Lymfatisk okklusjonstrykk i underekstremitet

Injeksjon av kontrastmiddel:

Indocyanine Green (ICG) er et trikarbocyaninfargestoff som ofte brukes til lever, kardiovaskulær, plastisk kirurgi og oftalmologi. Det injiseres vanligvis intravenøst ​​i en dose på mellom 0,1 og 0,5 mg/kg. Etter administrering binder ICG seg til plasmaproteiner, lipoproteiner og lipider, og blir deretter raskt og fullstendig fjernet fra blodet av leveren. ICG er opphisset og avgir fluorescens i det nær-infrarøde (rundt 800 nm).

I denne studien vil etterforskerne suspendere ICG i 25 ml rent vann og deretter fortynnes med rent vann for å nå en sluttkonsentrasjon på 0,2 mg/ml. Hvert individ vil motta en intradermal injeksjon av 0,5 ml fortynnet ICG (f.eks. 100 µg), ved bruk av en kanyle. Etterforskerne vil standardisere injeksjonspunktet og injisere ICG intradermalt i det første interdigitale rommet, i henhold til injeksjonsmetoden som brukes for lymfoscintigrafi. På denne måten fremhever etterforskerne systematisk det samme området av det overfladiske lymfenettverket.

Opptak av fluorescensbilder:

Etter injeksjonen vil injeksjonsstedene dekkes med tape for å unngå overmetning av kameraet, og for å unngå spredning av ICG på huden og uønsket fluorescerende bakgrunn på bildene. For å oppnå fluorescensavbildning av legglymfestrøm, vil et nær-infrarødt fluorescensavbildningssystem bli brukt (Photo Dynamic Eye, eller PDE-kamera fra Hamamatsu Photonics - Japan). Kameraet holdes i en fast posisjon, 15 cm over undersøkelsesfeltet, av et holdesystem fra Noga Tools. Det forsterkede analoge signalet transformeres til et digitalt signal av en omformer fra Terratec (Model Grabster AV 450 MX) og overføres til en monitor, som gjør det mulig å visualisere lymfatisk nettverk og lymfestrøm i sanntid. Bildene vil bli tatt opp på en dedikert ekstern harddisk Iomega, modell MDHDU.

Økten vil finne sted i et mørkt rom, for å tillate NIR-fluorescensbilder.

Spesifikk manuell lymfedrenasje, utviklet av førsteforfatteren og hans team under NIRF-tilbakemelding, utføres umiddelbart etter injeksjonen, under hele eksperimentelle økten for å være sikker på at de undersøkte lymfekarene permanent inneholder lymfe. Lymfen drives med hånden til operatøren fra injeksjonspunktet til en grenselinje tegnet på huden 5 cm før den distale ekstremiteten til den gjennomsiktige mansjetten. Denne optimaliserte manuelle lymfedrenasjen vil bli utført i 3 minutter for enkelt å oppdage de overfladiske lymfekarene i den distale delen av benet og for å markere interesseområdet. MLD er standardisert av førsteforfatteren for dette eksperimentet, og sammensatt av en kontinuerlig og gjentatt sekvens, utført fra distal til proksimal, av 3 "fyll opp" manøvrer realisert på injeksjonspunktet, etterfulgt av 2 "utvaskings" manøvrer realisert fra injeksjonspunktet til grenselinjen før mansjetten. Deretter tegnes to fluorescerende linjer på huden i en avstand på 50 mm for å begrense referanserommet.

Mansjetten til det gjennomsiktige blodtrykksmåleren er plassert på den distale delen av benet, rett over ankelen.

Blodtrykksmåleren er koblet til en trykkmåler, som indikerer mm kvikksølv (Testo® 510 Digital Manometer presisjon 0,1 mmHg.).

PDE-kameraet holdes vinkelrett på benets hovedakse, i nivå med midten av mansjetten.

For å sikre at observerte lymfekar inneholder lymfe, drives den fluorescerende lymfen under all erfaring med hånden til operatøren fra injeksjonspunktet til en grenselinje tegnet på huden 5 cm før den distale ekstremiteten til den gjennomsiktige mansjetten .

• Første trinn: som baseline registrerer og observerer vi lymfestrømmen under den ikke-oppblåste mansjetten.
• Andre trinn: mansjetten blåses opp med 30 mmHg, bilder tas opp under tre lymfestrømpassasjer.

Tre uavhengige observatører er til stede. De kontrollerer de tre lymfegangene for å gi samtykke til å gå over til neste trykktrinn.

- Tredje trinn: Etterforskerne øker det oppblåste trykket i trinn på 10 mmHg og tar bilder ved hver økning (venter på tre passasjer med lymfe ved hvert trinn).

Eksperimentet er fullført så snart etterforskerne visuelt merker at lymfeprogresjonen fullstendig stoppes under den gjennomsiktige mansjetten. I det øyeblikket reduseres trykket med 10 mmHg for å validere returen av lymfestrømmen. Etter dette trinnet observerer og registrerer etterforskerne bilder av lymfekaret fra injeksjonspunktet opp til roten av lemmen.