Ciśnienie okluzji limfatycznej w kończynie dolnej

Wstrzyknięcie środka kontrastowego:

Zieleń indocyjaninowa (ICG) to barwnik trikarbocyjaninowy, który jest powszechnie stosowany w wątrobie, układzie sercowo-naczyniowym, chirurgii plastycznej i okulistyce. Zwykle podaje się go dożylnie w dawce zawartej między 0,1 a 0,5 mg/kg. Po podaniu ICG wiąże się z białkami osocza, lipoproteinami i lipidami, po czym jest szybko i całkowicie usuwany z krwi przez wątrobę. ICG jest wzbudzony i emituje fluorescencję w bliskiej podczerwieni (około 800 nm).

W tym badaniu badacze zawieszą ICG w 25 ml czystej wody, a następnie rozcieńczą czystą wodą, aby osiągnąć końcowe stężenie 0,2 mg/ml. Każdy pacjent otrzyma śródskórne wstrzyknięcie 0,5 ml rozcieńczonego ICG (tj. 100 µg), za pomocą igły podskórnej. Badacze wystandaryzują punkt wstrzyknięcia i wstrzykną ICG śródskórnie w pierwszą przestrzeń międzypalcową, zgodnie z metodą iniekcji stosowaną w limfoscyntygrafii. W ten sposób badacze systematycznie podkreślają ten sam obszar powierzchownej sieci limfatycznej.

Akwizycja obrazów fluorescencyjnych:

Po wstrzyknięciu miejsca wstrzyknięcia zostaną zaklejone taśmą, aby uniknąć przesycenia aparatu i rozprzestrzenienia się ICG na skórze oraz niepożądanego fluorescencyjnego tła na obrazach. Aby uzyskać fluorescencyjne obrazowanie przepływu limfatycznego w nogach, zostanie zastosowany system obrazowania fluorescencyjnego w bliskiej podczerwieni (Photo Dynamic Eye lub kamera PDE firmy Hamamatsu Photonics - Japonia). Kamera jest utrzymywana w stałej pozycji, 15 cm nad badanym polem, za pomocą systemu mocującego firmy Noga Tools. Wzmocniony sygnał analogowy jest przetwarzany na sygnał cyfrowy przez konwerter firmy Terratec (Model Grabster AV 450 MX) i przesyłany do monitora, który pozwala na wizualizację sieci limfatycznej i przepływu limfy w czasie rzeczywistym. Obrazy będą zapisywane na dedykowanym zewnętrznym dysku twardym firmy Iomega, model MDHDU.

Sesja odbędzie się w zaciemnionym pomieszczeniu, aby umożliwić akwizycję obrazów fluorescencyjnych NIR.

Specyficzny manualny drenaż limfatyczny, opracowany przez pierwszego autora i jego zespół pod wpływem NIRF, jest wykonywany bezpośrednio po wstrzyknięciu, podczas całej sesji eksperymentalnej, aby mieć pewność, że badane naczynia limfatyczne trwale zawierają limfę. Chłonka jest przemieszczana ręką operatora od miejsca wstrzyknięcia do linii granicznej narysowanej na skórze 5 cm przed dystalnym końcem przezroczystego mankietu. Ten zoptymalizowany ręczny drenaż limfatyczny będzie wykonywany przez 3 minuty w celu łatwego wykrycia powierzchownych naczyń limfatycznych w dystalnej części nogi i zaznaczenia obszaru zainteresowania. MLD został znormalizowany przez pierwszego autora dla tego eksperymentu i składa się z ciągłej i powtarzanej sekwencji, wykonywanej od dystalnej do proksymalnej, 3 manewrów „napełniania” realizowanych w punkcie wstrzyknięcia, po których następują 2 manewry „wymywania” realizowane od punkt wstrzyknięcia do linii granicznej przed mankietem. Następnie na skórze rysowane są dwie fluorescencyjne linie w odległości 50 mm w celu ograniczenia przestrzeni odniesienia.

Mankiet przezroczystego sfigmomanometru zakłada się na dystalną część nogi, tuż nad kostką.

Sfigmomanometr jest podłączony do miernika ciśnienia, wskazującego mm słupa rtęci (dokładność manometru cyfrowego Testo® 510 wynosi 0,1 mmHg).

Kamera PDE będzie utrzymywana prostopadle na głównej osi nogi, na poziomie środka mankietu.

W celu upewnienia się, że obserwowane naczynia limfatyczne zawierają limfę, fluorescencyjna limfa jest przesuwana podczas całego doświadczenia ręką operatora od miejsca wkłucia do linii granicznej wykreślonej na skórze na 5 cm przed dystalnym końcem przezroczystego mankietu .

• Pierwszy krok: jako linię bazową rejestrujemy i obserwujemy przepływ limfy pod nienadmuchanym mankietem.
• Drugi krok: mankiet jest napompowany do 30 mmHg, rejestrowane są obrazy podczas trzech przejść przepływu limfy.

Obecnych jest trzech niezależnych obserwatorów. Kontrolują trzy przejścia limfy w celu wyrażenia zgody na przejście do kolejnego etapu ciśnieniowego.

- Trzeci krok: Badacze zwiększają napompowane ciśnienie w krokach co 10 mmHg, rejestrując obrazy przy każdym wzroście (oczekiwanie na trzy przejścia limfy na każdym kroku).

Eksperyment jest zakończony, gdy tylko badacze wizualnie zauważą całkowite zatrzymanie progresji limfy pod przezroczystym mankietem. W tym momencie ciśnienie zostaje obniżone o 10 mmHg, aby potwierdzić powrót przepływu limfy. Po tym etapie badacze obserwują i rejestrują obrazy naczynia limfatycznego od miejsca wstrzyknięcia do nasady kończyny.