieczeństwo dla indywidualnego pacjenta.

1.3. Projekt/typ badania Będzie to jednoośrodkowe, otwarte, randomizowane, krzyżowe badanie z udziałem pacjentów z dyslipidemią, porównujące farmakokinetykę prawastatyny i symwastatyny u pacjentów z co najmniej jednym wariantem allelu w genie SLCO1B1 (-11187 i/lub c.521) pacjentom z genotypem typu dzikiego/typu dzikiego.

1.4. Próbka populacji Dostęp do bazy danych CMH Cardiology Pharmacogenomics Repository (CPR) (CMH IRB# 12040220) zostanie uzyskany w celu określenia osób spełniających kryteria włączenia. Po zidentyfikowaniu populacji docelowej i równego zestawu grup kontrolnych dobranych pod względem wieku, płci i etapu Tannera, pacjenci zostaną zaproszeni do udziału w otwartym, randomizowanym, krzyżowym badaniu farmakokinetycznym prawastatyny i symwastatyny w jednym ośrodku .

1.5. Rekrutacja uczestników Po zidentyfikowaniu populacji docelowej i równego zestawu grup kontrolnych dobranych pod względem wieku i płci na podstawie resuscytacji krążeniowo-oddechowej potencjalni uczestnicy zostaną poinformowani o badaniu. Wstępny kontakt nastąpi w drodze przygotowanego scenariusza telefonicznego. Osoby, które wyrażą zgodę na udział, zostaną zaplanowane na wizytę przesiewową w CMH Clinical Research Unit. Podczas tej wizyty badanie zostanie wyjaśnione pacjentowi/rodzinie pacjenta, uzyskana zostanie zgoda/zgoda/zgoda, przeprowadzone zostanie badanie fizykalne (w tym ocena stopnia zaawansowania wg Tannera) oraz przesiewowe badania laboratoryjne. Uczestnicy, w przypadku których uzyskano pozwolenie/zgodę/zgodę i spełniono kryteria włączenia, zostaną wyznaczeni do powrotu do Jednostki Badań Klinicznych CMH w ciągu 6 do 14 dni na pierwszy dzień badania leku.

1.6. Wycofanie się pacjenta Udział w badaniu farmakokinetycznym prawastatyny i symwastatyny jest całkowicie dobrowolny. W ramach procesu świadomej zgody/zgody/zgody; osoby są informowane, że mogą w każdej chwili wycofać swoją zgodę/zgodę/zgodę. Jeśli w dowolnym momencie osoby badane mają problemy natury społecznej, filozoficznej, religijnej lub rodzinnej związane z badaniem, mogą podjąć decyzję o wycofaniu zgody/zgody/zgody.

Uczestnik badania lub upoważniona strona trzecia (PCP) może w każdej chwili cofnąć pozwolenie/zgodę/zgodę. Prośba o cofnięcie zezwolenia/zgody/zgody może być złożona ustnie lub pisemnie i skierowana do personelu naukowego (zgodnie ze wskazaniem w formularzu zgody/zgody/zgody). Personel badania podejmie odpowiednie kroki w celu uszanowania woli osoby badanej i zapewni, że osoba badana będzie mogła wycofać się bez narażania na szwank integralności osobistej lub oceny/leczenia medycznego. W przypadku cofnięcia pozwolenia/zgody/zgody na kontynuację po częściowym pobraniu próbek lub danych, analizie i zestawieniu poddane zostaną tylko istniejące dane. Uczestnik może zostać wycofany z badania przez badaczy, jeśli w dowolnym momencie, w ocenie badaczy, dalsze uczestnictwo uczestnika może wiązać się z powstaniem nieprzewidzianego ryzyka (np. reakcja nadwrażliwości o późnym początku po podaniu artykuł naukowy).

1.7. Temat Wizyty studyjne Badanie obejmie łącznie trzy wizyty studyjne. Jedna wizyta przesiewowa i 2 wizyty w dniu badania leku.

Wizyta przesiewowa (około 1 godziny) - Po przybyciu na wizytę przesiewową badanie zostanie szczegółowo omówione z udziałem uczestnika i jego rodzicami/opiekunami prawnymi, jeśli ma to zastosowanie. Otrzymają wystarczająco dużo czasu na zapoznanie się z formularzem pozwolenia/zgody/zgody, uzyskanie odpowiedzi na wszystkie pytania i rozwianie wątpliwości. Jeśli wyrażą zgodę na udział, podpiszą zgodę/zgodę/formularz zgody.

-Po uzyskaniu pozwolenia/zgody/zgody zostaną wylosowane laboratoria przesiewowe. Jeśli pacjent nie jest w stanie ukończyć badań laboratoryjnych w tym czasie, zostanie ustalony termin ich wykonania co najmniej 1 dzień przed Dniem nr 1 badanego leku. Ocena laboratoryjna będzie składać się z następujących elementów.

1. Panel chemii badawczej (sód, potas, chlor, dwutlenek węgla, luka anionowa, wapń, fosfor, magnez, glukoza, BUN, kreatynina, białko całkowite, albumina, bilirubina, ALT, AST, fosfataza alkaliczna, GGT, LDH, cholesterol, kwas moczowy i triglicerydów) (3 ml krwi w miętowo-zielonym lub czerwonym korku z żółtym pierścieniowym żelem)
2. Pełną morfologię krwi z różnicowaniem (1 ml w 3 ml lawendowej górnej probówce z EDTA lub 250 μl w mikropojemniku)
3. Fosfokinaza kreatynowa (0,2 ml w żelu miętowo zielonym lub czerwonym top ze złotym pierścieniem)

4. Białko C-reaktywne (1 ml krwi w miętowo-zielonej lub czerwonej górnej probówce z żółtym pierścieniem żelu; lub EDTA).

   -Jeśli pacjent przyjmuje obecnie statynę, zostanie poproszony o przerwanie stosowania tego środka do czasu zakończenia całego badania.

   - Wreszcie, podczas tej wizyty nastąpi ustalenie harmonogramu kolejnych dni studiów. Dzień nr 1 badanego leku zostanie zaplanowany na 6 dni i do 14 dni po wizycie przesiewowej. Dzień nr 2 badanego leku zostanie zaplanowany 6 dni i maksymalnie 14 dni po Dniu nr 1 badanego leku.

   Badanie lekowe Dzień #1 (około 10 godzin) - Po przybyciu do Oddziału Badań Klinicznych Szpitala Dziecięcego Miłosierdzia pacjent zostanie poddany przesiewowemu badaniu fizykalnemu, w tym ocenie stopnia zaawansowania wg Tannera. W przypadku kobiet zostanie pobrana próbka moczu do testu ciążowego beta-ludzka gonadotropina kosmówkowa.

   - Po dopuszczeniu do udziału w badaniu pacjent będzie miał założoną na stałe kaniulę silastyczną (21 lub 24 Ga) umieszczoną w żyle obwodowej dłoni lub przedramienia w celu ponownego pobrania krwi w celu wsparcia celów farmakokinetycznych badania. Drożność tej kaniuli będzie utrzymywana przez cały okres badania przy użyciu sterylnego roztworu heparynizowanej soli fizjologicznej.

   - Pojedynczą doustną dawkę symwastatyny lub prawastatyny należy przyjąć ze 150 ml wody z kranu po nocnym poście. Kolejność podawania statyn zostanie wybrana losowo między dwiema wizytami badawczymi. Przez dwie godziny po podaniu badanego artykułu badani pozostaną na czczo i będą mogli pić tylko małe łyki wody. Standardowy, odpowiedni do wieku posiłek zdrowy dla serca zostanie podany 2 godziny po podaniu statyny, a przekąska zostanie podana po południu w dniu badania. Woda będzie dozwolona ad libitum.

   • W przypadku, gdy pacjent zwymiotuje w ciągu 2 godzin od przyjęcia badanego leku dnia nr 1, zostanie wycofany z badania na ten dzień i przełożony. Temat zostanie przełożony do 14 dni po wizycie przesiewowej. Jeśli nie można ich przełożyć w ciągu 14 dni od pierwotnych laboratoriów przesiewowych, laboratoria zostaną ponownie wylosowane tego dnia. W przypadku, gdy pacjent zwymiotuje w ciągu 2 godzin od przyjęcia badanego leku w dniu nr 2, zostanie on wycofany z badania na ten dzień i przełożony. Pacjenta można przełożyć na 6 dni i do 14 dni po Dniu Badanego Leku nr 1. Jeśli minęło więcej niż 14 dni, ale nie więcej niż 21 dni od Dnia Badanego Leku nr 1, pacjenta można przełożyć na inny termin, ale należy przeprowadzić powtórne badania przesiewowe w laboratoriach.
   • Z założonej na stałe kaniuli żylnej zostaną pobrane seryjne próbki krwi żylnej (każda po 1,5 ml) w celu zmierzenia poziomu leku w osoczu i metabolitu przyjętego leku przed spożyciem (czas 0) oraz po 0,5, 1, 1,5, 2, 3, 4, 6 i 8 godzin po spożyciu. W przypadku utraty drożności założonej na stałe kaniuli, zostanie ona umieszczona lub alternatywnie, pozostałe próbki krwi zostaną uzyskane przez sterylne nakłucie żyły na życzenie badanego. Po pobraniu próbki zostaną umieszczone w szklanych probówkach zawierających EDTA potasowy i delikatnie wymieszane przez wielokrotne odwracanie. Następnie zostaną natychmiast odwirowane w temperaturze 4ºC przez łącznie 10 minut przy 600 g (~2000 obr./min) i natychmiast umieszczone w łaźni lodowej w celu przetransportowania do Laboratorium Farmakologii Klinicznej, gdzie zostaną przetworzone. Składnik komórkowy próbek z czasu 0 zostanie zachowany do przyszłej izolacji DNA leukocytów. Składnik osocza z każdej powtarzanej próbki krwi uzyskanej w celu wsparcia celów farmakokinetycznych badania zostanie usunięty przez ręczne odessanie i przeniesiony do oznakowanej, polipropylenowej kriofiolki, która zostanie umieszczona w temperaturze -80ºC, gdzie będzie przechowywana do czasu analizy.
   • Po pobraniu próbki 8 godzin po podaniu dawki zostanie pobrana krew (5,2 ml) do laboratoriów bezpieczeństwa badania, kaniula dożylna zostanie usunięta, a pacjent zostanie wypisany z oddziału farmakologii klinicznej po dniu badania leku nr 2 potwierdzone z osobą badaną i/lub rodzicem(ami) osoby badanej.

   Drugi dzień badania leku (około 10 godzin) — Po upływie co najmniej 6 dni i maksymalnie 14 dni po pierwszym dniu przyjęcia leku (okres wypłukiwania) pacjent zostanie przewieziony z powrotem do Jednostki Badań Klinicznych CMH w celu przeprowadzenia kolejnej farmakokinetyki pojedynczej dawki badanie. Po badaniu fizykalnym i wprowadzeniu obwodowej kaniuli dożylnej, alternatywna statyna, która nie została podana w pierwszym dniu badania leku, zostanie podana ze 150 ml wody z kranu po całonocnym poście. Zastosowany zostanie ten sam schemat pobierania krwi, jak opisano dla dnia badania nr 1. Krew do laboratoriów bezpieczeństwa badania zostanie pobrana po pobraniu ostatniej próbki na obecność leku, a następnie pacjent zostanie wypisany z Jednostki Badań Klinicznych CMH. Całkowitą ilość krwi potrzebną do całego badania podsumowano w poniższej tabeli.

   Dzień badania Ilość wizyt przesiewowych krwi 5,2 ml (laboratoria przesiewowe) Badanie leków Dzień nr 1 13,5 ml (laboratoria badań PK) 5,2 ml (laboratoria bezpieczeństwa) Badanie leków Dzień nr 2 13,5 ml (laboratoria badań PK) 5,2 ml (laboratoria bezpieczeństwa)

   Łącznie 42,6 ml (w okresie 1 miesiąca)

   Tydzień po zakończeniu drugiego dnia badania leku lub w przypadku wcześniejszego wycofania leku, rodzina zostanie powiadomiona telefonicznie w celu przeszukania pod kątem zdarzeń niepożądanych po badaniu, zgodnie z definicją w sekcji 5.

   1.10. Randomizacja Proponowane badanie to badanie farmakokinetyczne z zastosowaniem pojedynczej dawki, porównujące dwie statyny, symwastatynę i prawastatynę. Kolejność podawania dwóch statyn zostanie wybrana losowo dla każdego uczestnika badania.

   Apteka Szpitala Dziecięcego Miłosierdzia ds. Leków (IDS) będzie odpowiedzialna za procedurę randomizacji i będzie sprawować kontrolę nad sekwencją randomizacji. Jest to badanie otwarte, więc ani badacze, ani badani nie będą zaślepieni co do randomizacji sekwencji.

2. Ocena laboratorium 2.1. Analiza leków i metabolitów Po przyjęciu pojedynczej dawki statyny odpowiedni lek i jego metabolity zostaną określone ilościowo. Prawastatyna jest podawana w aktywnej, otwartej postaci kwasu i nie ma żadnych znacząco aktywnych metabolitów 27. Najczęstszym nieaktywnym metabolitem izolowanym z osocza jest 3'α-izoprawastatyna, która powstaje nieenzymatycznie pierwotnie w kwaśnych warunkach żołądka 53. Dlatego po przyjęciu prawastatyny zostaną ocenione seryjne poziomy kwasu prawastatyny i 3'alfa-izoprawastatyny w osoczu. (Dodatkowe szczegóły dotyczące częstotliwości pobierania próbek osocza przedstawiono w punkcie 1.9). Symwastatyna podawana jest w postaci nieaktywnej, laktonowej i ulega hydrolizie do głównego czynnego metabolitu, jakim jest kwas beta-hydroksysymwastatyny. Mniejsze metabolity to 6'-hydroksysimwastatyna, 3'hydroksysimwastatyna, 3''-hydroksysimwastatyna, 6'egzometyleno-simwastatyna, 6'-hydroksymetylo-simwastatyna i 6'-hydroksykarbonylo-simwastatyna 25. Kilka z tych metabolitów, po przekształceniu do ich postaci kwasowych, wykazało aktywność u psów, ale wydaje się, że gromadzą się w żółci i są mało wykrywalne w osoczu 54. Dlatego w tym badaniu oceniane będą tylko seryjne stężenia symwastatyny i kwasu symwastatyny w osoczu. (Dodatkowe szczegóły dotyczące częstotliwości pobierania próbek osocza przedstawiono w punkcie 5.0).

Strategie analityczne oznaczania symwastatyny i kwasu symwastatyny:

Symwastatyna i kwas symwastatyny zostaną oznaczone przy użyciu wysokowydajnej metody ekstrakcji ciecz/ciecz wspomaganej wysalaniem (SALLE) z acetonitrylem i solami zgodnymi ze spektrometrią mas do jednoczesnej analizy LC-MS/MS, jak opisano wcześniej 55. Ta metoda została gruntownie zwalidowana zgodnie z wytycznymi FDA, a co ważniejsze, wykazuje minimalną interkonwersję symwastatyny i kwasu symwastatyny podczas przygotowywania próbki. Krótki zarys metody jest następujący. Próbki osocza będą rozmrażane w temperaturze 4ºC w łaźni wodnej o kontrolowanej temperaturze i utrzymywane w tej temperaturze podczas procedury, aby zminimalizować interkonwersję analitu. Do porcji próbki dodaje się stabilny, deuterowany, znakowany izotopem wewnętrzny wzorzec symwastatyny i kwasu symwastatyny (Toronto Research Chemicals), aby umożliwić spektrometrię mas z rozcieńczeniem stabilnych izotopów. Następnie próbkę ekstrahuje się metodą SALLE przy pH 4,5, aby zminimalizować wzajemną konwersję symwastatyny między formą laktonową i kwasową. Ekstrakt jest stabilny w autosamplerze przez 33 godziny w temperaturze 4ºC i zostanie poddany analizie metodą LC-MS/MS w tym czasie. Analiza próbki zostanie przeprowadzona na potrójnym kwadrupolowym spektrometrze masowym Waters TQ-S połączonym z chromatografem cieczowym Waters Acquity Ultra Performance (UPLC-MS-MS), z wykorzystaniem warunków chromatograficznych (w tym kolumnowych) zgodnie z wcześniejszym opisem 55. Symwastatyna i jej wzorzec wewnętrzny będą monitorowane w trybie jonów dodatnich z wykorzystaniem odpowiednio przejść 450-285 i 453-285 adduktów metyloamoniowych. Kwas symwastatyny i jego wzorzec wewnętrzny będą mierzone w trybie jonów ujemnych ze względu na słabą jonizację w trybie dodatnim. Przejścia dla tych analitów będą wynosić 435-319 i 438-319. Wszystkie próbki osocza będą analizowane w dwóch powtórzeniach dla każdego przedziału czasowego pobierania próbek, aby zapewnić ważność. Pozostałe osocze niewykorzystane w analizie będzie przechowywane w laboratorium farmakologii klinicznej w dedykowanych zamrażarkach/lodówkach, jak określono w Repozytorium CPR. Wykorzystanie tych próbek do dalszych badań będzie zależało od decyzji dyrektora CPR zgodnie z protokołem CPR (CMH IRB# 12040220).

Strategie analityczne oznaczania prawastatyny i laktonu prawastatyny:

W literaturze opisano wiele strategii analitycznych służących do oznaczania prawastatyny i laktonu prawastatyny 56-59, jednak wiele z nich jest pracochłonnych i nie jest tak wydajnych, jak metodologia przedstawiona dla symwastatyny. Ze względu na podobieństwa strukturalne między symwastatyną i prawastatyną jest wysoce prawdopodobne, że metodę analityczną symwastatyny można dostosować do analizy prawastatyny i laktonu prawastatyny przy minimalnych zmianach. W mało prawdopodobnym przypadku, gdy metody symwastatyny nie można dostosować do analizy laktonów prawastatyny i prawastatyny, wykorzystamy metodę przedstawioną przez Vlckova i wsp. 60.

3 Ocena farmakokinetyki 3.1 Parametry farmakokinetyczne Analizy farmakokinetyczne zostaną przeprowadzone przy użyciu oprogramowania Kinetica wersja 5.0 (Thermo Electron, Filadelfia, PA). Dane o stężeniu prawastatyny, symwastatyny i metabolitu w osoczu w funkcji czasu zostaną dopasowane do krzywej przy użyciu algorytmu oddzielania w celu wygenerowania wstępnych jednowykładniczych oszacowań parametrów. Ostateczne oszacowania końcowej stałej szybkości eliminacji (delta z) zostaną określone z iteracyjnego algorytmu liniowej regresji najmniejszych kwadratów. Zastosowane zostanie podejście niezależne od modelu, a interesujące nas parametry zostaną określone w następujący sposób. Indywidualne wartości Cmax i Tmax zostaną uzyskane poprzez bezpośrednie badanie profilu stężenia w osoczu w funkcji czasu. Pole powierzchni pod krzywą zależności stężenia w osoczu od czasu podczas okresu pobierania próbek (AUC0-n) zostanie obliczone przy użyciu mieszanej metody log-liniowej, gdzie n odnosi się do końcowego czasu pobierania próbek z wymiernymi stężeniami leku lub metabolitu. Ekstrapolacja AUC do nieskończoności (AUC0-nieskończoność) zostanie osiągnięta przez zsumowanie AUC0-n + Cpn/delta z, gdzie Cpn jest ostatnim obserwowalnym stężeniem w osoczu obliczonym z dopasowania krzywej końcowego nachylenia stężenia w osoczu vs. krzywa czasowa, a delta z jest pozorną stałą szybkości eliminacji końcowej. Okres półtrwania absorpcji i eliminacji (t½) zostanie obliczony na podstawie początkowej i końcowej części krzywej stężenia w osoczu w funkcji czasu dla każdego interesującego analitu. W przypadku metabolitów, odpowiednim okresem półtrwania będzie termin stosowany do określenia tworzenia metabolitów.

4 Plan statystyczny 4.1 Metody statystyczne Dane farmakokinetyczne prawastatyny i symwastatyny dla badanej kohorty zostaną wstępnie zbadane przy użyciu standardowych statystyk opisowych (tj. średniej arytmetycznej, średniej geometrycznej, odchylenia standardowego, współczynnika zmienności, 95% granic ufności). Analiza modelu wariancji z powtarzanymi pomiarami zostanie wykorzystana do określenia skutków leczenia, okresu i sekwencji dla wynikowych oszacowań pierwszorzędowych i drugorzędowych parametrów farmakokinetycznych. Parametry farmakokinetyczne odzwierciedlające ekspozycję (Cmax, AUC0-n, AUC0-nieskończoność) zostaną przekształcone w logarytm przy użyciu logarytmu naturalnego, 90% przedziałów ufności dla różnicy w obliczonych średnich i antylogarytm granic ufności ocenionych w stosunku do ustalone kryteria biorównoważności określone w naszych obliczeniach mocy. Granicą istotności przyjętą dla wszystkich analiz statystycznych będzie alfa = 0,05.

Udział różnych alleli w zmienności parametrów farmakokinetycznych prawastatyny i symwastatyny zostanie zbadany za pomocą analizy regresji wielokrotnej. Klasa genotypu (nie-nosiciele i nosiciele) będzie traktowana jako zmienne niezależne. W celu nr 1 zmienne farmakokinetyczne dla każdego leku zostaną porównane między osobami nie będącymi nosicielami a nosicielami wariantów alleli przy użyciu niezależnego testu t. Podobnie w przypadku celu nr 2 stosunek każdego parametru farmakokinetycznego u nosicieli do niebędących nosicielami (np. AUCnośnik/AUCnienośnik) dla prawastatyny zostaną porównane z odpowiednimi stosunkami po podaniu symwastatyny. Wszystkie analizy zostaną przeprowadzone w SPSS w wersji 18.0 (SPSS, Chicago, IL).

4.2 Populacje pacjentów do analizy Wcześniejsze badania wykazały, że wysoce hydrofilowe statyny, takie jak prawastatyna, są bardziej zależne od transportera OATP1B1 w porównaniu do bardziej lipofilowych statyn, takich jak symwastatyna 41, 45. Teoretyzuje się, że górny region promotora (-11187) może mieć wyraźniejszy wpływ na zależność genotyp-fenotyp, jak widać w poprzednim badaniu pediatrycznym 49. Dlatego nasze badanie będzie miało moc obserwowania różnicy dawka-ekspozycja w wariantach allelicznych -11187 i typu dzikiego / typu dzikiego z prawastatyną.

Przewiduje się, że do bazy danych CPR zapisanych zostanie 150 osób spełniających kryteria włączenia. Częstość występowania SNP SLCO1B1 (-11187G>A, 7-8%) z poprzednich badań z udziałem dorosłych 61 sugeruje około 19-22 osób heterozygotycznych (zgodnie z równaniem Hardy'ego Weinberga) w przewidywanej liczbie uczestników z bazy danych RKO. Przy 90% udziale / 10% współczynniku utraty byłoby około 17-20 osób.

Na podstawie wcześniejszych danych dotyczących farmakokinetyki prawastatyny u dorosłych w wariantach alleli opisanych powyżej 45, próbka o wielkości 18 w każdej grupie (genotyp -11187G>A i kontrola typu dzikiego) będzie miała 80% mocy do wykrycia różnicy w średnia -101,0 w AUC (0-∞) (różnica między średnią grupy 1, m1, wynoszącą 102,7 a średnią grupy 2, m2, wynoszącą 203,7, co stanowi prawie dwukrotną różnicę) przy założeniu, że standard grupy 1 odchylenie standardowe, s1, wynosi 69,1, a odchylenie standardowe grupy 2, s2, wynosi 126,4 przy użyciu dwugrupowego testu t Satterthwaite'a z dwustronnym poziomem istotności 0,050.

Dlatego nasza docelowa wielkość próby to 18 osobników z allelem SLCO1B1 -11187G>A. W przypadku kontroli dobranych pod względem wieku i płci całkowita wielkość próby wynosi 36 osób.

5. Zdarzenia niepożądane Zdarzenie niepożądane definiuje się jako każdą niezamierzoną zmianę w strukturze ciała (objawy) lub funkcji organizmu (objawy), niezależnie od tego, czy jest uważana za związaną z lekiem, czy nie. Przez cały czas trwania badania uczestnicy zostaną poinstruowani, aby zgłaszać wszystkie zdarzenia niepożądane. Wszystkie zdarzenia niepożądane, dobrowolne, wywołane lub odnotowane w badaniu fizykalnym, będą rejestrowane w trakcie badania (tj. badanie). Nasilenie zdarzeń niepożądanych zostanie sklasyfikowane jako łagodne, umiarkowane lub ciężkie zgodnie z wytycznymi FDA.

Badacz określi związek zdarzenia niepożądanego z badanym lekiem, stosując system czterech kategorii (niepowiązany, mało prawdopodobny, podejrzewany i prawdopodobny) zgodnie z wytycznymi FDA. Poważnym działaniem niepożądanym związanym ze stosowaniem leku jest każde zdarzenie niepożądane w materiale testowym, które wystąpiło przy dowolnej dawce i które skutkuje dowolnymi wynikami określonymi przez FDA.

Nieoczekiwane działanie niepożądane to każde działanie niepożądane, którego charakter, nasilenie lub częstość występowania nie jest określone w aktualnie zatwierdzonej etykiecie leku lub w innym miejscu ogólnego planu badania. Wszelkie poważne i nieoczekiwane niepożądane zdarzenia kliniczne, niezależnie od tego, czy są związane z badanym lekiem, czy nie, zostaną zgłoszone ustnie głównym badaczom w ciągu 24 godzin od powiadomienia.

Następnie wypełniony zostanie formularz zgłoszenia poważnego zdarzenia niepożądanego (SAE) i powiadomiona zostanie komisja ds. przeglądu szpitali i klinik Children's Mercy Institutional Review Board (IRB). Do tego formularza dołączone zostanie oświadczenie Głównego Badacza zawierające szczegółowe informacje na temat działania niepożądanego. Raporty laboratoryjne i inne raporty dotyczące bezpieczeństwa zostaną przekazane, gdy tylko staną się dostępne.

UWAGA: Termin „ciężki” jest często używany do opisania intensywności (dotkliwości) określonego zdarzenia (jak w przypadku łagodnego, umiarkowanego lub ciężkiego zawału mięśnia sercowego); samo zdarzenie może jednak mieć stosunkowo niewielkie znaczenie medyczne (takie jak silny ból głowy). To nie to samo, co „poważne”, które opiera się na wyniku uczestnika/wydarzenia lub kryteriach działania zwykle związanych ze zdarzeniami, które stanowią zagrożenie dla życia lub funkcjonowania uczestnika. Powaga (nie intensywność) służy jako przewodnik przy definiowaniu obowiązków sprawozdawczych regulacyjnych.

Aspekty etyczne To badanie zostanie przeprowadzone zgodnie z amerykańskimi i międzynarodowymi standardami Dobrej Praktyki Klinicznej (przepisy FDA 21 CFR 312 dla badań IND i wytyczne FDA E6) dla wszystkich badań. Przestrzegane będą również obowiązujące przepisy rządowe oraz zasady i procedury badawcze University of Missouri-Kansas City/Children's Mercy Hospital and Clinics.

Niniejszy protokół i wszelkie poprawki zostaną przedłożone Instytucjonalnej Radzie Rewizyjnej Szpitala i Kliniki Dziecięcej Miłosierdzia (IRB) w celu formalnego zatwierdzenia przeprowadzenia badania. Decyzja IRB dotycząca prowadzenia badania zostanie podjęta na piśmie do badacza.

Wszyscy uczestnicy i rodzice/opiekunowie prawni, w stosownych przypadkach, otrzymają formularz pozwolenia/zgody/zgody opisujący to badanie i zawierający wystarczające informacje, aby uczestnicy mogli podjąć świadomą decyzję o udziale w tym badaniu. Ten formularz zgody zostanie przedłożony wraz z protokołem do przeglądu i zatwierdzenia przez IRB. Formalna zgoda/pozwolenie/zgoda zostanie uzyskana przy użyciu formularzy zatwierdzonych przez IRB, zanim pacjent zostanie poddany jakiejkolwiek procedurze badawczej. Formularz zgody/pozwolenia/zgody musi być podpisany przez uczestnika lub prawnie akceptowalną osobę zastępczą oraz wyznaczony przez badacza pracownik naukowy uzyskujący zgodę.