Lymfatische occlusiedruk in de onderste ledematen

Injectie van contrastmiddel:

Indocyaninegroen (ICG) is een tricarbocyaninekleurstof die vaak wordt gebruikt voor hepatische, cardiovasculaire, plastische chirurgie en oogheelkundige toepassingen. Het wordt gewoonlijk intraveneus geïnjecteerd in een dosis tussen 0,1 en 0,5 mg/kg. Na toediening bindt ICG zich aan plasma-eiwitten, lipoproteïnen en lipiden en wordt daarna snel en volledig door de lever uit het bloed verwijderd. ICG is opgewonden en zendt fluorescentie uit in het nabij-infrarood (ongeveer 800 nm).

In deze studie zullen de onderzoekers ICG in 25 ml zuiver water suspenderen en vervolgens met zuiver water verdunnen tot een eindconcentratie van 0,2 mg/ml. Elke proefpersoon krijgt een intradermale injectie van 0,5 ml verdunde ICG (bijv. 100 µg), met behulp van een injectienaald. De onderzoekers zullen het injectiepunt standaardiseren en ICG intradermaal injecteren in de eerste interdigitale ruimte, volgens de injectiemethode die wordt gebruikt voor lymfoscintigrafie. Op deze manier markeren de onderzoekers systematisch hetzelfde gebied van het oppervlakkige lymfenetwerk.

Acquisitie van fluorescentiebeelden:

Na injectie worden de injectieplaatsen afgedekt met tape om oververzadiging van de camera te voorkomen en om verspreiding van ICG op de huid en ongewenste fluorescerende achtergrond op de beelden te voorkomen. Om fluorescentiebeeldvorming van beenlymfestroom te verkrijgen, zal een nabij-infrarood fluorescentiebeeldvormingssysteem worden gebruikt (Photo Dynamic Eye of PDE-camera van Hamamatsu Photonics - Japan). De camera wordt in een vaste positie gehouden, 15 cm boven het onderzoeksveld, door een houdersysteem van Noga Tools. Het versterkte analoge signaal wordt omgezet in een digitaal signaal door een converter van Terratec (Model Grabster AV 450 MX) en overgebracht naar een monitor, die het mogelijk maakt om het lymfenetwerk en de lymfestroom in real-time te visualiseren. Beelden worden opgenomen op een speciale externe harde schijf Iomega, model MDHDU.

De sessie vindt plaats in een donkere kamer, zodat NIR-fluorescentiebeelden kunnen worden verkregen.

Specifieke manuele lymfedrainage, ontwikkeld door de eerste auteur en zijn team onder feedback van NIRF, wordt onmiddellijk na de injectie uitgevoerd, gedurende de hele experimentele sessie om er zeker van te zijn dat de onderzochte lymfevaten permanent lymfevaten bevatten. De lymfe wordt met de hand van de operator voortgestuwd vanaf het injectiepunt tot een grenslijn die op de huid is getekend op 5 cm voor het distale uiteinde van de transparante manchet. Deze geoptimaliseerde manuele lymfedrainage wordt gedurende 3 minuten uitgevoerd om de oppervlakkige lymfevaten in het distale deel van het been gemakkelijk te detecteren en het interessegebied te markeren. De MLD is gestandaardiseerd door de eerste auteur voor dit experiment en bestaat uit een continue en herhaalde reeks, uitgevoerd van distaal naar proximaal, van 3 "opvul"-manoeuvres uitgevoerd op het injectiepunt, gevolgd door 2 "uitwas"-manoeuvres uitgevoerd vanaf het injectiepunt tot aan de limietlijn voor de manchet. Vervolgens worden twee fluorescerende lijnen op de huid getekend op een afstand van 50 mm om de referentieruimte te beperken.

De manchet van de transparante bloeddrukmeter wordt op het distale deel van het been geplaatst, net boven de enkel.

De bloeddrukmeter is aangesloten op een drukmeter die mm kwik aangeeft (Testo® 510 digitale manometer precisie 0,1 mmHg.).

De PDE-camera wordt loodrecht op de hoofdas van het been gehouden, ter hoogte van het midden van de manchet.

Om er zeker van te zijn dat de waargenomen lymfevaten lymfevaten bevatten, wordt de fluorescerende lymfe tijdens de hele ervaring met de hand van de operator voortgestuwd vanaf het injectiepunt naar een grenslijn die op de huid is getekend op 5 cm voor het distale uiteinde van de transparante manchet .

• Eerste stap: als basislijn registreren en observeren we de lymfestroom onder de niet-opgeblazen manchet.
• Tweede stap: de manchet wordt opgeblazen tot 30 mmHg, er worden beelden opgenomen tijdens drie lymfestroompassages.

Er zijn drie onafhankelijke waarnemers aanwezig. Ze controleren de drie lymfepassages om toestemming te geven om naar de volgende drukstap te gaan.

- Derde stap: de onderzoekers verhogen de opgeblazen druk in stappen van 10 mmHg en nemen beelden op bij elke verhoging (wachtend op drie passages van lymfe bij elke stap).

Het experiment is voltooid zodra de onderzoekers visueel vaststellen dat de lymfeprogressie onder de transparante manchet volledig is gestopt. Op dat moment wordt de druk verlaagd met 10 mmHg om de terugkeer van de lymfestroom te valideren. Na deze stap observeren en nemen de onderzoekers beelden op van het lymfevat vanaf het injectiepunt tot aan de wortel van het ledemaat.