Lymphatischer Verschlussdruck in der unteren Extremität

Kontrastmittelinjektion:

Indocyaningrün (ICG) ist ein Tricarbocyanin-Farbstoff, der häufig für hepatische, kardiovaskuläre, plastische Chirurgie- und Augenheilkundeanwendungen verwendet wird. Es wird üblicherweise intravenös in einer Dosis zwischen 0,1 und 0,5 mg/kg injiziert. Nach der Verabreichung bindet ICG an Plasmaproteine, Lipoproteine ​​und Lipide und wird danach schnell und vollständig von der Leber aus dem Blut entfernt. ICG wird angeregt und emittiert Fluoreszenz im nahen Infrarot (ca. 800 nm).

In dieser Studie werden die Forscher ICG in 25 ml reinem Wasser suspendieren und anschließend mit reinem Wasser auf eine Endkonzentration von 0,2 mg/ml verdünnen. Jeder Proband erhält eine intradermale Injektion von 0,5 ml verdünntem ICG (d.h. 100 ug), unter Verwendung einer subkutanen Nadel. Die Prüfärzte standardisieren den Injektionspunkt und injizieren ICG intradermal in den ersten Interdigitalraum, entsprechend der Injektionsmethode, die für die Lymphszintigraphie verwendet wird. Auf diese Weise markieren die Ermittler systematisch denselben Bereich des oberflächlichen lymphatischen Netzwerks.

Akquisition von Fluoreszenzbildern:

Nach der Injektion werden die Injektionsstellen mit Klebeband abgedeckt, um eine Übersättigung der Kamera und eine Ausbreitung von ICG auf der Haut und einen unerwünschten fluoreszierenden Hintergrund auf den Bildern zu vermeiden. Um eine Fluoreszenzbildgebung des Beinlymphflusses zu erhalten, wird ein Nahinfrarot-Fluoreszenzbildgebungssystem verwendet (Photo Dynamic Eye oder PDE-Kamera von Hamamatsu Photonics – Japan). Die Kamera wird durch ein Haltesystem von Noga Tools in einer festen Position, 15 cm über dem Untersuchungsfeld, gehalten. Das verstärkte analoge Signal wird durch einen Konverter von Terratec (Modell Grabster AV 450 MX) in ein digitales Signal umgewandelt und an einen Monitor übertragen, der es ermöglicht, das Lymphnetz und den Lymphfluss in Echtzeit zu visualisieren. Bilder werden auf einem dedizierten externen Festplattenlaufwerk von Iomega, Modell MDHDU, aufgezeichnet.

Die Sitzung findet in einem dunklen Raum statt, um die Aufnahme von NIR-Fluoreszenzbildern zu ermöglichen.

Eine spezifische manuelle Lymphdrainage, die vom Erstautor und seinem Team unter NIRF-Feedback entwickelt wurde, wird unmittelbar nach der Injektion während der gesamten experimentellen Sitzung durchgeführt, um sicherzustellen, dass die untersuchten Lymphgefäße dauerhaft Lymphe enthalten. Die Lymphe wird mit der Hand des Bedieners von der Injektionsstelle bis zu einer Grenzlinie getrieben, die 5 cm vor dem distalen Ende der transparenten Manschette auf der Haut gezeichnet ist. Diese optimierte manuelle Lymphdrainage wird 3 Minuten lang durchgeführt, um die oberflächlichen Lymphgefäße im distalen Bereich des Beins leicht zu erkennen und den interessierenden Bereich zu markieren. Die MLD wird vom Erstautor für dieses Experiment standardisiert und besteht aus einer kontinuierlichen und wiederholten Sequenz, ausgeführt von distal nach proximal, von 3 "Auffüll"-Manövern, die am Injektionspunkt durchgeführt werden, gefolgt von 2 "Auswasch"-Manövern, die von ausgeführt werden Injektionspunkt bis zur Grenzlinie vor der Manschette. Anschließend werden zwei fluoreszierende Linien im Abstand von 50 mm auf die Haut gezeichnet, um den Bezugsraum einzugrenzen.

Die Manschette des transparenten Blutdruckmessgeräts wird am distalen Teil des Beins direkt über dem Knöchel platziert.

Das Blutdruckmessgerät ist mit einem Druckmessgerät verbunden, das mm Quecksilbersäule anzeigt (Testo® 510 Digitalmanometer Genauigkeit 0,1 mmHg.).

Die PDE-Kamera wird senkrecht zur Hauptachse des Beins auf Höhe der Manschettenmitte gehalten.

Um sicherzustellen, dass beobachtete Lymphgefäße Lymphe enthalten, wird die fluoreszierende Lymphe während der gesamten Erfahrung mit der Hand des Bedieners von der Injektionsstelle bis zu einer auf der Haut 5 cm vor dem distalen Ende der transparenten Manschette gezogenen Grenzlinie getrieben .

• Erster Schritt: Als Baseline erfassen und beobachten wir den Lymphfluss unter der nicht aufgepumpten Manschette.
• Zweiter Schritt: Die Manschette wird auf 30 mmHg aufgepumpt, Bilder werden während drei Lymphflusspassagen aufgenommen.

Drei unabhängige Beobachter sind anwesend. Sie kontrollieren die drei Lymphbahnen, um die Zustimmung zum nächsten Druckschritt zu geben.

- Dritter Schritt: Die Untersucher erhöhen den aufgeblasenen Druck in Schritten von 10 mmHg und zeichnen bei jeder Erhöhung Bilder auf (Warten auf drei Lymphpassagen bei jeder Stufe).

Das Experiment ist abgeschlossen, sobald die Untersucher den vollständigen Stopp der Lymphprogression unter der transparenten Manschette visuell feststellen. In diesem Moment wird der Druck um 10 mmHg reduziert, um die Rückkehr des Lymphflusses zu bestätigen. Nach diesem Schritt beobachten und zeichnen die Ermittler Bilder des Lymphgefäßes von der Injektionsstelle bis zur Wurzel der Extremität auf.