Expresión de IL-7 e IL-7R en pacientes con AR con enfermedad activa versus inactiva tratados con DMARD o CIMZIA

Se recogerán muestras de sangre de pacientes a los que se les haya diagnosticado AR según los criterios de clasificación del ACR. El estudio incluirá 200 donantes. El número total de sujetos se divide en dos grupos para obtener una potencia del 95 % con un nivel de error de tipo I del 5 % [determinado en base a los datos preliminares]. En el primer grupo, 200 donantes serán tratados con metotrexato, plaquenil y/o prednisona (Fármacos antirreumáticos modificadores de la enfermedad; FAME) que alcancen la remisión (puntuación de actividad de la enfermedad, DAS28<2,6) o no alcancen la remisión (DAS28>2,6) . Se utilizarán 50 donantes a medida que respondan a los DMARD y logren la remisión (DAS28<2.6) y 150 donantes que no responden a DMARD serán transferidos al segundo grupo. En el segundo grupo, 150 donantes serán tratados con metotrexato, plaquenil y/o prednisona y Cimzia® (que nos proporciona la UCB).

En el primer grupo de pacientes se obtendrán muestras de sangre de pacientes con AR tratados con fármacos antirreumáticos modificadores de la enfermedad (FAME) como metotrexato, plaquenil y/o prednisona que consiguen la remisión (DAS28<2,6). Los pacientes que alcanzan la remisión (DAS28<2,6), solo se tomará sangre una vez en la visita de rutina del paciente.

El segundo grupo estará formado por pacientes con AR que no respondieron a los "DMARD". Estos pacientes recibirán además (DMARD) como metotrexato, plaquenil y/o prednisona, así como Cimzia® (proporcionado por UCB) de forma gratuita. Cimzia® es un medicamento aprobado por la FDA y es un estándar de atención. Se obtendrán muestras de sangre de los pacientes tratados con FARME, incluidos metotrexato, plaquenil y/o prednisona y Cimzia® (proporcionado por UCB) que tengan una remisión inactiva (DAS28<2,6). En este grupo, se recogerán muestras de sangre al inicio del estudio, así como a los 3 y 6 meses después del tratamiento con Cimzia en la visita del paciente gracias a nuestra colaboración con los reumatólogos antes mencionados. Los pacientes que reciban inyecciones intraarticulares de esteroides serán excluidos del estudio.

Las células mononucleares de PB se aislarán de la sangre completa de RA y se introducirán en tubos de extracción de sangre y se aislarán mediante centrifugación en gradiente Histopaque. Los monocitos se aislarán de células mononucleares RA PB mediante selección negativa (como se muestra en los datos preliminares) y la mitad de los monocitos se diferenciarán en macrófagos durante 7 días. Los niveles de expresión de IL-7 e IL-7R se determinarán mediante la reacción en cadena de la polimerasa con transcriptasa inversa en tiempo real (RT-PCR) y el análisis de citometría de flujo.

En nuestro análisis estadístico, primero realizaremos un análisis estratificado para evaluar los niveles de expresión diferencial en pacientes con AR con enfermedad activa e inactiva, controlando por el tipo de tratamiento. El análisis de datos se realizará en colaboración con un estadístico del Centro de Ciencias Clínicas y Traslacionales de la UIC. Específicamente, realizaremos la comparación de la expresión de IL-7 e IL-7R entre pacientes con AR con activo (DAS28>2.6) vs. enfermedad inactiva (DAS28<2,6) para el grupo FARME (grupo 1). A continuación, realizaremos una comparación similar para el grupo de tratamiento con FARME y Cimzia® (grupo 2). El análisis estratificado puede ajustar el posible efecto de confusión del tratamiento recibido y permite la detección de las posibles relaciones diferenciales entre los niveles de expresión de IL-7 o IL-7R y el estado de la enfermedad. También realizaremos un análisis de regresión combinado en el que el logaritmo de expresión de IL-7 o IL-7R de los pacientes se retrocede en el indicador del grupo de tratamiento [FARME (grupo 1) versus FARME más terapia con Cimzia® (grupo 2)] y la enfermedad estado (enfermedad activa o inactiva) que demostraría la interacción entre los grupos de tratamiento y la actividad de la enfermedad. Tal análisis reúne sujetos de dos grupos de tratamiento y, por lo tanto, puede aumentar el tamaño de la muestra y, por lo tanto, potencialmente el poder de detectar las relaciones entre los biomarcadores y el estado de la enfermedad. Las muestras de RA se recolectarán durante un período de 2 años y los datos se analizarán en el último año de la propuesta.