Ekspresja IL-7 i IL-7R u pacjentów z RZS z aktywną vs. nieaktywną chorobą leczonych DMARD lub CIMZIA

Próbki krwi będą pobierane od pacjentów, u których zdiagnozowano RZS na podstawie kryteriów klasyfikacji ACR. Badanie obejmie 200 dawców. Ogólną liczbę badanych podzielono na dwie grupy, uzyskując moc 95% na poziomie błędu I rodzaju 5% [określono na podstawie danych wstępnych]. W pierwszej grupie 200 dawców będzie leczonych metotreksatem, plaquenilem i/lub prednizonem (leki przeciwreumatyczne modyfikujące przebieg choroby; DMARD), którzy osiągną remisję (wskaźnik aktywności choroby, DAS28<2,6) lub nie osiągną remisji (DAS28>2,6). . 50 dawców zostanie wykorzystanych, gdy zareagują na DMARD i osiągną remisję (DAS28 <2,6) a 150 dawców, którzy nie reagują na DMARDs, zostanie przeniesionych do drugiej grupy. W drugiej grupie 150 dawców będzie leczonych metotreksatem, plaquenilem i/lub prednizonem oraz produktem Cimzia® (dostarczonym nam przez UCB).

W pierwszej grupie pacjentów próbki krwi będą pobierane od pacjentów z RZS leczonych lekami przeciwreumatycznymi modyfikującymi przebieg choroby (DMARD), takimi jak metotreksat, plaquenil i/lub prednizon, u których uzyskano remisję (DAS28<2,6). Pacjenci, u których uzyskano remisję (DAS28<2,6), krew zostanie pobrana tylko raz podczas rutynowej wizyty pacjenta.

Druga grupa będzie składać się z pacjentów z RZS, którzy nie zareagowali na „DMARDs”. Pacjenci ci otrzymają ponadto bezpłatne leki (DMARD), takie jak metotreksat, plaquenil i/lub prednizon, a także Cimzia® (dostarczone nam przez UCB). Cimzia® jest lekiem zatwierdzonym przez FDA i stanowi standard opieki. Próbki krwi będą pobierane od pacjentów leczonych DMARD, w tym metotreksatem, plaquenilem i/lub prednizonem oraz Cimzia® (dostarczony nam przez UCB), którzy mają nieaktywną remisję (DAS28<2,6). W tej grupie próbki krwi będą pobierane na początku badania oraz 3 i 6 miesięcy po leczeniu preparatem Cimzia podczas wizyty pacjenta dzięki naszej współpracy z wyżej wymienionymi reumatologami. Pacjenci otrzymujący dostawowe iniekcje sterydów będą wykluczeni z badania.

Komórki jednojądrzaste PB zostaną wyizolowane z krwi pełnej RZS i pobrane do probówek do pobierania krwi i wyizolowane przez wirowanie w gradiencie Histopaque. Monocyty zostaną wyizolowane z jednojądrzastych komórek RA PB przez selekcję negatywną (jak pokazano we wstępnych danych), a połowa monocytów zostanie zróżnicowana do makrofagów przez 7 dni. Poziomy ekspresji dla IL-7 i IL-7R zostaną określone za pomocą reakcji łańcuchowej polimerazy z odwrotną transkrypcją w czasie rzeczywistym (RT-PCR) i analizy metodą cytometrii przepływowej.

W naszej analizie statystycznej najpierw przeprowadzimy analizę warstwową, aby ocenić zróżnicowane poziomy ekspresji u pacjentów z RZS z aktywną i nieaktywną chorobą, kontrolując rodzaj leczenia. Analiza danych zostanie przeprowadzona we współpracy ze statystykami Centrum Nauk Klinicznych i Translacyjnych UIC. W szczególności przeprowadzimy porównanie ekspresji IL-7 i IL-7R wśród pacjentów z RZS z aktywną (DAS28>2,6) vs. choroba nieaktywna (DAS28<2,6) dla grupy DMARDs (grupa 1). Następnie przeprowadzimy podobne porównanie dla grupy terapeutycznej DMARDs i Cimzia® (grupa 2). Analiza warstwowa może dostosować się do potencjalnego zakłócającego efektu otrzymanego leczenia i pozwala na wykrycie potencjalnych zależności różnicowych między poziomami ekspresji IL-7 lub IL-7R a stanem choroby. Przeprowadzimy również zbiorczą analizę regresji, w której logarytm ekspresji IL-7 lub IL-7R od pacjentów zostanie poddany regresji na podstawie wskaźnika grupy leczenia [DMARDs (grupa 1) w porównaniu z DMARDs plus terapia Cimzia® (grupa 2)] i choroby status (choroba czynna lub nieaktywna), który wykazywałby interakcje między grupami leczonymi a aktywnością choroby. Taka analiza łączy razem pacjentów z dwóch grup terapeutycznych i dlatego może zwiększyć wielkość próby, a tym samym potencjalnie moc wykrywania zależności między biomarkerami a stanem choroby. Próbki RA będą pobierane przez okres 2 lat, a dane będą analizowane w ostatnim roku obowiązywania wniosku.