Lymfatický okluzní tlak v dolní končetině

Injekce kontrastní látky:

Indocyanine Green (ICG) je trikarbokyaninové barvivo, které se běžně používá pro jaterní, kardiovaskulární, plastickou chirurgii a oftalmologické aplikace. Obvykle se podává intravenózní injekcí v dávce mezi 0,1 a 0,5 mg/kg. Po podání se ICG váže na plazmatické proteiny, lipoproteiny a lipidy a je poté rychle a úplně odstraněn z krve játry. ICG je excitován a emituje fluorescenci v blízké infračervené oblasti (kolem 800 nm).

V této studii výzkumníci suspendují ICG ve 25 ml čisté vody a následně zředí čistou vodou, aby dosáhli konečné koncentrace 0,2 mg/ml. Každý subjekt dostane intradermální injekci 0,5 ml zředěného ICG (tj. 100 ug) pomocí hypodermické jehly. Vyšetřovatelé standardizují bod vpichu a vstřikují ICG intradermálně do prvního interdigitálního prostoru podle injekční metody používané pro lymfoscintigrafii. Tímto způsobem vyšetřovatelé systematicky zvýrazňují stejnou oblast povrchové lymfatické sítě.

Získávání fluorescenčních snímků:

Po injekci budou místa vpichu překryta páskou, aby se zabránilo přesycení kamery a aby se zabránilo šíření ICG na kůži a nežádoucímu fluorescenčnímu pozadí na snímcích. K získání fluorescenčního zobrazení lymfatického toku nohou bude použit blízký infračervený fluorescenční zobrazovací systém (Photo Dynamic Eye nebo PDE kamera od Hamamatsu Photonics - Japonsko). Kamera je udržována ve fixní poloze, 15 cm nad vyšetřovacím polem, pomocí přidržovacího systému od Noga Tools. Zesílený analogový signál je převeden na digitální signál pomocí převodníku od Terratec (Model Grabster AV 450 MX) a přenesen na monitor, který umožňuje vizualizovat lymfatickou síť a lymfatický tok v reálném čase. Snímky budou zaznamenávány na vyhrazený externí pevný disk Iomega, model MDHDU.

Sezení bude probíhat v temné místnosti, aby bylo možné pořídit NIR fluorescenční snímky.

Specifická manuální lymfodrenáž, vyvinutá prvním autorem a jeho týmem pod NIRF zpětnou vazbou, se provádí bezprostředně po injekci, po celou dobu experimentu, aby bylo jisté, že vyšetřované lymfatické cévy trvale obsahují lymfu. Lymfa je poháněna rukou operátora od bodu vpichu k limitní linii nakreslené na kůži ve vzdálenosti 5 cm před distálním koncem průhledné manžety. Tato optimalizovaná manuální lymfodrenáž bude prováděna po dobu 3 minut, aby bylo možné snadno detekovat povrchové lymfatické cévy v distální oblasti nohy a označit oblast zájmu. MLD je standardizována prvním autorem pro tento experiment a skládá se z kontinuální a opakované sekvence, prováděné od distální k proximální, ze 3 „naplňovacích“ manévrů realizovaných v místě vstřikování, následovaných 2 „vymývacími“ manévry realizovanými od bod vpichu k mezní čáře před manžetou. Poté se na kůži nakreslí dvě fluorescenční čáry ve vzdálenosti 50 mm, aby se omezil referenční prostor.

Manžeta průhledného tlakoměru je umístěna na distální části nohy těsně nad kotníkem.

Tlakoměr je připojen k tlakoměru, který ukazuje mm rtuti (digitální manometr Testo® 510 s přesností 0,1 mmHg.).

Kamera PDE bude udržována kolmo na hlavní ose nohy, na úrovni středu manžety.

Aby bylo zajištěno, že pozorované lymfatické cévy obsahují lymfu, je fluorescenční lymfa poháněna během všech zkušeností rukou operátora od bodu vpichu až po limitní čáru nakreslenou na kůži ve vzdálenosti 5 cm před distálním koncem průhledné manžety. .

• První krok: jako základní linii zaznamenáme a sledujeme lymfatický tok pod nenafouknutou manžetou.
• Druhý krok: manžeta se nafoukne na 30 mmHg, snímky se zaznamenají během tří průchodů lymfy.

Jsou přítomni tři nezávislí pozorovatelé. Kontrolují tři průchody lymfy, aby dali souhlas k přechodu k dalšímu tlakovému kroku.

- Třetí krok: Vyšetřovatelé zvyšují nafouknutý tlak v krocích po 10 mmHg a zaznamenávají snímky při každém zvýšení (čekají na tři průchody lymfy v každém kroku).

Experiment je dokončen, jakmile vyšetřovatelé vizuálně zaznamenají úplné zastavení progrese lymfy pod průhlednou manžetou. V tu chvíli se tlak sníží o 10 mmHg, aby se potvrdil návrat toku lymfy. Po tomto kroku vyšetřovatelé pozorují a zaznamenávají snímky lymfatické cévy od místa vpichu až po kořen končetiny.