Espressione di IL-7 e IL-7R in pazienti affetti da artrite reumatoide con malattia attiva rispetto a malattia inattiva trattata con DMARD o CIMZIA

Saranno raccolti campioni di sangue da pazienti a cui è stata diagnosticata l'AR in base ai criteri di classificazione ACR. Lo studio includerà 200 donatori. Il numero totale di soggetti è diviso in due gruppi per ottenere una potenza del 95% con un livello di errore di tipo I del 5% [determinato sulla base dei dati preliminari]. Nel primo gruppo, 200 donatori saranno trattati con metotrexato, placchenil e/o prednisone (farmaci antireumatici modificanti la malattia; DMARD) che ottengono la remissione (punteggio di attività della malattia, DAS28<2.6) o non ottengono la remissione (DAS28>2.6) . Verranno utilizzati 50 donatori in quanto rispondono ai DMARD e ottengono la remissione (DAS28<2,6) e 150 donatori che non rispondono ai DMARD saranno trasferiti al secondo gruppo. Nel secondo gruppo, 150 donatori saranno trattati con metotrexato, placchenil e/o prednisone e Cimzia® (fornitoci da UCB).

Nel primo gruppo di pazienti, verranno prelevati campioni di sangue da pazienti affetti da AR trattati con farmaci antireumatici modificanti la malattia (DMARD) come metotrexato, placchenile e/o prednisone che raggiungono la remissione (DAS28<2.6). I pazienti che ottengono la remissione (DAS28<2.6), il sangue verrà prelevato solo una volta durante la visita di routine del paziente.

Il secondo gruppo sarà composto da pazienti affetti da AR che non hanno risposto ai "DMARD". Questi pazienti riceveranno inoltre (DMARD) come metotrexato, placchenil e/o prednisone, nonché Cimzia® (fornitoci da UCB) gratuitamente. Cimzia® è un farmaco approvato dalla FDA ed è uno standard di cura. Verranno prelevati campioni di sangue dai pazienti trattati con DMARD inclusi metotrexato, placchenil e/o prednisone e Cimzia® (fornitici da UCB) che hanno remissione inattiva (DAS28<2.6). In questo gruppo, i campioni di sangue saranno raccolti all'inizio dello studio così come 3 e 6 mesi dopo il trattamento con Cimzia alla visita del paziente attraverso la nostra collaborazione con i suddetti reumatologi. I pazienti che ricevono iniezioni intrarticolari di steroidi saranno esclusi dallo studio.

Le cellule mononucleari PB saranno isolate dal sangue intero RA e prelevate in provette per la raccolta del sangue e isolate mediante centrifugazione in gradiente Histopaque. I monociti saranno isolati dalle cellule mononucleate RA PB mediante selezione negativa (come mostrato nei dati preliminari) e metà dei monociti saranno differenziati in macrofagi per 7 giorni. I livelli di espressione per IL-7 e IL-7R saranno determinati mediante reazione a catena della polimerasi di trascrizione inversa in tempo reale (RT-PCR) e analisi di citometria a flusso.

Nella nostra analisi statistica, eseguiremo prima un'analisi stratificata per valutare i livelli di espressione differenziale nei pazienti affetti da AR con malattia attiva e inattiva, controllando per il tipo di trattamento. L'analisi dei dati sarà eseguita in collaborazione con uno statistico dell'UIC Center for Clinical and Translational Science. In particolare, eseguiremo il confronto dell'espressione di IL-7 e IL-7R tra i pazienti con RA con attivo (DAS28>2.6) vs. malattia inattiva (DAS28<2.6) per il gruppo DMARD (gruppo 1). Effettueremo quindi un confronto simile per il gruppo di terapia con DMARD e Cimzia® (gruppo 2). L'analisi stratificata può adattarsi al potenziale effetto confondente del trattamento ricevuto e consente di rilevare le potenziali relazioni differenziali tra i livelli di espressione di IL-7 o IL-7R e lo stato della malattia. Effettueremo anche un'analisi di regressione aggregata in cui il logaritmo dell'espressione di IL-7 o IL-7R dai pazienti è regredito sull'indicatore del gruppo di trattamento [DMARD (gruppo 1) rispetto a DMARD più terapia con Cimzia® (gruppo 2)] e malattia stato (malattia attiva o inattiva) che dimostrerebbe l'interazione tra i gruppi di trattamento e l'attività della malattia. Tale analisi riunisce i soggetti di due gruppi di trattamento e può quindi aumentare la dimensione del campione, e quindi potenzialmente il potere di rilevare le relazioni tra biomarcatori e stato della malattia. I campioni RA saranno raccolti per un periodo di 2 anni ei dati saranno analizzati nell'ultimo anno della proposta.