Distribuzione delle statine

L'obiettivo finale di questa indagine proposta è stabilire il ruolo della variazione genetica e dello sviluppo nei trasportatori chiave sulla relazione dose-esposizione di due statine comunemente usate nei bambini. Questo studio è il primo passo di una serie di indagini volte a determinare i meccanismi alla base delle variazioni della risposta fisiologica, dell'efficacia clinica e del significativo rischio di effetti avversi che circondano le statine nei bambini e negli adolescenti.

Disegno e metodi della ricerca

1. Progetto sperimentale 1.1. Agenti sperimentali Pravastatina compressa da 20 mg (età 8-13 anni), compressa da 40 mg (>14 anni) Simvastatina compressa da 10 mg (età 8-17), 20 mg (età>17 anni) Forniture commerciali di pravastatina e simvastatina approvate dalla FDA per verrà utilizzato l'uso nella dislipidemia pediatrica. Verranno utilizzate pravastatina e simvastatina della stessa fonte e lotto per tutti i soggetti. Le dosi indicate sopra sono scelte in base a precedenti dati su adulti e bambini 26, 28-32, 41 e sono coerenti con l'attuale etichettatura di pravastatina e simvastatina. Sebbene verranno utilizzate dosi fisse all'interno di un intervallo di età prestabilito, i dati sulla dose verranno analizzati corretti per il peso (mg/kg) in base al peso del paziente al momento della somministrazione.

1.2. Rischi/benefici Tutti i soggetti con un LDL >130 mg/dl (95% percentile) saranno eleggibili per questo studio, in linea con gli attuali criteri clinici per la terapia con statine. I rischi associati alla partecipazione a questo studio di farmacocinetica a dose singola dovrebbero essere minimi dato il noto profilo di eventi avversi per gli articoli dello studio e anche l'esposizione limitata. Gli effetti avversi lievi più comuni delle statine sono mal di testa, mialgia e sintomi gastrointestinali (dolore addominale, dispepsia, diarrea, costipazione). Tuttavia, nei bambini questi effetti avversi si verificano con la stessa frequenza del placebo 14, 15, 18. Gli effetti avversi rari includono l'aumento delle transaminasi epatiche e la miopatia, ma questi sono generalmente osservati con il trattamento cronico. Inoltre, ad oggi non sono stati segnalati casi di insufficienza epatica con statine52. Esiste anche un piccolo rischio associato al posizionamento del catetere endovenoso (IV) che verrà utilizzato per prelevare campioni di sangue in serie per l'analisi farmacocinetica e i laboratori di screening/sicurezza. Infine, vi è il rischio di perdita di riservatezza per i soggetti partecipanti. I metodi per proteggere le PHI e la gestione dei dati sono descritti in modo specifico nelle Sezioni 4 e 5 del protocollo CMH CPR (CMH IRB# 12040220). Tutti i suddetti rischi associati a questo studio clinico non terapeutico sono minimi.

Non vi è alcun beneficio diretto per i soggetti partecipanti, sebbene in futuro potrebbero esserci benefici per i bambini poiché si prevede che le informazioni ottenute dallo studio possano essere generalizzate alla popolazione più ampia di pazienti pediatrici che potrebbero richiedere il trattamento con statine. Lo scopo dello studio è determinare in che modo la variazione genetica influisce sulle concentrazioni plasmatiche di pravastatina e simvastatina seguendo le dosi raccomandate del farmaco in una popolazione di pazienti che non è stata precedentemente studiata. Pertanto, con questa conoscenza, potrebbero successivamente essere sviluppati protocolli futuri per "personalizzare" efficacemente il dosaggio per i soggetti pediatrici con i suddetti SNP che stanno assumendo pravastatina o simvastatina, migliorando così l'efficacia e la sicurezza per il singolo paziente.

1.3. Disegno/tipo dello studio Questo sarà uno studio incrociato, randomizzato, in aperto, a centro singolo, in pazienti con dislipidemia, che mette a confronto la farmacocinetica di pravastatina e simvastatina, in pazienti con maggiore o uguale a un allele variante nel gene SLCO1B1 (-11187 e/o c.521) a pazienti con genotipo wild-type/wild-type.

1.4. Campione di popolazione Si accederà al database CMH Cardiology Pharmacogenomics Repository (CPR) (CMH IRB# 12040220) per determinare i soggetti che soddisfano i criteri di inclusione. Una volta identificata la popolazione target e un insieme uguale di controlli abbinati per età, sesso e stadio di Tanner, i pazienti saranno invitati a partecipare a un unico centro, in aperto, randomizzato, cross-over, studio farmacocinetico di pravastatina e simvastatina .

1.5. Reclutamento dei soggetti Una volta identificati dal CPR una popolazione target e un insieme uguale di controlli abbinati per età e sesso, i potenziali partecipanti saranno informati sullo studio. Il contatto iniziale avverrà tramite un copione telefonico preparato. Coloro che accettano di partecipare saranno programmati per una visita all'Unità di ricerca clinica CMH per una visita di screening. Durante questa visita, lo studio verrà spiegato al paziente/famiglia del paziente, verrà ottenuto il permesso/assenso/consenso, verrà eseguito un esame fisico (compresa la stadiazione di Tanner) e test di laboratorio di screening. I partecipanti per i quali è stata ottenuta l'autorizzazione/assenso/consenso e sono soddisfatti i criteri di inclusione, dovranno tornare all'Unità di ricerca clinica CMH entro 6-14 giorni per il primo giorno del farmaco in studio.

1.6. Ritiro del soggetto La partecipazione alla sperimentazione farmacocinetica di pravastatina e simvastatina è completamente volontaria. Come parte del processo di autorizzazione/assenso/consenso informato; si informano i soggetti che possono revocare il loro permesso/assenso/consenso in qualsiasi momento. Se in qualsiasi momento, i soggetti dello studio hanno preoccupazioni sociali, filosofiche, religiose o familiari relative allo studio, possono decidere di revocare il permesso/assenso/consenso.

Un soggetto dello studio o una terza parte autorizzata (PCP) può revocare il permesso/assenso/consenso in qualsiasi momento. La richiesta di revoca del permesso/assenso/assenso può essere fatta verbalmente o per iscritto e indirizzata al personale dello studio (come indicato nel modulo di permesso/assenso/assenso). Il personale dello studio adotterà le misure appropriate per rispettare la volontà del soggetto dello studio e garantire che il soggetto dello studio sia in grado di ritirarsi senza compromettere l'integrità personale o la valutazione/trattamento medico. Nel caso in cui il permesso/assenso/consenso a continuare venga revocato dopo la raccolta parziale di campioni o dati, saranno analizzati e tabulati solo i dati esistenti. Il soggetto può essere ritirato dallo studio dagli investigatori, se in qualsiasi momento, a giudizio degli investigatori, la continua partecipazione del soggetto può essere associata alla produzione di rischi imprevisti (ad esempio, una reazione di ipersensibilità ad insorgenza tardiva dopo la somministrazione del articolo di studio).

1.7. Visite di studio del soggetto Lo studio comporterà tre visite totali. Una visita di screening e 2 visite giornaliere di studio sui farmaci.

Visita di screening (circa 1 ora) -All'arrivo per la visita di screening, lo studio sarà esaminato in profondità con il soggetto partecipante e i genitori/tutore legale del soggetto, ove applicabile. Avranno tempo sufficiente per esaminare il modulo di autorizzazione/assenso/consenso, rispondere a tutte le domande e risolvere i dubbi. Se accettano di partecipare, firmeranno il modulo di autorizzazione/assenso/consenso.

-Previa autorizzazione/assenso/consenso verranno sorteggiati i laboratori di screening. Se il paziente non è in grado di completare i laboratori dello studio in questo momento, verrà concordato un orario per farli eseguire almeno 1 giorno prima del Giorno n. 1 del farmaco in studio. La valutazione di laboratorio sarà composta da quanto segue.

1. Pannello chimico di ricerca (sodio, potassio, cloruro, anidride carbonica, gap anionico, calcio, fosforo, magnesio, glucosio, azotemia, creatinina, proteine ​​totali, albumina, bilirubina, ALT, AST, fosfatasi alcalina, GGT, LDH, colesterolo, acido urico e trigliceridi) (3 ml di sangue in parte superiore verde menta o rossa con tubo di gel ad anello giallo)
2. Emocromo completo con differenziale (1 mL in un tubo superiore lavanda EDTA da 3 mL o 250 uL in un microtainer)
3. Creatina fosfochinasi (0,2 ml in gel verde menta o parte superiore rossa con anello in oro)

4. Proteina C-reattiva (1 ml di sangue in un tubo superiore verde menta o rosso con gel ad anello giallo; o EDTA).

   -Se il paziente sta attualmente assumendo una statina, gli verrà chiesto di interrompere questo agente fino al completamento dell'intero studio.

   -Infine, in questa visita avverrà la programmazione delle successive giornate di studio. Lo Study Drug Day #1 sarà programmato 6 giorni e fino a 14 giorni dopo la visita di screening. La Giornata n. 2 del farmaco in studio sarà programmata 6 giorni e fino a 14 giorni dopo la Giornata n. 1 del farmaco in studio.

   Giorno n. 1 di studio sui farmaci (circa 10 ore) - All'arrivo all'Unità di ricerca clinica del Children's Mercy Hospital, il soggetto verrà sottoposto a un esame fisico di screening, inclusa la stadiazione di Tanner. Per le femmine, sarà ottenuto un campione di urina per il test di gravidanza gonadotropina corionica beta umana.

   -Una volta autorizzato a partecipare, il soggetto avrà una cannula silastica a permanenza (21 o 24 Ga) posizionata in una vena periferica sulla mano o sull'avambraccio allo scopo di ripetuti prelievi di sangue per supportare gli obiettivi farmacocinetici dello studio. La pervietà di questa cannula sarà mantenuta per tutto il periodo dello studio utilizzando una soluzione sterile di soluzione salina eparinizzata.

   -Una singola dose orale di simvastatina o pravastatina sarà ingerita con 150 ml di acqua di rubinetto dopo un digiuno notturno. La sequenza di statine somministrate sarà randomizzata tra le due visite di studio. Per due ore dopo la somministrazione dell'articolo di studio, i soggetti rimarranno a digiuno con solo piccoli sorsi d'acqua consentiti. Verrà servito un pasto salutare per il cuore standard e adatto all'età 2 ore dopo la somministrazione di statine e verrà servito uno spuntino nel pomeriggio della giornata di studio. L'acqua sarà consentita ad libitum.

   • Nel caso in cui il paziente vomiti entro 2 ore dall'ingestione del giorno n. 1 del farmaco in studio, verrà ritirato dallo studio per quel giorno e riprogrammato. Il soggetto sarà riprogrammato fino a 14 giorni dopo la visita di screening. Se non possono essere riprogrammati entro 14 giorni dai laboratori di screening originali, i laboratori verranno ridisegnati quel giorno. Nel caso in cui il paziente vomiti entro 2 ore dall'ingestione del giorno n. 2 del farmaco in studio, verrà ritirato dallo studio per quel giorno e riprogrammato. L'argomento può essere riprogrammato 6 giorni e fino a 14 giorni dopo il giorno n. 1 del farmaco in studio. Se sono trascorsi più di 14 giorni, ma non più di 21 giorni dallo Study Drug Day#1, il soggetto può essere riprogrammato, ma devono essere eseguiti ripetuti laboratori di screening.
   • Campioni di sangue venoso seriale (1,5 ml ciascuno) verranno prelevati dalla cannula venosa a permanenza per misurare i livelli plasmatici di farmaco e metabolita del farmaco del farmaco ingerito prima dell'ingestione (tempo 0) e a 0,5, 1, 1,5, 2, 3, 4, 6 e 8 ore dopo l'ingestione. Se la pervietà della cannula a permanenza viene persa, verrà posizionata o, in alternativa, i campioni di sangue rimanenti saranno ottenuti mediante venipuntura sterile su richiesta del soggetto dello studio. Dopo che i campioni sono stati prelevati, saranno posti in tubi di vetro contenenti EDTA di potassio e mescolati delicatamente capovolgendo ripetutamente. Verranno quindi immediatamente centrifugati a 4ºC per un totale di 10 minuti a 600g (~2000RPM) e immediatamente posti in un bagno di ghiaccio per essere trasportati al Laboratorio di Farmacologia Clinica dove verranno processati. La componente cellulare dei campioni al tempo 0 verrà conservata per il futuro isolamento del DNA leucocitario. Il componente plasmatico di ciascuno dei campioni di sangue ripetuti ottenuti per supportare gli obiettivi farmacocinetici dello studio verrà rimosso mediante aspirazione manuale e trasferito in un crioviale in polipropilene etichettato che verrà posto a -80ºC dove verrà conservato fino all'analisi.
   • Una volta prelevato il campione post-dose di 8 ore, verrà prelevato il sangue (5,2 ml) per i laboratori di sicurezza dello studio, verrà rimossa la cannula IV e il paziente verrà dimesso dall'unità di Farmacologia Clinica dopo la Giornata n. 2 dello studio sul farmaco confermato con il soggetto dello studio e/o i genitori del soggetto.

   Drug Study Day #2 (Circa 10 ore) -Dopo un minimo di 6 giorni e fino a 14 giorni dopo il primo giorno di ingestione del farmaco (periodo di wash out), il soggetto verrà riportato all'Unità di ricerca clinica CMH per un'altra farmacocinetica a dose singola studio. Dopo un esame fisico e l'inserimento di una cannula IV periferica, la statina alternativa che non è stata somministrata il primo giorno dello studio sul farmaco verrà somministrata con 150 ml di acqua di rubinetto dopo un digiuno notturno. Verrà utilizzato lo stesso schema di campionamento del sangue descritto per il giorno di studio #1. Il sangue per i laboratori di sicurezza dello studio verrà prelevato dopo il prelievo dell'ultimo campione a livello di farmaco e il paziente verrà quindi dimesso dall'Unità di ricerca clinica CMH. La quantità totale di sangue richiesta per l'intero studio è riassunta nella tabella seguente.

   Giorno dello studio Quantità della visita di screening del sangue 5,2 ml (Laboratori di screening) Giorno dello studio del farmaco n. 1 13,5 ml (Laboratori dello studio farmacocinetico) 5,2 ml (Laboratori della sicurezza) Giorno dello studio del farmaco n.

   Totale 42,6 ml (per un periodo di tempo di 1 mese)

   Una settimana dopo il completamento della Giornata n. 2 dello studio sui farmaci o in caso di ritiro anticipato, la famiglia verrà contattata telefonicamente per verificare la presenza di eventi avversi post-studio come definito nella sezione 5.

   1.10. Randomizzazione Lo studio proposto è uno studio di farmacocinetica a dose singola che confronta due statine, simvastatina e pravastatina. La sequenza di somministrazione delle due statine sarà randomizzata per ciascun partecipante allo studio.

   La farmacia del Children's Mercy Hospital Investigational Drug Service (IDS) sarà responsabile della procedura di randomizzazione e manterrà il controllo della sequenza di randomizzazione. Questo è uno studio in aperto, quindi né i ricercatori né i soggetti saranno accecati dalla randomizzazione della sequenza.

2. Valutazione di laboratorio 2.1. Analisi del farmaco e dei metaboliti Dopo l'ingestione di una singola dose di statina, verrà quantificato il farmaco corrispondente ei suoi metaboliti. La pravastatina viene somministrata nella sua forma acida aperta attiva e non ha metaboliti significativamente attivi27. Il metabolita inattivo più comune isolato nel plasma è la 3'α-isopravastatina e si forma primariamente in modo non enzimatico nelle condizioni acide dello stomaco 53. Pertanto, dopo l'ingestione di pravastatina, saranno valutati i livelli plasmatici seriati di pravastatina acida e 3'alfa-isopravastatina. (Ulteriori dettagli sugli intervalli di campionamento del plasma sono descritti nella Sezione 1.9). La simvastatina viene somministrata nella sua forma inattiva lattonica e subisce l'idrolisi nel principale metabolita attivo che è l'acido beta-idrossisimvastatina. I metaboliti minori sono 6'-idrossi-simvastatina, 3'idrossi-simvastatina, 3''-idrossi-simvastatina, 6'exometilene-simvastatina, 6'-idrossimetil-simvastatina e 6'-idrossicarbonil-simvastatina 25. Molti di questi metaboliti, quando convertiti nelle loro forme acide, hanno riportato attività nei cani ma sembrano accumularsi nella bile con scarso rilevamento nel plasma54. Pertanto, in questo studio, saranno valutati solo i livelli plasmatici seriati di simvastatina e simvastatina acida. (Ulteriori dettagli sugli intervalli di campionamento del plasma sono descritti nella Sezione 5.0).

Strategie analitiche per la determinazione della simvastatina e della simvastatina acida:

La simvastatina e l'acido simvastatina saranno determinati utilizzando un metodo di estrazione liquida/liquida assistita con salatura ad alto rendimento (SALLE) con acetonitrile e sali compatibili con la spettrometria di massa per l'analisi LC-MS/MS simultanea come descritto in precedenza 55. Questo metodo è stato ampiamente convalidato secondo le linee guida della FDA e, cosa più importante, dimostra un'interconversione minima di simvastatina e simvastatina acida durante la preparazione del campione. Una breve descrizione del metodo è la seguente. I campioni di plasma saranno scongelati a 4ºC in un bagno d'acqua a temperatura controllata e mantenuti a questa temperatura durante la procedura per ridurre al minimo l'interconversione degli analiti. Ad un'aliquota di campione, viene aggiunto uno standard interno stabile di simvastatina e acido di simvastatina marcato con isotopo deuterato (Toronto Research Chemicals) per consentire la spettrometria di massa con diluizione isotopica stabile. Il campione viene quindi estratto mediante la procedura SALLE a pH 4,5 per ridurre al minimo l'interconversione della simvastatina tra il lattone e la forma acida. L'estratto è stabile nell'autocampionatore per 33 ore a 4ºC e sarà analizzato mediante LC-MS/MS entro questo lasso di tempo. L'analisi del campione avverrà su uno spettrometro di massa a triplo quadupolo Waters TQ-S accoppiato a un cromatografo liquido Waters Acquity Ultra Performance (UPLC-MS-MS), utilizzando le condizioni cromatografiche (compresa la colonna) come precedentemente descritto 55. Simvastatina e il suo standard interno saranno monitorati in modalità ionica positiva utilizzando rispettivamente le transizioni 450-285 e 453-285 degli addotti metilammonio. L'acido simvastatina e il suo standard interno saranno misurati in modalità ioni negativi a causa della scarsa ionizzazione in modalità positiva. Le transizioni per questi analiti saranno 435-319 e 438-319. Tutti i campioni di plasma verranno analizzati in duplicato per ciascun intervallo di tempo di campionamento per garantirne la validità. Il plasma rimanente non utilizzato nell'analisi verrà conservato all'interno del laboratorio di Farmacologia Clinica in congelatori/frigoriferi dedicati come indicato nel Repository CPR. L'uso di questi campioni per ulteriori studi sarà a discrezione del direttore della RCP come indicato nel protocollo CPR (CMH IRB# 12040220).

Strategie analitiche per la determinazione di pravastatina e pravastatina lattone:

In letteratura è stato descritto un gran numero di strategie analitiche per la determinazione della pravastatina e del lattone della pravastatina 56-59, tuttavia molte di queste sono laboriose e non così elevate come la metodologia presentata per la simvastatina. A causa delle somiglianze strutturali tra simvastatina e pravastatina, è altamente probabile che il metodo analitico per simvastatina possa essere adattato per l'analisi di pravastatina e pravastatina lattone con modifiche minime. Nell'improbabile eventualità che il metodo della simvastatina non possa essere adattato all'analisi della pravastatina e del lattone della pravastatina, utilizzeremo il metodo presentato da Vlckova et al 60.

3 Valutazione della farmacocinetica 3.1 Parametri farmacocinetici Le analisi farmacocinetiche saranno condotte utilizzando Kinetica versione 5.0 (Thermo Electron, Philadelphia, PA). I dati sulla concentrazione plasmatica di pravastatina, simvastatina e metabolita rispetto al tempo saranno adattati alla curva utilizzando un algoritmo di peeling per generare stime iniziali dei parametri monoesponenziale. Le stime finali della costante di velocità di eliminazione terminale (delta z) saranno determinate da un algoritmo iterativo di regressione lineare dei minimi quadrati. Verrà utilizzato un approccio indipendente dal modello ei parametri di interesse saranno determinati come segue. I singoli Cmax e Tmax saranno ottenuti dall'esame diretto della concentrazione plasmatica rispetto al profilo temporale. L'area sotto la curva della concentrazione plasmatica in funzione del tempo durante il periodo di campionamento (AUC0-n) sarà calcolata utilizzando il metodo log-lineare misto dove n si riferisce al tempo di campionamento finale con concentrazioni quantificabili di farmaci o metaboliti. L'estrapolazione dell'AUC all'infinito (AUC0-infinito) sarà ottenuta sommando AUC0-n + Cpn/delta z, dove Cpn è l'ultima concentrazione plasmatica osservabile calcolata dall'adattamento della curva della pendenza terminale della concentrazione plasmatica vs. curva temporale e delta z è la costante di velocità di eliminazione terminale apparente. L'emivita di assorbimento ed eliminazione (t½) sarà calcolata dalle porzioni iniziale e terminale della curva concentrazione plasmatica vs. tempo per ciascun analita di interesse. Nel caso dei metaboliti, il termine di emivita corrispondente sarà quello usato per denotare la formazione del metabolita.

4 Piano statistico 4.1 Metodi statistici I dati farmacocinetici di pravastatina e simvastatina per la coorte dello studio saranno esaminati inizialmente utilizzando statistiche descrittive standard (vale a dire media aritmetica, media geometrica, deviazione standard, coefficiente di variazione, limiti di confidenza del 95%). Verrà impiegato un modello di analisi della varianza a misure ripetute per determinare gli effetti del trattamento, del periodo e della sequenza per le risultanti stime dei parametri farmacocinetici primari e secondari. I parametri farmacocinetici che riflettono l'esposizione (Cmax, AUC0-n, AUC0-infinito) saranno log-trasformati utilizzando il logaritmo naturale, gli intervalli di confidenza al 90% per la differenza nelle medie calcolate e l'antilog dei limiti di confidenza valutati rispetto al pre- criteri di bioequivalenza stabiliti come definiti nei nostri calcoli di potenza. Il limite di significatività accettato per tutte le analisi statistiche sarà alfa = 0,05.

Il contributo di diversi alleli alla variazione dei parametri farmacocinetici di pravastatina e simvastatina sarà studiato con analisi di regressione multipla. La classe genotipica (non portatori e portatori) sarà trattata come variabile indipendente. Per l'Obiettivo #1, le variabili farmacocinetiche per ciascun farmaco saranno confrontate tra non portatori e portatori di alleli varianti utilizzando il t-test indipendente. Allo stesso modo, per l'obiettivo n. 2, il rapporto tra ciascun parametro farmacocinetico nei portatori e nei non portatori (ad es. AUCcarrier/AUCnon-carrier) per pravastatina saranno confrontati con i corrispondenti rapporti dopo la somministrazione di simvastatina. Tutte le analisi saranno eseguite in SPSS versione 18.0 (SPSS, Chicago, IL).

4.2 Popolazione/i soggetta/e per l'analisi Studi precedenti hanno dimostrato che le statine altamente idrofile, come la pravastatina, sono più dipendenti dal trasportatore OATP1B1 rispetto alle statine più lipofile, come la simvastatina 41, 45. Si teorizza che la regione del promotore a monte (-11187) potrebbe avere un impatto più pronunciato sulla relazione genotipo-fenotipo, come visto nel precedente studio pediatrico 49. Pertanto, il nostro studio sarà potenziato per osservare una differenza dose-esposizione nelle varianti alleliche -11187 e wild-type/wild-type con pravastatina.

Si prevede che ci saranno 150 soggetti iscritti al database CPR che soddisfano i criteri di inclusione. La frequenza degli SNP SLCO1B1 (-11187G>A, 7-8%) da precedenti studi sugli adulti 61 suggerisce circa ~19-22 soggetti eterozigoti (secondo l'equazione di Hardy Weinberg) nel numero previsto di partecipanti dal database CPR. Con un tasso di partecipazione del 90%/10% di abbandono, ci sarebbero circa 17-20 soggetti.

Sulla base dei dati precedenti sulla farmacocinetica della pravastatina nell'adulto negli alleli varianti descritti sopra 45, una dimensione del campione di 18 in ciascun gruppo (genotipo -11187G>A e controllo wild-type) avrà una capacità dell'80% di rilevare una differenza in media di -101,0 in AUC (0-∞) (la differenza tra una media del Gruppo 1, m1, di 102,7 e una media del Gruppo 2, m2, di 203,7, che è quasi una differenza di 2 volte) assumendo che lo standard del Gruppo 1 la deviazione standard, s1, è 69,1 e la deviazione standard del gruppo 2, s2, è 126,4 utilizzando un test t di Satterthwaite a due gruppi con un livello di significatività a due code di 0,050.

Pertanto, la dimensione del nostro campione target è di 18 soggetti con allele SLCO1B1 -11187G>A. Con i controlli abbinati per età e sesso, la dimensione totale del campione è di 36 soggetti.

5. Eventi avversi Un evento avverso è definito come qualsiasi cambiamento non intenzionale nella struttura corporea (segni) o nella funzione corporea (sintomi), considerato o meno correlato al farmaco. Durante l'intera durata dello studio, i soggetti saranno istruiti a segnalare tutti gli eventi avversi. Tutti gli eventi avversi, volontari, provocati o rilevati all'esame fisico, saranno registrati durante lo studio (vale a dire, dal momento della prima somministrazione della dose il giorno 1 fino a 1 settimana dopo il completamento dell'intero studio o il ritiro del soggetto dal studio). La gravità degli eventi avversi sarà classificata come lieve, moderata o grave secondo le linee guida della FDA.

Lo sperimentatore determinerà la relazione dell'evento avverso con il farmaco in studio utilizzando un sistema a quattro categorie (non correlato, improbabile, sospetto e probabile) secondo le linee guida della FDA. Un'esperienza avversa grave è qualsiasi evento avverso materiale di prova che si verifica a qualsiasi dose che si traduce in uno qualsiasi degli esiti definiti dalla FDA.

Un'esperienza avversa inaspettata è qualsiasi esperienza avversa che non è identificata in natura, gravità o frequenza nell'attuale etichettatura del farmaco approvato o altrove nel piano di sperimentazione generale. Qualsiasi evento clinico avverso grave e inaspettato, correlato o meno al farmaco in studio, verrà segnalato verbalmente ai ricercatori primari entro 24 ore dalla notifica.

Successivamente, verrà compilato un modulo di segnalazione di eventi avversi gravi (SAE) e verrà notificato al Children's Mercy Hospital and Clinics Institutional Review Board (IRB). Una dichiarazione del ricercatore principale che delinei i dettagli della reazione avversa accompagnerà questo modulo. I rapporti di laboratorio e altri rapporti sulla sicurezza verranno inoltrati non appena disponibili.

NOTA: Il termine "grave" viene spesso utilizzato per descrivere l'intensità (gravità) di un evento specifico (come nell'infarto miocardico lieve, moderato o grave); l'evento stesso, tuttavia, può avere un significato medico relativamente minore (come un forte mal di testa). Questo non è lo stesso di "serio", che si basa sul risultato del partecipante/evento o sui criteri di azione solitamente associati a eventi che rappresentano una minaccia per la vita o il funzionamento del partecipante. La gravità (non l'intensità) funge da guida per la definizione degli obblighi normativi di segnalazione.

Aspetti etici Questo studio sarà condotto secondo gli standard statunitensi e internazionali di buona pratica clinica (regolamenti FDA 21 CFR 312 per gli studi IND e guida FDA E6) per tutti gli studi. Saranno seguite anche le normative governative applicabili e le politiche e le procedure di ricerca dell'Università del Missouri-Kansas City/Children's Mercy Hospital and Clinics.

Questo protocollo e gli eventuali emendamenti saranno presentati al Children's Mercy Hospital and Clinics Institutional Review Board (IRB) per l'approvazione formale per condurre lo studio. La decisione dell'IRB in merito alla conduzione dello studio sarà comunicata per iscritto allo sperimentatore.

A tutti i soggetti e ai genitori/tutori legali, ove applicabile, verrà fornito un modulo di autorizzazione/assenso/consenso che descriva questo studio e fornisca informazioni sufficienti affinché i soggetti prendano una decisione informata sulla loro partecipazione a questo studio. Questo modulo di consenso sarà inviato con il protocollo per la revisione e l'approvazione da parte dell'IRB. Il consenso/permesso/assenso formale sarà ottenuto, utilizzando i moduli approvati dall'IRB, prima che un soggetto venga sottoposto a qualsiasi procedura di studio. Il modulo di consenso/autorizzazione/assenso deve essere firmato dal soggetto o da un surrogato legalmente accettabile e dal professionista della ricerca designato dallo sperimentatore che ottiene il consenso.