Statin-Verteilung

Das ultimative Ziel dieser vorgeschlagenen Untersuchung ist es, die Rolle der genetischen Variation und Entwicklung in Schlüsseltransportern für die Dosis-Expositions-Beziehung zweier häufig verwendeter Statin-Medikamente bei Kindern festzustellen. Diese Studie ist der erste Schritt in einer Reihe von Untersuchungen, die darauf abzielen, die Mechanismen hinter Variationen in der physiologischen Reaktion, der klinischen Wirksamkeit und dem signifikanten Risiko unerwünschter Wirkungen zu bestimmen, die die Statin-Medikamente bei Kindern und Jugendlichen umgeben.

Forschungsdesign und Methoden

1. Versuchsdesign 1.1. Prüfsubstanzen Pravastatin 20 mg Tablette (Alter 8–13 Jahre), 40 mg Tablette (>14 Jahre) Simvastatin 10 mg Tablette (Alter 8–17), 20 mg (>17 Jahre) Kommerzielle Lieferungen von Pravastatin und Simvastatin, die von der FDA zugelassen sind Anwendung bei pädiatrischer Dyslipidämie verwendet werden. Pravastatin und Simvastatin aus derselben Quelle und Charge werden für alle Probanden verwendet. Die oben angegebenen Dosen wurden gemäß früheren Daten von Erwachsenen und Kindern ausgewählt 26, 28-32, 41 und stimmen mit der aktuellen Kennzeichnung von Pravastatin und Simvastatin überein. Obwohl Fixdosen innerhalb eines vordefinierten Altersbereichs verwendet werden, werden die Dosisdaten basierend auf dem Gewicht des Patienten zum Zeitpunkt der Dosierung gewichtskorrigiert (mg/kg) analysiert.

1.2. Risiko/Nutzen Alle Probanden mit einem LDL > 130 mg/dl (95 % Perzentil) kommen für diese Studie in Übereinstimmung mit den aktuellen klinischen Kriterien für eine Statintherapie infrage. Die mit der Teilnahme an dieser pharmakokinetischen Einzeldosisstudie verbundenen Risiken sind angesichts des bekannten Nebenwirkungsprofils für die Studienartikel und der begrenzten Exposition voraussichtlich minimal. Die häufigsten leichten Nebenwirkungen von Statinen sind Kopfschmerzen, Myalgie und gastrointestinale Symptome (Bauchschmerzen, Dyspepsie, Durchfall, Verstopfung). Bei Kindern treten diese Nebenwirkungen jedoch mit der gleichen Häufigkeit wie Placebo auf 14, 15, 18. Seltene Nebenwirkungen umfassen eine Erhöhung der hepatischen Transaminasen und Myopathie, aber diese werden im Allgemeinen bei chronischer Behandlung beobachtet. Darüber hinaus wurden bisher keine Fälle von Leberversagen unter Statinen berichtet 52. Es besteht auch ein geringes Risiko im Zusammenhang mit der Platzierung des intravenösen (IV) Katheters, der verwendet wird, um serielle Blutproben für pharmakokinetische Analysen und Screening-/Sicherheitslabore zu entnehmen. Schließlich besteht die Gefahr des Verlusts der Vertraulichkeit für die beteiligten Probanden. Methoden zum Schutz von PHI und zur Datenverarbeitung sind speziell in den Abschnitten 4 und 5 des CMH CPR-Protokolls (CMH IRB# 12040220) beschrieben. Alle oben genannten Risiken, die mit dieser nicht-therapeutischen klinischen Studie verbunden sind, sind minimal.

Es gibt keinen direkten Nutzen für die teilnehmenden Probanden, obwohl es in Zukunft einen Nutzen für Kinder geben könnte, da erwartet wird, dass die aus der Studie zu gewinnenden Informationen auf die größere Population von pädiatrischen Patienten, die möglicherweise eine Statinbehandlung benötigen, verallgemeinert werden können. Der Zweck der Studie besteht darin, festzustellen, wie sich genetische Variationen auf die Plasmakonzentrationen von Pravastatin und Simvastatin nach der empfohlenen Dosierung des Arzneimittels bei einer Patientenpopulation auswirken, die zuvor nicht untersucht wurde. Somit könnten mit diesem Wissen zukünftige Protokolle entwickelt werden, um die Dosierung für pädiatrische Probanden mit den oben genannten SNPs, die Pravastatin oder Simvastatin einnehmen, effektiv zu „personalisieren“, wodurch die Wirksamkeit und Sicherheit für den einzelnen Patienten verbessert wird.

1.3. Studiendesign/-typ Dies wird eine monozentrische, offene, randomisierte Crossover-Studie bei Patienten mit Dyslipidämie sein, die die Pharmakokinetik von Pravastatin und Simvastatin bei Patienten mit mehr als oder gleich einer Allelvariante im SLCO1B1-Gen (-11187 und/oder c.521) an Patienten mit dem Wildtyp/Wildtyp-Genotyp.

1.4. Populationsstichprobe Auf die Datenbank des CMH Cardiology Pharmacogenomics Repository (CPR) (CMH IRB# 12040220) wird zugegriffen, um die Patienten zu bestimmen, die die Einschlusskriterien erfüllen. Sobald die Zielpopulation und ein gleicher Satz von alters-, geschlechts- und Tanner-Stadium-abgestimmten Kontrollen identifiziert sind, werden die Patienten eingeladen, an einer offenen, randomisierten Crossover-Pharmakokinetikstudie mit Pravastatin und Simvastatin in einem Zentrum teilzunehmen .

1.5. Probandenrekrutierung Sobald eine Zielpopulation und ein gleicher Satz alters- und geschlechtsangepasster Kontrollen aus der CPR ermittelt wurden, werden potenzielle Teilnehmer über die Studie informiert. Der Erstkontakt erfolgt über ein vorbereitetes Telefonskript. Diejenigen, die einer Teilnahme zustimmen, werden für einen Screening-Besuch in der CMH Clinical Research Unit eingeplant. Bei diesem Besuch wird die Studie dem Patienten/der Familie des Patienten erklärt, die Erlaubnis/Einwilligung/Zustimmung wird eingeholt, eine körperliche Untersuchung (einschließlich Tanner-Klassifizierung) und Screening-Labortests werden durchgeführt. Teilnehmer, für die die Erlaubnis/Einwilligung/Einwilligung eingeholt wurde und die Einschlusskriterien erfüllt sind, werden innerhalb von 6 bis 14 Tagen für den ersten Tag der Studienmedikation zur CMH Clinical Research Unit zurückkehren.

1.6. Austritt der Studienteilnehmer Die Teilnahme an der pharmakokinetischen Studie zu Pravastatin und Simvastatin ist völlig freiwillig. Als Teil des informierten Genehmigungs-/Zustimmungs-/Zustimmungsprozesses; Die Probanden werden darüber informiert, dass sie ihre Erlaubnis/Einwilligung/Einwilligung jederzeit widerrufen können. Wenn die Studienteilnehmer zu irgendeinem Zeitpunkt soziale, philosophische, religiöse oder familiäre Bedenken im Zusammenhang mit der Studie haben, können sie sich entscheiden, die Erlaubnis/Zustimmung/Einwilligung zu widerrufen.

Ein Studienteilnehmer oder ein autorisierter Dritter (PCP) kann die Erlaubnis/Einwilligung/Einwilligung jederzeit widerrufen. Der Antrag auf Widerruf der Erlaubnis/Zustimmung/Einwilligung kann mündlich oder schriftlich erfolgen und an das Studienpersonal gerichtet werden (wie im Erlaubnis-/Zustimmungs-/Einwilligungsformular angegeben). Das Studienpersonal wird angemessene Schritte unternehmen, um den Willen des Studienteilnehmers zu respektieren und sicherzustellen, dass der Studienteilnehmer in der Lage ist, sich zurückzuziehen, ohne Kompromisse bei der persönlichen Integrität oder der medizinischen Bewertung/Behandlung einzugehen. Falls die Erlaubnis/Einwilligung/Zustimmung zur Fortsetzung nach teilweiser Sammlung von Proben oder Daten zurückgezogen wird, werden nur vorhandene Daten analysiert und tabelliert. Der Proband kann von den Prüfärzten aus der Studie genommen werden, wenn zu irgendeinem Zeitpunkt nach Einschätzung der Prüfärzte die fortgesetzte Teilnahme des Probanden mit der Entstehung unerwarteter Risiken (z. B. einer spät einsetzenden Überempfindlichkeitsreaktion nach Verabreichung des Studienartikel).

1.7. Studienbesuche der Studienteilnehmer Die Studie umfasst insgesamt drei Studienbesuche. Ein Screening-Besuch und 2 Besuche am Tag der Arzneimittelstudie.

Screening-Besuch (ca. 1 Stunde) – Bei der Ankunft zum Screening-Besuch wird die Studie mit dem teilnehmenden Probanden und den Eltern/Erziehungsberechtigten des Probanden, falls zutreffend, eingehend überprüft. Ihnen wird ausreichend Zeit eingeräumt, um das Genehmigungs-/Zustimmungs-/Zustimmungsformular zu überprüfen, alle Fragen zu beantworten und Bedenken auszuräumen. Wenn sie der Teilnahme zustimmen, unterzeichnen sie das Erlaubnis-/Zustimmungs-/Zustimmungsformular.

-Nach Genehmigung/Zustimmung/Zustimmung werden Screening-Labore ausgelost. Wenn der Patient zu diesem Zeitpunkt nicht in der Lage ist, die Studienlabore zu absolvieren, wird ein Termin vereinbart, an dem diese mindestens 1 Tag vor Studienmedikamententag Nr. 1 durchgeführt werden. Die Laborauswertung besteht aus Folgendem.

1. Forschungschemie-Panel (Natrium, Kalium, Chlorid, Kohlendioxid, Anionenlücke, Calcium, Phosphor, Magnesium, Glukose, BUN, Kreatinin, Gesamtprotein, Albumin, Bilirubin, ALT, AST, alkalische Phosphatase, GGT, LDH, Cholesterin, Harnsäure und Triglycerid) (3 ml Blut in mintgrünem oder rotem Deckel mit gelbem Ringgelröhrchen)
2. Großes Blutbild mit Differential (1 ml in einem 3-ml-EDTA-Röhrchen mit lavendelfarbenem Verschluss oder 250 μl in einem Microtainer)
3. Kreatin-Phosphokinase (0,2 ml in Gel mit mintgrüner oder roter Spitze mit goldenem Ring)

4. C-reaktives Protein (1 ml Blut in einem mintgrünen oder roten Röhrchen mit gelbem Ringgel; oder EDTA).

   - Wenn der Patient derzeit ein Statin einnimmt, wird er gebeten, dieses Mittel bis nach Abschluss der gesamten Studie abzusetzen.

   - Abschließend erfolgt bei diesem Besuch die Terminierung der nachfolgenden Studientage. Study Drug Day #1 wird 6 Tage und bis zu 14 Tage nach dem Screening-Besuch angesetzt. Der Studienmedikamententag Nr. 2 wird 6 Tage und bis zu 14 Tage nach dem Studienmedikamententag Nr. 1 angesetzt.

   Tag Nr. 1 der Arzneimittelstudie (ungefähr 10 Stunden) – Nach der Ankunft in der klinischen Forschungseinheit des Children's Mercy Hospital wird der Proband einer körperlichen Screening-Untersuchung einschließlich Tanner-Staging unterzogen. Bei Frauen wird eine Urinprobe für den Beta-Human-Choriongonadotropin-Schwangerschaftstest entnommen.

   -Sobald die Zulassung zur Teilnahme erteilt wurde, wird dem Probanden eine Silastic-Verweilkanüle (21 oder 24 Ga) in einer peripheren Vene an der Hand oder am Unterarm platziert, um wiederholt Blutproben zu entnehmen, um die pharmakokinetischen Ziele der Studie zu unterstützen. Die Durchgängigkeit dieser Kanüle wird während des gesamten Studienzeitraums unter Verwendung einer sterilen Lösung aus heparinisierter Kochsalzlösung aufrechterhalten.

   -Eine orale Einzeldosis von entweder Simvastatin oder Pravastatin wird nach einer nächtlichen Fastenzeit mit 150 ml Leitungswasser eingenommen. Die Reihenfolge der verabreichten Statine wird zwischen den beiden Studienbesuchen randomisiert. Für zwei Stunden nach der Verabreichung der Studienartikel bleiben die Probanden nüchtern, wobei nur kleine Schlucke Wasser erlaubt sind. Eine standardmäßige, altersgerechte, herzgesunde Mahlzeit wird 2 Stunden nach der Statinverabreichung serviert, und am Nachmittag des Studientages wird ein Snack serviert. Wasser ist ad libitum erlaubt.

   • Für den Fall, dass der Patient innerhalb von 2 Stunden nach der Einnahme des Studienmedikaments Tag #1 erbricht, wird er für diesen Tag aus der Studie genommen und neu geplant. Das Thema wird bis zu 14 Tage nach dem Screening-Besuch nachgeholt. Wenn sie nicht innerhalb von 14 Tagen nach den ursprünglichen Screening-Labs verschoben werden können, werden die Labs an diesem Tag neu gezogen. Für den Fall, dass der Patient innerhalb von 2 Stunden nach der Einnahme des Studienmedikaments Tag #2 erbricht, wird er für diesen Tag aus der Studie genommen und neu geplant. Der Studienteilnehmer kann 6 Tage und bis zu 14 Tage nach Studienmedikamententag Nr. 1 verschoben werden. Wenn seit Tag 1 des Studienmedikaments mehr als 14 Tage, aber nicht mehr als 21 Tage vergangen sind, kann der Studienteilnehmer verschoben werden, es müssen jedoch wiederholt Screening-Labore durchgeführt werden.
   • Serielle venöse Blutproben (jeweils 1,5 ml) werden aus der Venenverweilkanüle entnommen, um die Plasmaspiegel des Arzneimittels und der Arzneimittelmetaboliten des eingenommenen Arzneimittels vor der Einnahme (Zeitpunkt 0) und bei 0,5, 1, 1,5, 2, 3, 4, 6 und 8 Stunden nach Einnahme. Sollte die Durchgängigkeit der Verweilkanüle verloren gehen, wird sie entweder platziert oder alternativ werden verbleibende Blutproben durch sterile Venenpunktion auf Wunsch des Studienteilnehmers gewonnen. Nachdem die Proben entnommen wurden, werden sie in Glasröhrchen mit Kalium-EDTA gegeben und durch wiederholtes Umdrehen vorsichtig gemischt. Sie werden dann sofort bei 4 °C für insgesamt 10 Minuten bei 600 g (~2000 U/min) zentrifugiert und sofort in ein Eisbad gelegt, um zum Labor für klinische Pharmakologie transportiert zu werden, wo sie verarbeitet werden. Die zelluläre Komponente der Proben zum Zeitpunkt 0 wird für die zukünftige Isolierung von Leukozyten-DNA aufbewahrt. Die Plasmakomponente jeder der wiederholten Blutproben, die zur Unterstützung der pharmakokinetischen Ziele der Studie entnommen wurden, wird durch manuelles Absaugen entfernt und in ein etikettiertes Polypropylen-Kryoröhrchen überführt, das bei -80 °C gelagert wird, wo es bis zur Analyse gelagert wird.
   • Sobald die Probe 8 Stunden nach der Verabreichung genommen wurde, wird Blut (5,2 ml) für die Studiensicherheitslabore entnommen, die IV-Kanüle wird entfernt und der Patient wird nach dem zweiten Tag der Arzneimittelstudie aus der Abteilung für klinische Pharmakologie entlassen mit dem Studienteilnehmer und/oder den Eltern des Teilnehmers bestätigt.

   Tag 2 der Arzneimittelstudie (ungefähr 10 Stunden) – Nach mindestens 6 Tagen und bis zu 14 Tagen nach dem ersten Tag der Arzneimitteleinnahme (Auswaschphase) wird das Subjekt für eine weitere Einzeldosis-Pharmakokinetik in die CMH Clinical Research Unit zurückgebracht lernen. Nach einer körperlichen Untersuchung und dem Einführen einer peripheren IV-Kanüle wird das alternative Statin, das am ersten Studientag nicht verabreicht wurde, mit 150 ml Leitungswasser nach nächtlichem Fasten verabreicht. Es wird das gleiche Blutentnahmeschema wie für Studientag Nr. 1 beschrieben verwendet. Blut für die Studiensicherheitslabore wird entnommen, nachdem die letzte Probe des Arzneimittelspiegels entnommen wurde, und der Patient wird dann aus der CMH Clinical Research Unit entlassen. Die für die gesamte Studie erforderliche Gesamtblutmenge ist in der folgenden Tabelle zusammengefasst.

   Studientag Menge des Blutuntersuchungsbesuchs 5,2 ml (Screening-Labore) Tag 1 der Arzneimittelstudie 13,5 ml (PK-Studienlabors) 5,2 ml (Sicherheitslabors) Tag 2 der Arzneimittelstudie 13,5 ml (PK-Studienlabors) 5,2 ml (Sicherheitslabors)

   Insgesamt 42,6 ml (über einen Zeitraum von 1 Monat)

   Eine Woche nach Abschluss des Arzneimittelstudientages Nr. 2 oder im Falle eines vorzeitigen Entzugs wird die Familie telefonisch kontaktiert, um nach unerwünschten Ereignissen nach der Studie, wie in Abschnitt 5 definiert, zu suchen.

   1.10. Randomisierung Bei der vorgeschlagenen Studie handelt es sich um eine pharmakokinetische Einzeldosisstudie, in der zwei Statine, Simvastatin und Pravastatin, verglichen werden. Die Reihenfolge der Verabreichung der beiden Statine wird für jeden Studienteilnehmer randomisiert.

   Die Apotheke des Children's Mercy Hospital Investigational Drug Service (IDS) ist für das Randomisierungsverfahren verantwortlich und behält die Kontrolle über die Sequenz-Randomisierung. Dies ist eine Open-Label-Studie, sodass weder die Ermittler noch die Probanden bezüglich der Sequenz-Randomisierung verblindet werden.

2. Laborauswertung 2.1. Wirkstoff- und Metabolitenanalyse Nach Einnahme einer Statin-Einzeldosis werden der entsprechende Wirkstoff und seine Metaboliten quantifiziert. Pravastatin wird in seiner aktiven, offenen Säureform verabreicht und hat keine signifikant aktiven Metaboliten 27. Der häufigste inaktive Metabolit, der im Plasma isoliert wird, ist 3'α-Isopravastatin und wird nicht-enzymatisch primär unter den sauren Bedingungen des Magens gebildet 53. Daher werden nach der Einnahme von Pravastatin serielle Plasmaspiegel von Pravastatinsäure und 3'-Alpha-Isopravastatin bestimmt. (Weitere Einzelheiten zu den Intervallen der Plasmaprobenentnahme sind in Abschnitt 1.9 aufgeführt). Simvastatin wird in seiner inaktiven Lactonform verabreicht und hydrolysiert zum aktiven Hauptmetaboliten, der Beta-Hydroxy-Simvastatinsäure. Nebenmetaboliten sind 6'-Hydroxy-Simvastatin, 3'-Hydroxy-Simvastatin, 3''-Hydroxy-Simvastatin, 6'-Exomethylen-Simvastatin, 6'-Hydroxymethyl-Simvastatin und 6'-Hydroxycarbonyl-Simvastatin 25. Einige dieser Metaboliten, wenn sie in ihre sauren Formen umgewandelt werden, haben Aktivitäten bei Hunden berichtet, scheinen sich aber in der Galle anzureichern, wobei im Plasma nur wenig nachweisbar ist 54. Daher werden in dieser Studie nur serielle Plasmaspiegel von Simvastatin und Simvastatinsäure bewertet. (Weitere Einzelheiten zu den Intervallen der Plasmaprobenentnahme sind in Abschnitt 5.0 aufgeführt).

Analytische Strategien zur Bestimmung von Simvastatin und Simvastatinsäure:

Simvastatin und Simvastatinsäure werden unter Verwendung einer Hochdurchsatz-Aussalzungs-unterstützten Flüssig/Flüssig-Extraktion (SALLE)-Methode mit Acetonitril und Massenspektrometrie-kompatiblen Salzen für die gleichzeitige LC-MS/MS-Analyse wie zuvor beschrieben bestimmt 55. Diese Methode wurde umfassend gemäß den FDA-Richtlinien validiert und zeigt, was noch wichtiger ist, eine minimale gegenseitige Umwandlung von Simvastatin und Simvastatinsäure während der Probenvorbereitung. Ein kurzer Überblick über die Methode ist wie folgt. Plasmaproben werden bei 4 °C in einem temperaturkontrollierten Wasserbad aufgetaut und während des Verfahrens auf dieser Temperatur gehalten, um die Umwandlung der Analyten zu minimieren. Zu einem Aliquot der Probe wird ein mit stabilen deuterierten Isotopen markierter interner Standard von Simvastatin und Simvastatinsäure (Toronto Research Chemicals) hinzugefügt, um eine stabile Isotopenverdünnungs-Massenspektrometrie zu ermöglichen. Die Probe wird dann nach dem SALLE-Verfahren bei pH 4,5 extrahiert, um die gegenseitige Umwandlung von Simvastatin zwischen der Lacton- und der Säureform zu minimieren. Der Extrakt ist im Autosampler für 33 Stunden bei 4 °C stabil und wird innerhalb dieses Zeitrahmens mittels LC-MS/MS analysiert. Die Probenanalyse erfolgt auf einem TQ-S-Triple-Quadupol-Massenspektrometer von Waters, das mit einem Waters Acquity Ultra Performance Liquid Chromatograph (UPLC-MS-MS) gekoppelt ist, wobei die chromatographischen Bedingungen (einschließlich Säule) wie zuvor beschrieben verwendet werden 55. Simvastatin und sein interner Standard werden im Positiv-Ionen-Modus unter Verwendung der 450-285- bzw. 453-285-Übergänge der Methylammonium-Addukte überwacht. Simvastatinsäure und ihr interner Standard werden aufgrund der schlechten Ionisierung im positiven Modus im negativen Ionenmodus gemessen. Übergänge für diese Analyten sind 435-319 und 438-319. Alle Plasmaproben werden für jedes Probenahmezeitintervall zweifach getestet, um die Gültigkeit zu gewährleisten. Das restliche Plasma, das nicht für die Analyse verwendet wird, wird im Labor für klinische Pharmakologie in speziellen Gefrierschränken/Kühlschränken gelagert, wie im CPR-Repository beschrieben. Die Verwendung dieser Proben für weitere Studien liegt im Ermessen des CPR-Direktors, wie im CPR-Protokoll (CMH IRB# 12040220) beschrieben.

Analytische Strategien zur Bestimmung von Pravastatin und Pravastatin-Lacton:

In der Literatur wurde eine große Zahl analytischer Strategien zur Bestimmung von Pravastatin und Pravastatin-Lacton beschrieben 56–59, jedoch sind viele davon arbeitsintensiv und haben keinen so hohen Durchsatz wie die für Simvastatin vorgestellte Methodik. Aufgrund der strukturellen Ähnlichkeiten zwischen Simvastatin und Pravastatin ist es sehr wahrscheinlich, dass die Analysemethode für Simvastatin mit minimalen Änderungen für die Analyse von Pravastatin und Pravastatin-Lacton angepasst werden kann. In dem unwahrscheinlichen Fall, dass die Simvastatin-Methode nicht an die Analyse von Pravastatin und Pravastatin-Lacton angepasst werden kann, verwenden wir die von Vlckova et al. vorgestellte Methode 60.

3 Beurteilung der Pharmakokinetik 3.1 Pharmakokinetische Parameter Pharmakokinetische Analysen werden unter Verwendung von Kinetica Version 5.0 (Thermo Electron, Philadelphia, PA) durchgeführt. Pravastatin-, Simvastatin- und Metaboliten-Plasmakonzentrations-gegen-Zeit-Daten werden unter Verwendung eines Peeling-Algorithmus kurvenangepasst, um anfängliche monoexponentielle Parameterschätzungen zu generieren. Endgültige Schätzungen der Endausscheidungsratenkonstante (Delta z) werden aus einem iterativen, linearen Regressionsalgorithmus der kleinsten Quadrate bestimmt. Es wird ein modellunabhängiger Ansatz verwendet und interessierende Parameter werden wie folgt bestimmt. Einzelne Cmax und Tmax werden durch direkte Untersuchung des Plasmakonzentrations-gegen-Zeit-Profils erhalten. Die Fläche unter der Plasmakonzentrations-Zeit-Kurve während des Probenahmezeitraums (AUC0-n) wird nach der gemischt logarithmisch-linearen Methode berechnet, wobei sich n auf die endgültige Probenahmezeit mit quantifizierbaren Arzneimittel- oder Metabolitenkonzentrationen bezieht. Die Extrapolation der AUC auf unendlich (AUC0-unendlich) wird durch die Summierung von AUC0-n + Cpn/delta z erreicht, wobei Cpn die letzte beobachtbare Plasmakonzentration ist, die aus der Kurvenanpassung der terminalen Steigung der Plasmakonzentration vs. Zeitkurve und Delta z ist die scheinbare Konstante der Endausscheidungsrate. Die Absorptions- und Eliminationshalbwertszeit (t½) wird aus den Anfangs- und Endabschnitten der Plasmakonzentration-gegen-Zeit-Kurve für jeden interessierenden Analyten berechnet. Im Fall von Metaboliten ist der entsprechende Halbwertszeitbegriff derjenige, der zur Bezeichnung der Metabolitenbildung verwendet wird.

4 Statistischer Plan 4.1 Statistische Methoden Die pharmakokinetischen Daten von Pravastatin und Simvastatin für die Studienkohorte werden zunächst unter Verwendung von deskriptiven Standardstatistiken (d. h. arithmetisches Mittel, geometrisches Mittel, Standardabweichung, Variationskoeffizient, 95 %-Konfidenzgrenzen) untersucht. Eine Varianzanalyse mit wiederholten Messungen wird verwendet, um Behandlungs-, Perioden- und Sequenzeffekte für die resultierenden primären und sekundären pharmakokinetischen Parameterschätzungen zu bestimmen. Pharmakokinetische Parameter, die die Exposition widerspiegeln (Cmax, AUC0-n, AUC0-unendlich), werden unter Verwendung des natürlichen Logarithmus, der 90 %-Konfidenzintervalle für die Differenz der berechneten Mittelwerte und des Antilogs der Konfidenzgrenzen, die gegen die etablierte Bioäquivalenzkriterien wie in unseren Leistungsberechnungen definiert. Die für alle statistischen Analysen akzeptierte Signifikanzgrenze ist Alpha = 0,05.

Der Beitrag verschiedener Allele zur Variation der pharmakokinetischen Parameter von Pravastatin und Simvastatin wird mit multipler Regressionsanalyse untersucht. Die Genotypklasse (Nichtträger und Träger) wird als unabhängige Variable behandelt. Für Ziel Nr. 1 werden die pharmakokinetischen Variablen für jedes Medikament zwischen Nicht-Trägern und Trägern von Varianten-Allelen unter Verwendung eines unabhängigen t-Tests verglichen. In ähnlicher Weise ist für Ziel Nr. 2 das Verhältnis jedes pharmakokinetischen Parameters in Trägern zu Nichtträgern (z. AUC-Träger/AUC-Nicht-Träger) für Pravastatin werden mit den entsprechenden Verhältnissen nach Verabreichung von Simvastatin verglichen. Alle Analysen werden in SPSS Version 18.0 (SPSS, Chicago, IL) durchgeführt.

4.2 Probandenpopulation(en) für die Analyse Frühere Studien haben gezeigt, dass stark hydrophile Statine wie Pravastatin im Vergleich zu lipophileren Statinen wie Simvastatin stärker vom OATP1B1-Transporter abhängig sind 41, 45. Es wird vermutet, dass die stromaufwärts gelegene Promotorregion (-11187) einen stärkeren Einfluss auf die Genotyp-Phänotyp-Beziehung haben könnte, wie in der vorangegangenen pädiatrischen Studie festgestellt wurde 49. Daher wird unsere Studie darauf ausgelegt sein, einen Dosis-Expositions-Unterschied bei -11187-Allelvarianten und Wildtyp/Wildtyp mit Pravastatin zu beobachten.

Es wird erwartet, dass 150 Probanden in die CPR-Datenbank aufgenommen werden, die die Einschlusskriterien erfüllen. Die Häufigkeit von SLCO1B1-SNPs (-11187G>A, 7–8 %) aus früheren Studien mit Erwachsenen 61 deutet auf etwa 19–22 heterozygote Probanden (gemäß der Hardy-Weinberg-Gleichung) in der erwarteten Anzahl von Teilnehmern aus der CPR-Datenbank hin. Bei einer Teilnahmequote von 90 % und einer Ausfallrate von 10 % gäbe es etwa 17 bis 20 Probanden.

Auf der Grundlage früherer Daten zur Pharmakokinetik von Pravastatin bei Erwachsenen in den oben beschriebenen Varianten-Allelen 45 hat eine Stichprobengröße von 18 in jeder Gruppe (-11187G>A-Genotyp und Wildtyp-Kontrolle) eine Aussagekraft von 80 %, um einen Unterschied zu erkennen Mittelwerte von -101,0 in AUC (0-∞) (die Differenz zwischen einem Mittelwert der Gruppe 1, m1, von 102,7 und einem Mittelwert der Gruppe 2, m2, von 203,7, was fast eine 2-fache Differenz ist), unter der Annahme, dass der Standard der Gruppe 1 gilt Abweichung, s1, ist 69,1 und die Standardabweichung der Gruppe 2, s2, ist 126,4 unter Verwendung eines Zwei-Gruppen-Satterthwaite-t-Tests mit einem zweiseitigen Signifikanzniveau von 0,050.

Daher beträgt unsere angestrebte Stichprobengröße 18 Probanden mit SLCO1B1 -11187G>A-Allel. Mit alters- und geschlechtsangepassten Kontrollen beträgt die Gesamtstichprobengröße 36 Probanden.

5. Nebenwirkungen Ein unerwünschtes Ereignis ist definiert als jede unbeabsichtigte Veränderung der Körperstruktur (Anzeichen) oder der Körperfunktion (Symptome), unabhängig davon, ob sie als arzneimittelbedingt angesehen wird oder nicht. Während der gesamten Dauer der Studie werden die Probanden angewiesen, alle unerwünschten Ereignisse zu melden. Alle unerwünschten Ereignisse, ob freiwillig, hervorgerufen oder bei einer körperlichen Untersuchung festgestellt, werden während der gesamten Studie aufgezeichnet (d. h. vom Zeitpunkt der ersten Dosisverabreichung an Tag 1 bis zu 1 Woche nach Abschluss der gesamten Studie oder dem Ausscheiden des Probanden aus der Studie). lernen). Der Schweregrad unerwünschter Ereignisse wird gemäß den FDA-Richtlinien als leicht, mittelschwer oder schwer kategorisiert.

Der Prüfarzt bestimmt die Beziehung des unerwünschten Ereignisses zum Studienmedikament unter Verwendung eines Vier-Kategorie-Systems (nicht verwandt, unwahrscheinlich, vermutet und wahrscheinlich) gemäß den FDA-Richtlinien. Ein schwerwiegendes unerwünschtes Arzneimittelerlebnis ist jedes unerwünschte Ereignis mit Testmaterial, das bei einer beliebigen Dosis auftritt und zu einem der von der FDA definierten Ergebnisse führt.

Eine unerwartete Nebenwirkung ist jede Nebenwirkung, die hinsichtlich Art, Schweregrad oder Häufigkeit nicht in der aktuell zugelassenen Arzneimittelkennzeichnung oder an anderer Stelle im allgemeinen Prüfplan identifiziert wurde. Alle schwerwiegenden und unerwarteten unerwünschten klinischen Ereignisse, unabhängig davon, ob sie mit dem Studienmedikament zusammenhängen oder nicht, werden den primären Prüfärzten innerhalb von 24 Stunden nach der Benachrichtigung mündlich gemeldet.

Anschließend wird ein Berichtsformular für schwerwiegende unerwünschte Ereignisse (SAE) ausgefüllt und das Children's Mercy Hospital and Clinics Institutional Review Board (IRB) benachrichtigt. Eine Erklärung des leitenden Prüfarztes mit den Einzelheiten der Nebenwirkung wird diesem Formular beigefügt. Laborberichte und andere Sicherheitsberichte werden weitergeleitet, sobald sie verfügbar sind.

HINWEIS: Der Begriff „schwer“ wird häufig verwendet, um die Intensität (Schwere) eines bestimmten Ereignisses zu beschreiben (wie bei einem leichten, mittelschweren oder schweren Myokardinfarkt); das Ereignis selbst kann jedoch von relativ geringer medizinischer Bedeutung sein (z. B. starke Kopfschmerzen). Dies ist nicht dasselbe wie „ernsthaft“, das auf dem Ergebnis des Teilnehmers/Ereignisses oder den Aktionskriterien basiert, die normalerweise mit Ereignissen verbunden sind, die eine Bedrohung für das Leben oder die Funktionsfähigkeit des Teilnehmers darstellen. Die Ernsthaftigkeit (nicht die Intensität) dient als Richtschnur für die Definition der regulatorischen Meldepflichten.

Ethische Aspekte Diese Studie wird für alle Studien gemäß den US-amerikanischen und internationalen Standards der Guten Klinischen Praxis (FDA-Vorschriften 21 CFR 312 für IND-Studien und FDA-Richtlinie E6) durchgeführt. Geltende staatliche Vorschriften und Forschungsrichtlinien und -verfahren der University of Missouri-Kansas City/Children's Mercy Hospital and Clinics werden ebenfalls befolgt.

Dieses Protokoll und alle Änderungen werden dem Children's Mercy Hospital and Clinics Institutional Review Board (IRB) zur formellen Genehmigung zur Durchführung der Studie vorgelegt. Die Entscheidung des IRB über die Durchführung der Studie wird dem Prüfer schriftlich mitgeteilt.

Allen Probanden und Eltern/Erziehungsberechtigten, sofern zutreffend, wird ein Erlaubnis-/Zustimmungs-/Zustimmungsformular zur Verfügung gestellt, das diese Studie beschreibt und ausreichende Informationen für die Probanden bereitstellt, um eine fundierte Entscheidung über ihre Teilnahme an dieser Studie zu treffen. Dieses Einwilligungsformular wird zusammen mit dem Protokoll zur Überprüfung und Genehmigung durch das IRB eingereicht. Die formelle Einwilligung/Erlaubnis/Zustimmung wird unter Verwendung der vom IRB genehmigten Formulare eingeholt, bevor ein Proband einem Studienverfahren unterzogen wird. Das Zustimmungs-/Genehmigungs-/Zustimmungsformular muss vom Probanden oder rechtlich akzeptablen Stellvertreter und dem vom Prüfer benannten Forschungsfachmann, der die Zustimmung einholt, unterzeichnet werden.