Exprese IL-7 a IL-7R u pacientů s RA s aktivním vs. neaktivním onemocněním léčeným DMARD nebo CIMZIA

Vzorky krve budou odebírány pacientům, u kterých byla diagnostikována RA na základě klasifikačních kritérií ACR. Studie bude zahrnovat 200 dárců. Celkový počet subjektů je rozdělen do dvou skupin, aby se dosáhlo síly 95 % na úrovni chyby I. typu 5 % [určeno na základě předběžných údajů]. V první skupině bude 200 dárců léčeno methotrexátem, plaquenilem a/nebo prednisonem (antirevmatická léčiva modifikující onemocnění; DMARD), kteří buď dosáhnou remise (skóre aktivity onemocnění, DAS28<2,6), nebo nedosáhnou remise (DAS28>2,6). . 50 dárců bude využito, protože reagují na DMARD a dosáhnou remise (DAS28<2,6) a 150 dárců, kteří nereagují na DMARDs, bude převedeno do druhé skupiny. Ve druhé skupině bude 150 dárců léčeno methotrexátem, plaquenilem a/nebo prednisonem a Cimzií® (dodává nám UCB).

V první skupině pacientů budou odebrány vzorky krve od pacientů s RA léčených antirevmatickými léky modifikujícími onemocnění (DMARD), jako je methotrexát, plaquenil a/nebo prednison, které dosáhnou remise (DAS28<2,6). Pacienti, kteří dosáhli remise (DAS28<2,6), krev bude odebrána pouze jednou při běžné návštěvě pacienta.

Druhou skupinu budou tvořit pacienti s RA, kteří nereagovali na „DMARDs“. Tito pacienti budou dále bezplatně dostávat (DMARD), jako je methotrexát, plaquenil a/nebo prednison, stejně jako Cimzia® (poskytuje nám ji UCB). Cimzia® je lék schválený FDA a je standardem péče. Vzorky krve budou odebrány od pacientů léčených DMARDs včetně methotrexátu, plaquenilu a/nebo prednisonu a Cimzia® (dodává nám UCB), kteří mají inaktivní remisi (DAS28<2,6). V této skupině budou vzorky krve odebírány na začátku studie a také 3 a 6 měsíců po léčbě Cimzií při návštěvě pacienta prostřednictvím naší spolupráce s výše uvedenými revmatology. Pacienti, kteří dostávají intraartikulární steroidní injekce, budou ze studie vyloučeni.

PB mononukleární buňky budou izolovány z plné krve RA a odebrány do zkumavek pro odběr krve a izolovány gradientovou centrifugací Histopaque. Monocyty budou izolovány z mononukleárních buněk RA PB negativní selekcí (jak je ukázáno v předběžných datech) a polovina monocytů bude diferencována na makrofágy po dobu 7 dnů. Hladiny exprese pro IL-7 a IL-7R budou stanoveny reverzní transkripční polymerázovou řetězovou reakcí v reálném čase (RT-PCR) a analýzou průtokovou cytometrií.

V naší statistické analýze nejprve provedeme stratifikovanou analýzu, abychom vyhodnotili úrovně diferenciální exprese u pacientů s RA s aktivním a neaktivním onemocněním, přičemž kontrolujeme typ léčby. Analýza dat bude provedena ve spolupráci se statistikem UIC Centra pro klinické a translační vědy. Konkrétně provedeme srovnání exprese IL-7 a IL-7R u pacientů s RA s aktivní (DAS28>2,6) vs. neaktivní onemocnění (DAS28<2,6) pro skupinu DMARD (skupina 1). Potom provedeme podobné srovnání pro terapeutickou skupinu DMARD a Cimzii® (skupina 2). Stratifikovaná analýza se může přizpůsobit potenciálnímu matoucímu účinku přijaté léčby a umožňuje detekci potenciálních rozdílných vztahů mezi hladinami exprese IL-7 nebo IL-7R a stavem onemocnění. Provedeme také souhrnnou regresní analýzu, ve které je logaritmus exprese IL-7 nebo IL-7R od pacientů regresován na indikátoru léčebné skupiny [DMARDs (skupina 1) versus na DMARDs plus terapie Cimzia® (skupina 2)] a onemocnění stav (aktivní nebo neaktivní onemocnění), který by demonstroval interakci mezi léčebnými skupinami a aktivitou onemocnění. Taková analýza spojuje subjekty ze dvou léčebných skupin dohromady a může proto zvýšit velikost vzorku, a tudíž potenciálně schopnost detekce vztahů mezi biomarkery a stavem onemocnění. Vzorky RA budou shromažďovány po dobu 2 let a data budou analyzována v posledním roce návrhu.